aula - MONONUCLEOSE

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TÂNIA SILVIA FRÖDE
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1.0 Definição: síndrome caracterizada por febre, faringite, hiperplasia linfática,   linfoadenopatia, linfocitose atípica, anticorpos heterófilos
 2.0 Etiologia: infecção primária causada pelo vírus Epstein Barr (EBV) . O EBV é um herpesvírus.
 3.0 Transmissão: orofaringe.
 * O vírus se multiplica nas células da orofaringe
* pode ser encontrado em secreções cervicais
* a replicação do vírus na orofaringe persiste indefinidamente
* O vírus infecta as tonsilas, linfócitos B sanguíneos
 
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4.0 Período de incubação: 2-5 semanas
5.0 Incidência: adolescentes e adultos jovens- aproximadamente 95% da população mundial é infectada por este agente.
6.0 Manifestações Clínicas:
  febre (400), faringite, linfoadenopatia, linfonodos cervicais ou tonsilares, esplenomegalia (50% dos casos), hepatomegalia ou hepatite severa (20%), dor de cabeça (20%), vômitos (20%), rash cutâneo (4%), albuminúria (10%), Tosse, pneumonites, meningite asséptica, cerebrites, disfunção cerebelar, polineurites, mielites, hemorragias esplênicas, miocardite, pericardite, diarréia, anemia hemolítica, trombocitopenia, agranulocitose, etc.
A infecção pelo EBV está associada a pacientes imunossuprimidos ou com linfomas de células B.
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VIAS DE CONTAMINAÇÃO
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ATIVAÇÃO DO SISTEMA IMUNE
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SINTOMAS
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SINTOMAS
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SINTOMAS
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SINTOMAS
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SINTOMAS
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SINTOMAS
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SINTOMAS
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RASH
CUTÂNEO
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LINFÓCITOS ATÍPICOS -MONOCITÓIDE
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LINFÓCITOS ATÍPICOS -MONOCITÓIDE
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LINFÓCITOS ATÍPICOS -MONOCITÓIDE
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LINFÓCITOS ATÍPICOS -MONOCITÓIDE
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ANÁLISE HISTOLÓGICA
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SOROLOGIA PARA EBV
IFI – imunofluorescência indireta
ELISA – enzimaimunoensaio
Sorologia para detecção de:
Anticorpos anti-antígeno capsídeo viral (IgG, IgM)
Antígeno anti-nuclear (NA) IgG
Antígeno anti-Early (EA) IgG
Anticorpos heterófilos (IgM)
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ANTÍGENO – HEMÁCIAS DE CARNEIRO
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REAÇÃO DE PAUL BUNNEL DAVIDSOHN
 
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DA MONONUCLEOSE INFECCIOSA.
 
MÉTODO: Reação de hemaglutinação direta em tubos/ Reação de aglutinação e absorção.
AMOSTRA: 1,0 ml de soro inativado 
– jejum obrigatório 8 h.
Lavar hemácia de carneiro.
Preparar uma solução de hemácia de carneiro a 2%.
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Colocar 0,1ml de Hemácia de Carneiro a 2% em todos os tubos,
Homogeneizar e deixar em repouso por 3 horas, livre de agitação,
Ler: Se a leitura da primeira fase for igual ou maior do que 1/28, proceder a segunda fase.
Valor de Referência: título até 1/28 
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REAÇÃO DE HEMAGLUTINAÇÃO EM TUBOS
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INTERPRETAÇÃO
O teste pesquisa anticorpos heterófilos contra hemácias de carneiro. O achado de títulos superiores a 1/28 sugere positividade para mononucleose infecciosa, porém pode ser outro grupo de anticorpos heterófilos. A confirmação é feita pela segunda fase, Reação de Paul-Bunnell-Davidsohn.
SEGUNDA FASE: REAÇÃO DIFERENCIAL DE DAVIDSOHN
Esta reação é realizada visando classificar as aglutininas heterófilas encontradas, titulando-as, após a absorção do soro por rim de cobaia e hemácias de boi fervidas. 
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-0,1 mL DE SORO
-0,5 mL DE ANTÍGENO POLPA DE RIM DE COBAIA
-1,9 mL de salina
Centrifugar 2500 rpm – 5 min
-0,1 mL DE SORO
-0,5 mL DE GLÓBULOS FERVIDOS DE BOI
1,9 mL de salina
Centrifugar 2500 rpm – 5 min
REAÇÃO DE DAVIDHSON- DIFERENCIAL
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Os anticorpos heterófilos da mononucleose infecciosa ligam-se totalmente, absorção total, com o antígeno Glóbulo Fervido de Boi e parcialmente, absorção parcial com o antígeno Polpa de Rim de Cobaia.
Valor de Referência: < 1/28 e Interpretação de títulos diferenciais.
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EMISSÃO DO RESULTADO
PAUL-BUNNELL-DAVIDSHON
Método: Reação de Hemaglutinação Direta.
Resultado: Antígeno Hemácia de Carneiro- Soro reagente até diluição 1/112.
 Antígeno Glóbulos Fervidos de Boi- Soro não reagente.
 Antígeno Polpa de Rim de Cobaias- Soro reagente até diluição 1/56.
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MONOTESTE- Reação de Hoff-Bauer
 
