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Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 1 GUÍA DE ESTUDIO PARA LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Elaborado por. QBP Refugia Pérez Sánchez Primera Edición: Octubre 2006 Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 2 UNIDAD I. INTRODUCCIÓN 1. Define qué es la microbiología: Ciencia que trata de los seres diminutos, invisibles a simple vista que se denominan microorganismos; se dedica al estudio de las regularidades que rigen la vida y el desarrollo de los mismos, así como las alteraciones que provocan en el organismo humano, animal, vegetal o materia inerte. 2. Da una clasificación de la microbiología: Microbiología agrícola, industrial, sanitaria, veterinaria, marina, cósmica, médica. 3. ¿De qué trata la microbiología? Podemos señalar varios aspectos de esta ciencia: (1) Estudia células vivas y cómo funcionan. (2) Trata de los microorganismos, que constituyen una importante clase de células capaces de existir en forma libre o independiente. Se centra especialmente en las bacterias, un gran grupo de células de estructura simple y enorme importancia básica y práctica. (3) Investiga acerca de la diversidad microbiana y de la evolución, es decir, sobre cómo y por qué aparecen los diferentes tipos de microorganismos. (4) Estudia lo que los microorganismos hacen en el mundo en su conjunto: en la sociedad humana, en nuestros propios cuerpos y en los de animales y plantas. (5) Se ocupa del papel central que tiene como ciencia biológica básica y de cómo el conocimiento de los microorganismos puede ayudar a comprender mejor la biología de los organismos superiores, incluido el hombre. 4. Define qué es salud: Estado en que el ser orgánico ejerce normalmente todas sus funciones; falta subjetiva de alteraciones corporales o psíquicas. La Organización Mundial de la Salud (OMS) la define como el estado de completo bienestar físico, mental y social, y no sólo como la ausencia de enfermedad o invalidez. 5. Define los siguientes conceptos: 5.1 Agente: entidad biológica, física, química, psicológica o social, que en interacción con otros factores de riesgo del huésped y del ambiente, es capaz de dañar la salud. 5.2 Brote: ocurrencia de dos o más casos asociados epidemiológicamente entre sí. 5.3 Contacto: persona o animal que ha estado en relación directa o indirecta con persona o animal infectado, o con ambiente contaminado, y que ha tenido la oportunidad de contraer la infección. 5.4 Contagio: transmisión de una infección por contacto directo o indirecto. 5.5 Contaminación: presencia de un agente causal en cualquier vehículo. 5.6 Eliminación: ausencia de casos, aunque persista el agente causal. 5.7 Emergencia: evento de nueva aparición o reaparición. 5.8 Enfermedad: disfunción fisiológica, psicológica o social que presenta un individuo, que puede ser identificada y clasificada de acuerdo con signos, síntomas o estudios auxiliares de diagnóstico. 5.9 Enfermedad infecciosa: la enfermedad clínicamente manifestada en el hombre o animal, resultado de una infección. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 3 5.10 Enfermedad transmisible: aquella debida a un agente infeccioso específico o a sus productos tóxicos, que se manifiesta por la transmisión de ese agente o los productos de un reservorio a un huésped susceptible, ya sea directamente de una persona o animal, o en forma indirecta por conducto de una planta o animal huésped intermediario, de un vector o del ambiente inanimado, y que se puede transmitir a otra persona o animal. 5.11 Enfermo: persona que padece una enfermedad. 5.12 Epizootia: aumento en la frecuencia esperada de cualquier daño a la salud, en animales, durante un tiempo y un espacio determinados. 5.13 Epidemiología: ciencia que estudia la frecuencia de las enfermedades en las poblaciones humanas, así como los factores que definen su expansión y gravedad. Consiste en la medición de la frecuencia de la enfermedad y en el análisis de sus relaciones con las diversas características de los individuos o de su medio ambiente. 5.14 Epidemia: aumento en la frecuencia esperada de cualquier daño a la salud en el ser humano, durante un tiempo y un espacio determinado. En algunos padecimientos, la ocurrencia de un solo caso se considera epidemia. 