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NORMAS DE SEGURANÇA E RECOMENDAÇÕES QUE DEVERÃO SER OBSERVADAS NO LABORATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS DE MICROBIOLOGIA AMBIENTAL 1) É obrigatório o uso de jalecos; 2) Quem tiver cabelo comprido é necessário prendê-los antes da execução das atividades práticas; 3) Não é permitido comer, beber ou fumar no laboratório. Evitar levar à boca qualquer objeto ou substância (lápis, caneta, instrumentos de trabalho, corantes, etc.); 4) O material pessoal (bolsas, livros, mochilas estojos, etc.) deve ser mantido longe das bancadas de trabalho; 5) Não iniciar uma aula prática sem que tenha lido cuidadosamente as instruções no roteiro e compreendido os objetivos e o modo de execução; 6) Checar sempre o nome dos reagentes químicos e culturas microbianas em uso; 7) A bancada deve ser desinfestada com álcool 70% antes e após as práticas; 9) Lavar bem as mãos antes e após a realização do trabalho em bancada; 10) Não inalar qualquer substância diretamente; 11) Em caso de acidentes (derramamento de culturas, quebra de tubos e/ou placas, respingo de cultura, ferimentos, etc, comunicar imediatamente a professora responsável pela aula prática; 12) Descarte do material: a- Material contaminado (pipetas, zaragatoas (“swabs”) e lâminas preparadas pelos alunos, devem ser colocados nos recipientes próprios para descarte); b- Lâminas e tubos com cultura fornecidos pela professora deverão ser deixados sobre a bancada; c- Fósforo riscado, algodão e papel utilizado, deverão ser colocados nas caixas de lixo. 13) Culturas, lâminas, reagentes e outros materiais não devem ser removidos do laboratório sem a autorização do responsável; 14) O microscópio é um instrumento valioso e deve ser manipulado e usado cuidadosamente. Qualquer dano ou defeito deve ser comunicado ao professor. No fim de cada aula, limpar a lente ocular e as objetivas com papel macio; 15) Identificar todo o material das práticas com o nome do aluno ou grupo e a respectiva data; 16) Guardar o jaleco, lavar as mãos e passar álcool 70% antes de sair do laboratório. AULA PRÁTICA 1 Introdução a Microbiologia Ambiental Objetivo: Conhecer as normas e procedimentos que devem ser adotados em um laboratório de microbiologia, principais equipamentos e vidrarias que serão utilizados nas práticas. Limpeza e preparo do material de laboratório A limpeza no laboratório de microbiologia deve ser rigorosa, para evitar possíveis contaminações. O sucesso na realização de trabalhos que envolvem microrganismos depende, também, da limpeza e de materiais utilizados. Produtos utilizados na limpeza Álcool 70% Detergentes Hipoclorito de sódio 2% Vidrarias e outros materiais utilizados Agulha Alça de Drigalsky Alças de platina para repique Becker Erlenmeyer Lâminas Lamínulas Lâmparinas Meios de cultura Pinças de dissecação Pipetas graduadas Placas de Petri Provetas graduadas Tubos de Cultura Equipamentos utilizados Agitador Autoclave Balança de precisão Bico de Bunsen Câmara de fluxo laminar Estufa tipo BOD Estufa de secagem e esterilização Estufa incubadora Destilador de água Geladeira Medidor de pH Microscópio estereoscópio Microscópio óptico AULA PRÁTICA 2 Presença dos Microrganismos no Ambiente Objetivo: Verificar a presença de microrganismos no ambiente. Materiais: Micro-ondas Lamparina ou bico de Bunsen Placas de Petri esterilizadas Swabs ou cotonetes esterilizados Meios de culturas AN (Ágar-nutriente) e Meio BDA (Batata-Dextrose- Ágar) Álcool a 70% Etiquetas Canetas para vidraria Filme plástico Procedimento: 1- Verter o meio em 30 placas de Petri os meios (NA e BDA) e esperar solidificar; 2- Expor uma das placas durante 15 minutos ao ar; 3- Friccionar o swab na bancada, em seguida, espalhá-lo na superfície do meio; 4- Fazer o mesmo com a sola do sapato; 5- Tocar suavemente com o dedo na superfície do meio; 6- Lavar os dedos e repetir o item anterior; 7- Soprar, tossir ou espirrar dentro da placa; 8- Expor a placa aberta ao fluxo de saída de ar de um aparelho de ar condicionado por alguns segundos
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