Anticorpos Monoclonais e Policlonais

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Anticorpos Monoclonais e Policlonais
Leisiane Ferreira de Oliveira 93418
Anticorpo específico para um antígeno e produzido por um hibridroma de células B (linhagem celular resultante da fusão de uma única célula B normal com uma linha imortalizada de tumor de célula B).
Anticorpos Monoclonais
Anticorpos policlonais (como diz o nome) possuem vários clones, ou seja, se originam de diferentes linfócitos B, o que significa que reagem com vários epítopos do antígeno (por exemplo, várias partes de uma proteína).
Anticorpos policlonais
Obtenção de anticorpos Monoclonais
Obtenção de anticorpos 
Policlonais
1901 1ª evidência do uso de anticorpos: imunoglobulinas utilizadas para neutralizar toxina diférica.
1984 1ª técnica de utilização de hibridomas para produção de anticorpos monoclonais.
Histórico
Tratamentos para muitas doenças;
Cura para o câncer;
Mas existiam limitações ....
Expectativas
Anticorpo
Processo de humanização
Primeiramente , o animal a ser selecionado deve ser livre de patógeno e geneticamente selecionado. Geralmente utiliza-se animais singênicos.
Para a produção em escala comercial, animais como camundongos, coelhos e aves, normalmente galinhas, são utilizados. No entanto, os camundongos são os mais utilizados.
Produção de anticorpos monoclonais
Imuniza-se o animal com epítopo desejado.
Retira-se os linfócitos B, principalmente do baço.
Funde-se os linfócitos B obtidos com células de mieloma (hibridioma) com auxílio de um surfactante PEG (Polietilenoglicol).
Produção de anticorpos monoclonais
Células do mieloma tem enzimas deficientes:
Hipoxantina guanina fosforibosil transferase (HGPRT)
Timidina quinase
A carência dessas enzimas leva a células a morte em meio HAT.
Meio HAT: contém hipoxatina, timidina e aminopterina. Seleciona as células fusionadas.
Seleção dos hibridiomas
Células fusionadas são capazes de sobreviver a esse meio por suprirem a sua carência enzimática pela fusão dos linfócitos B.
Os linfócitos B são fusionados e morrem após um certo período visto que as células do mioloma são “imortalizadas”.
Seleção dos hibridiomas
Células fusionadas são capazes de sobreviver a esse meio por suprirem a sua carência enzimática pela fusão dos linfócitos B.
Os linfócitos B são fusionados e morrem após um certo período visto que as células do mioloma são “imortalizadas”.
Clonagem dos hibridiomas