5.15 Endemia: presencia constante o prevalecía habitual de casos de una enfermedad o agente infeccioso en poblaciones humanas, dentro de un área geográfica determinada. 5.16 Erradicación: desaparición en un tiempo determinado, tanto de casos de enfermedad como del agente causal. 5.17 Estudio epidemiológico: investigación del proceso salud-enfermedad del que se obtiene información epidemiológica de casos, brotes y situaciones de interés epidemiológico. 5.18 Fomites: objetos inanimados que, si se contaminan con un patógeno viable, pueden transferir el patógeno al hospedador. 5.19 Fuente de infección: persona, vector o vehículo que alberga al organismo o agente causal, y desde el cual puede ser adquirido, transmitido o difundido a la población. 5.20 Fuente de contagio: persona, animal o ambiente que transmite la enfermedad mediante un contacto mediato o inmediato. 5.21 Fuente de contaminación: persona, animal o sustancia inanimada responsable de la presencia de un agente, en o sobre un vehículo. 5.22 Guerra biológica: uso de agentes biológicos para incapacitar o eliminar humanos. 5.23 Halotipo: cepa tipo mencionada por un autor original 5.24 Huésped: persona o animal vivo que en circunstancias naturales permite la subsistencia o el alojamiento de un agente infeccioso. 5.25 Tasa de incidencia: cociente cuyo numerador es el número de casos nuevos ocurridos durante un periodo determinado, entre el número de personas de la población expuesta al riesgo (denominador). Por lo general, se expresa en términos del número de casos por 1 000 o 100 000 habitantes cada año. 5.26 Infección: alojamiento, desarrollo o multiplicación de un agente infeccioso en el organismo humano o animal, con resultados inaparentes o manifiestos. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 4 5.27 Lectotipo: así se le llama cuando un investigador posterior designa alguna de las cepas del autor original como cultivo tipo. 5.28 Tasa de letalidad: proporción expresada, por lo regular en forma de porcentaje, entre el número de muertes causadas por una enfermedad particular, respecto al número de casos de tal enfermedad en una población, tiempo y área determinados. 5.29 Monotipo: por sí sola es una cepa. 5.30 Tasa de morbilidad: tiene como numerador el número de enfermos en una población determinada durante un periodo y lugar específico, mientras que el denominador representa la población donde ocurrieron los casos. Se expresa como una tasa, puede ser general o específica. 5.31 Tasa de mortalidad: tiene como numerador el total de defunciones producidas en una población en un periodo determinado, y el denominador representa la población donde ocurrieron las muertes. Se expresa como una tasa, puede ser general o específica. 5.32 Neotipo: si un cultivo se pierde y otro investigador proporciona una cepa que se le parezca, entonces se denomina neotipo propuesto. 5.33 Pandemia: epidemia que abarca un amplio territorio, desde un país a un continente. 5.34 Periodo de incubación: intervalo entre la exposición, infección o infestación, y el inicio de signos y síntomas clínicos de la enfermedad. 5.35 Portador asintomático: persona infectada, infestada o que contiene al agente causal del padecimiento en cuestión, no presenta signos o síntomas de la enfermedad, pero constituye una fuente potencialde infección. 5.36 Prevalencia: coeficiente que mide el número de personas enfermas o que presentan cierto trastorno en determinado momento (prevalencia puntual), o durante un periodo predeterminado (prevalencia en un periodo), independientemente de la fecha en que comenzaron la enfermedad o el trastorno, y como denominador, el número de personas de la población en la cual tiene lugar. 5.37 Reservorio: hombre, animal, artrópodo, planta, suelo o materia orgánica inanimada donde normalmente vive y se multiplica un agente infeccioso, y del cual depende para su supervivencia, y donde se reproduce de manera que pueda ser transmitido a un huésped susceptible. 5.38 Salud pública: combinación de ciencias y técnicas dirigida al mantenimiento y mejoramiento de la salud de toda la población a través de acciones colectivas o sociales. 