É um teste de hemaglutinação direta em lâmina, qualitativa, utilizando hemácias formalizadas de cavalo, extremamente sensível, positiva-se precocemente na primeira ou segunda semana da doença e perdura positiva por 8 a 12 semanas. Por isso pode-se encontrar Monoteste positivo com reação de Paul-Bunnell não reagente, tornando-se reagente mais tarde. Mesmo com Monoteste negativo, deve-se repetir o teste em curto espaço de tempo. Tendo suspeita de Mononucleose, mesmo com soros com resultados negativos, pode ser investigado anticorpos específicos para o EBV por Ensaio imunoenzimático, se necessário.
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MONOTESTE- Reação de Hoff-Bauer
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MÉTODO: Reação de aglutinação em lâmina
AMOSTRA: 0,5 ml de soro – jejum obrigatório – 8 h
TÈCNICA:
Colocar 1 gota de reagentes controles e soro puro em cada well.
Adicionar 1 gota de solução de hemácias de carneiro lavadas a 10% = Antígeno.
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Homogeneizar, fazer movimentos circulares por 3 minutos e Ler.
OBSERVAÇÂO: a hemácia de cavalo também é utilizada como antígeno.
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MONOTESTE- Reação de Hoff-Bauer
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Resultado:
Reação qualitativa: soro reagente/Soro não reagente
Valor de Referência: Soro não reagente.
 
 INTERPRETAÇÂO
 Se positivo, prossegue-se a reação de Paul-Bunnell.
Se negativo, nos casos suspeitos, faz-se avaliação de anticorpos específicos através da Imunofluorescência ou ELISA.
TÂNIA SILVIA FRÖDE
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Bibliografia:
 
 FRANCO, S. Imunologia, In: Manual de bancada Laboratório Sérgio Franco. FAULHABER, M. H. W. e CRUZ, M. C. P. (eds), Rio de Janeiro, Brasil, p. 195-247, 1996.
 FRÉJAVILLE, J.P. & KAMOUN, P. Manual de exames de laboratório. 500 exames. Atheneu. Rio de Janeiro, p. 647-648, 1989.
 KIEFF, E. D. Mononucleose infecciosa, In: Cecil tratado de medicina interna, BENETT e PLUM (eds), Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, Brasil, p. 1960, 1996.
 Pardini, H. In: Manual de exames. Pardini, H (ed). Minas Gerais, Brasil, 2000. – 
 http:www.labhpardini.com.br
 REICHE, E.M.V., MORIMOTO, H.K., INOUYE, M.M.Z., PONTELLO, R. Manual de exames imunológicos. In: Procedimentos técnicos e interpretação laboratorial. Reiche, E.M.V., Morimoto, H.K., Inouye, M.M.Z., Pontello, R. (eds). Londrina, Paraná, Brasil, p. 1-143, 1998.
 WOLF, M.A. Mononucleose infecciosa. In: Diagnóstico Laboratorial das principais doenças infecciosas e auto-imunes. FERREIRA, A.W. & ÁVILA, S.L.M.(eds) Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, p. 62-66, 1996.