5.39 Taxonomía: Disciplina biológica que se ocupa de ordenar, describir y clasificar a todos los seres vivos; tiene como unidad de clasificación a la especie. 5.40 Vector: insecto o cualquier portador vivo, que transporta un agente infeccioso de un individuo infectado o sus desechos, a un individuo susceptible, sus alimentos o a su ambiente inmediato. El organismo puede, o no, desarrollar parte de su ciclo vital dentro del vector. 5.41 Vehículo de transmisión: objeto inanimado, o sustancia, capaz de albergar y transmitir el agente causal de enfermedad o daño. 5.42 Virión: partícula del virus completa; el ácido nucleico rodeado de una cubierta proteica. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 5 5.43 Virus: elemento genético que contiene RNA o DNA y se replica dentro de una célula. 5.44 Virus atemperado: aquel cuyo genoma es capaz de replicarse junto con el de su hospedador y no causa muerte celular en un estado denominado lisogenia. 6. Escribe la principal aportación realizada por los siguientes investigadores desde el punto de vista microbiológico: 6.1 Antón van Leeuwenhoek: Naturalista holandés. De formación autodidacta, construía sus propios microscopios con base en una sola lente de gran calidad; en aquella época, esas lentes eran simples, pero de distancia focal muy pequeña, eran preferibles a las lentes compuestas, que presentaban una considerable aberración cromática. La calidad de sus instrumentos, unida a sus grandes dotes para la observación, le posibilitó realizar descubrimientos de vital importancia, entre ellos la identificación y catalogación de los protozoos, bacterias, infusorios, glóbulos de la sangre, espermatozoides, etc. La evidencia presentada por Leeuwenhoek acerca de la existencia de los «animálculos» (protozoos y bacterias --como fueron bautizados en su tiempo--) y del ciclo reproductor de ciertos insectos, condujo al rechazo de las antiguas doctrinas sobre generación espontánea. En 1680 fue nombrado miembro de la Royal Society 6.2 Edward Jenner: En el siglo XVIII, la viruela era una enfermedad epidémica con un mayor índice de mortalidad. El único tratamiento conocido en esa época era de naturaleza preventiva, y consistía en inocular a un sujeto sano materia infectada procedente de un paciente aquejado de un ataque leve de viruela. Dicho principio se basaba en la evidencia empírica de que un sujeto que hubiera superado la enfermedad no la volvía a contraer. Sin embargo, la persona inoculada no siempre desarrollaba una versión leve de la enfermedad y fallecía a menudo; además, podía actuar como foco de infección para quienes lo rodeaban. Jenner se percató de que una variante de la enfermedad, la viruela de las vacas, ejercía el mismo efecto inmunitario con respecto a la viruela convencional en las personas que la contraían. En 1796 extrajo materia infectada de un individuo afectado por la viruela de las vacas y la inoculó a un niño sano de ocho años, que prontamente desarrolló una fiebre leve y pequeñas lesiones. Dos meses después inoculó de nuevo al niño, pero esta vez con el virus de la viruela convencional, sin que la enfermedad llegara a desarrollarse. 6.3 F. Appert: Químico francés que con base en las experiencias de Papin, inventó un procedimiento para conservar los alimentos al resguardo del oxígeno, mediante envases de vidrio o enlatados. En 1810 publicó la obra El arte de conservar durante varios años todas las sustancias animales y vegetales. 6.4 Louis Pasteur: Químico y bacteriólogo francés. Formado en el Liceo de Besançon y en la Escuela Normal Superior de París, en la que había ingresado en 1843, Louis Pasteur se doctoró en ciencias por esta última en 1847. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 6 Las numerosas contribuciones de Pasteur a la ciencia se iniciaron con el descubrimiento de la isomería óptica (1848) mediante la cristalización del ácido racémico, del cual obtuvo cristales de dos formas diferentes, en lo que se considera el trabajo que dio origen a la estereoquímica. Al estudiar los procesos de fermentación, tanto alcohólica como butírica y láctica, demostró que se deben a la presencia de microorganismos, cuya eliminación anula el fenómeno (pasteurización). Demostró el llamado efecto Pasteur, según el cual las levaduras se reproducen en ausencia de oxígeno. Postuló la existencia de los gérmenes y logró demostrarla, con lo cual rebatió de manera definitiva la antigua teoría de la generación espontánea. En 1865, Pasteur descubrió los mecanismos de transmisión de la pebrina, una enfermedad que afecta a los gusanos de seda y que amenazaba con hundir la industria francesa. Estudió a profundidad el problema y determinó que la afección estaba directamente relacionada con la presencia de unos corpúsculos –descritos ya por el italiano Cornaglia– que aparecían en la puesta efectuada por las hembras contaminadas. Como consecuencia de sus trabajos, enunció la llamada teoría germinal de las enfermedades, según la cual éstas se deben a la penetración en el cuerpo humano de microorganismos patógenos. Después de 1870, Louis Pasteur orientó su actividad al estudio de las enfermedades contagiosas, de las cuales supuso que se debían a gérmenes microbianos infecciosos que habrían logrado penetrar en el organismo enfermo. En 1881 inició sus estudios acerca del carbunco del ganado lanar, y consiguió preparar una vacuna de bacterias desactivadas, la primera de la historia. La continuación de sus investigaciones le permitió desarrollar la vacuna contra la rabia, o hidrofobia, cuyo virus combatió con una vacuna lograda mediante inoculaciones sucesivas en conejos, de las que obtenía extractos menos virulentos. La efectividad de esta vacuna, su última gran aportación en el campo de la ciencia, se probó con éxito el 6 de julio de 1885 con el niño Joseph Meister, después de haber sido mordido por un perro rabioso y, gracias a la vacuna, no llegó a desarrollar la hidrofobia. Este éxito espectacular tuvo gran resonancia, así como consecuencias de orden práctico para el científico, quien hasta entonces había trabajado con medios precarios. El apoyo popular hizo posible la construcción del Instituto Pasteur, que gozaría a partir de entonces de un justificado prestigio internacional. 6.5 Robert Koch: Bacteriólogo alemán, nacido en Clauthal (Hannover) y fallecido en Baden-Baden. Estudió en la Universidad de Gotinga y, después de trabajar en el Hospital General de Hamburgo y en el Manicomio de Lagenhogen, desempeñó como voluntario la misión de cirujano militar durante la Guerra Franco-Prusiana. Más tarde, en Bomst, se dedicó al ejercicio de la medicina y a los estudios bacteriológicos. Su primera contribución a la nueva ciencia bacteriológica consistió en el aislamiento del Bacillus anthracis (1877), productor del ántrax. Seis años más tarde propuso un método de vacunación contra esta nueva enfermedad, frecuentemente transmitida al hombre por el ganadolanar y vacuno. También formuló cuatro postulados sobre la etiología de las enfermedades bacterianas y demostró la existencia de bacterias causantes de la infección de las heridas. Fue nombrado miembro del Comité Imperial de Sanidad de Berlín (1880), donde ensayó varios métodos para la filtración del agua y la desinfección por medio de vapor. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 7 En 1882 anunció el aislamiento del bacilo de la tuberculosis (bacilo de Koch). En 1883 visitó la India y Egipto como director de la comisión alemana para el estudio del cólera asiático, y demostró que esta enfermedad tiene origen en el vibrión colérico. Fue también el primero en observar el bacilo. Recibió los nombramientos de profesor de higiene de la Universidad de Berlín, director de su Instituto de Higiene (1885) y, más tarde, del Instituto de Enfermedades Infecciosas de Berlín (1891-1904). En 1890 descubrió la tuberculina, de gran valor para el diagnóstico de la tuberculosis. En la última década del siglo XIX se dedicó al estudio de las enfermedades asiáticas (paludismo, lepra y peste bubónica). En la Unión Sudafricana (1896) ideó un método de vacunación contra la peste bovina. Su última comisión lo llevó a África donde estudió la enfermedad del sueño (1906). Por su trabajo sobre la tuberculosis recibió en 1905 el premio Nobel de Fisiología y Medicina. Aisló el bacilo del ántrax, Vibrio cholerae, Staphylococcus sp y tuberculosis, e hizo postulados en la etiología microbiana. 6.6 Paul Ehrlich: Fisiólogo alemán que inauguró la era de la quimioterapia, nacido en Strehlen (Silesia) y fallecido en Bad Homburg. Estudió en las universidades de Breslau, Estrasburgo, Friburgo y Leipzig. Doctorado en medicina en 1878, ingresó como ayudante en la clínica de la Universidad de Berlín, de la que en 1889 fue nombrado profesor auxiliar y al año siguiente, catedrático de medicina interna. En 1896 ocupó el cargo de director del Real Instituto Prusiano de Investigaciones y Ensayos de Sueros, donde desarrolló sus métodos de tinción de tejidos con anilina para estudiar las reacciones microquímicas a las toxinas. Fue el primero en investigar las vías del sistema nervioso, inyectando azul de metileno en las venas de conejos vivos. Obtuvo un extraordinario éxito experimental al tratar animales que sufrían la enfermedad del sueño con un derivado azoico. En 1904 curó un ratón infectado de tripanosomiasis, inyectándole en la corriente sanguínea el colorante actualmente conocido como rojo de trípano. También formuló la teoría de las cadenas laterales de la inmunidad, que explica cómo los receptores de la parte externa de las células se combinan con toxinas para producir cuerpos inmunes capaces de combatir la enfermedad. Es más conocido por su descubrimiento en 1901 del salvarsán y neosalvarsán (nombres comerciales de los específicos conocidos químicamente por arsfenamina y neoarsfenamina). El salvarsán representa el fruto de 606 experimentos para determinar el efecto de los compuestos arsenicales sobre las espiroquetas causantes de enfermedades como la sífilis y la fiebre recurrente. El neosalvarsán fue conocido durante mucho tiempo con el nombre de «Ehrlich 914» por tratarse del compuesto 914 preparado por Ehrlich y su ayudante japonés S. Hata para combatir estas enfermedades. El investigador llamaba a estos específicos sus «balas mágicas» con evidente razón, ya que eran los primeros compuestos sintetizados que se usaban en la curación de las enfermedades infecciosas causadas por protozoos y animales unicelulares similares. Sus numerosas aportaciones a la inmunología fueron recompensadas en 1908 con el premio Nobel de Medicina, compartido con Ilyá Mechnikov Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 8 6.7 Alexander Fleming: La carrera profesional de Fleming estuvo dedicada a la investigación de las defensas del cuerpo humano contra las infecciones bacterianas. Su nombre está asociado a dos descubrimientos importantes: la lisozima y la penicilina. El segundo es, con mucho, el más famoso e importante desde un punto de vista práctico: ambos están, con todo, relacionados entre sí, ya que el primero tuvo la virtud de centrar su atención en las sustancias antibacterianas que pudieran tener alguna aplicación terapéutica. Fleming descubrió la lisozima en 1922, cuando manifestó que la secreción nasal poseía la facultad de disolver ciertos tipos de bacterias. Probó después que dicha facultad dependía de una enzima activa, la lisozima, presente en muchos de los tejidos corporales, aunque de actividad restringida por lo que se refleja a los organismos patógenos causantes de las enfermedades. Pese a esta limitación, el hallazgo fue altamente interesante, ya que demostraba la posibilidad de que existieran sustancias que, si bien eran inofensivas para las células del organismo, resultaban letales para las bacterias. A raíz de las investigaciones emprendidas por Paul Ehrlich treinta años antes, la medicina andaba ya tras un resultado de este tipo, aunque los éxitos obtenidos habían sido limitados. El descubrimiento de la penicilina, una de las más importantes adquisiciones de la terapéutica moderna, tuvo su origen en una observación fortuita. En septiembre de 1928, durante un estudio sobre mutaciones de ciertas colonias de estafilococos, Fleming comprobó que uno de los cultivos había sido accidentalmente contaminado por un microorganismo procedente del aire exterior, un hongo identificado luego como el Penicillium notatum. Su meticulosidad le llevó a observar el comportamiento del cultivo, comprobando que alrededor de la zona inicial de contaminación los estafilococos se habían hecho transparentes, fenómeno que Fleming interpretó correctamente como efecto de una sustancia antibacteriana segregada por el hongo. Una vez aislado éste, Fleming supo sacar partido de los limitados recursos a su disposición para poner de manifiesto las propiedades de dicha sustancia. Así, comprobó que un caldo de cultivo puro del hongo adquiría, en pocos días, un considerable nivel de actividad antibacteriana. Realizó diversas experiencias para establecer el grado de susceptibilidad al caldo de una amplia gama de bacterias patógenas, observando que muchas de ellas eran rápidamente destruidas; inyectando el cultivo en conejos y ratones, demostró que era inocuo para los leucocitos, lo cual constituía un índice fiable de que debía resultar inofensivo para las células animales. Ocho meses después de sus primeras observaciones, Fleming publicó sus resultados en una memoria que hoy se considera un clásico en la materia, pero que en ese entonces no tuvo demasiada resonancia. Pese a que Fleming comprendió desde un principio la importancia del fenómeno de antibiosis que había descubierto (incluso muy diluida, la sustancia tenía un poder antibacteriano muy superior al de antisépticos tan potentes como el ácido fénico), la penicilina tardó todavía unos quince años en convertirse en el agente terapéutico de uso universal que llegaría a ser. Las razones para este aplazamiento son diversas, pero uno de los factores más importantes que lo determinaron fue la inestabilidad de la penicilina, que convertía su purificación en un proceso excesivamente difícil para las técnicas químicas disponibles. La solución del problema llegó con las investigaciones desarrolladas en Oxford por el equipo que dirigieron el patólogo australiano H. W. Florey y el químico alemán E. B. Chain --refugiado en Inglaterra--, quienes, en 1939, obtuvieron una importante subvención para el estudio sistemático de las sustancias antimicrobianas segregadas por los microorganismos. En 1941 se obtuvieron los primeros resultados satisfactorios con pacientes humanos. La situación de guerra determinó que se Guía de estudio para asignatura de MicrobiologíaGeneral 9 destinaran al desarrollo del producto recursos lo suficientemente importantes para que, ya en 1944, todos los heridos graves de la batalla de Normandía pudiesen ser tratados con penicilina. Con cierto retraso, la fama alcanzó por fin a Fleming, quien fue elegido miembro de la Royal Society en 1942, recibió el título de sir dos años más tarde y, por fin, en 1945, compartió con Florey y Chain el premio Nobel. Falleció en Londres el 11 de marzo de 1955. 6.8 Francis MacFarlane Burnet: Ha sido director del Instituto Hall para la Investigación Médica (1944) en Melbourne y presidente del Comité Nacional Asesor sobre Radiación (1957). Recibió en unión de P. B. Medawar el premio Nobel de Fisiología y Medicina (1960) por sus investigaciones sobre el trasplante de tejidos, que” abrieron un nuevo capítulo en la biología experimental”. Trabajó sobre patología: enfermedades infecciosas, virus, virología animal, antígenos enzimáticos, teoría de la selección clonar para la inmunidad adquirida, enfermedades de autoinmunización y otros temas. 6.9 Jonas Salk: "Muchos creían que el doctor era frío, distante, y que estaba alejado de los problemas de la gente. ¡Qué injusticia! Trabajaba para entender la enfermedad no para tratarla día a día. Las ambulancias no daban abasto, y nosotras -en broma- lo presionábamos: '¡Vamos, vamos, apúrese, haga algo!' Y vaya si lo hizo..." Así recordó una jefa de enfermeras del Hospital Municipal de Pittsburg (Pennsilvania) los negros días de 1955 en que la poliomielitis, parálisis infantil, mataba o dejaba inválidos a mansalva. Por fin, el 12 de abril del mismo año, fue presentada la vacuna, y Jonas Salk (Nueva York, 1914-California, 1995) se convirtió en héroe de la humanidad. 6.10 Sabin Albert: Nacido en Szaferzstein en 1906, polaco y ¡legado a los Estados Unidos en 1921! es -después de Jonas Salk- el segundo gran héroe que derrotó a la poliomielitis. En 1955 y usando, al contrario de Salk, virus vivos, logró la vacuna definitiva y de facilísima aplicación: unas gotas sobre un terrón de azúcar. 6.11 Christian Gram: (1853-1938) Médico danés conocido por el procedimiento que lleva su nombre, empleado en microbiología para diferenciar las bacterias mediante su tinción 6.12 Luc Montagnier: (Chabris, Francia, 1932) Virólogo francés. Estudió medicina en Poitiers y París y obtuvo el doctorado por La Sorbona en 1960. Desarrolló sus investigaciones en el Medical Research Council de Carshalton (Londres), en el Instituto de Virología de Glasgow y en el Instituto Curie, hasta que en 1972 entró en la unidad de virología del Instituto Pasteur de París. Dedicado al estudio de los retrovirus, dirigió el equipo de investigadores que aisló, en 1983, el virus causante del llamado síndrome de inmunodeficiencia adquirida (sida). La paternidad del descubrimiento le fue discutida por el investigador estadounidense Robert Gallo, quien había obtenido resultados parecidos con poco tiempo de diferencia. En 1993 los tribunales fallaron a favor de Montagnier. 6.13 J. Lister: Nacido el 5 de abril de 1827 en Upton, Essex, cursó estudios en las universidades de Londres y Edimburgo. Estudió la coagulación de la sangre y las inflamaciones producidas por lesiones quirúrgicas. En 1861 fue cirujano de una nueva sección de cirugía de la Sociedad Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 10 Médico-quirúrgica de Glasgow. Luchó por mantener limpio el instrumental quirúrgico y los quirófanos, aunque la tasa de mortalidad se mantenía en torno al 50%. En 1865 conoció la teoría de los gérmenes enunciada por el bacteriólogo francés Louis Pasteur, cuyos experimentos demostraban que la causa de la fermentación y la putrefacción se debía a los microorganismos que entraban en contacto con la materia orgánica. Durante dos años estudia y experimenta con el ácido fénico, y en 1867 publica en "The Lancet" su nueva técnica. En una reunión de la "British Medical Association" leyó una comunicación sobre el "Principio de la Antisepsia" que desencadena una violenta oposición entre sus colegas más conservadores. Siempre negó que hubiera una gran diferencia entre antisepsia y asepsia, y remarcó que lo importante era excluir los microbios del campo operatorio. Gracias a la aplicación de ácido carbólico en el instrumental y directamente en las heridas, consiguió reducir la mortalidad hasta 15% en 1869. Pronto quedó claro que esta práctica tenía un efecto drástico en la reducción de abscesos, sepsis, gangrena hospitalaria y mortalidad tras amputación. Sus descubrimientos en el campo de la antisepsia fueron rechazados en un principio, en la década de 1880 su aceptación era ya casi total. En 1897 fue nombrado barón por la reina Victoria I, quien había sido su paciente. Actualmente, su método antiséptico se emplea en las salas operatorias de todo el mundo. 6.14 Charles Louis Alphonse Laveran: Estudió en la Escuela Militar de Medicina de Estrasburgo y sirvió como cirujano del Ejército en la Guerra Franco-Prusiana. En 1880, mientras se hallaba en Argelia, descubrió el hematozoo (o parásito de la sangre) causante de la malaria y demostró que el vehículo de este microorganismo era un mosquito. Incorporado en 1883 al Hospital Val-de-Grâce como profesor de higiene militar y medicina clínica, pasó en 1894 a prestar servicios en el Instituto Pasteur, que dirigió más tarde. En 1907 fue galardonado con el premio Nobel de Medicina en reconocimiento de su trabajo relativo al papel desempeñado por los protozoos en el origen de las enfermedades 6.15 Emil Adolf von Behring: Bacteriólogo alemán, creador de la inmunología como ciencia; tras estudiar en Berlín y ejercer de cirujano militar durante 11 años, abandonó en 1889 el Ejército para ingresar como ayudante de Robert Koch en el Instituto de Higiene de la Universidad de Berlín. En 1891 se trasladó al Instituto de Enfermedades Infecciosas que dirigía el mismo Koch. En 1894 enseñó en la Universidad de Halle y a partir de 1895, en la de Marburgo. Con el bacteriólogo japonés Shibasaburo Kitasato descubrió la antitoxina del tétanos en 1890. Una semana después hizo públicos los resultados de su trabajo sobre la aplicación del suero contra la difteria, demostrando que el poder de resistencia a la enfermedad no reside en las células del cuerpo, sino en el suero sanguíneo libre de células, trabajo que le valió el primer premio Nobel otorgado en Medicina (1901). En el caso del tétanos y la difteria, Von Behring provocaba la inmunidad con el suero de un animal previamente infectado. Tras nuevos trabajos en Marburgo con otras antitoxinas, introdujo en 1913 un sistema de inoculación, todavía en vigor, capaz de inmunizar a los niños contra la difteria. 6.16 Martinus Willem Beijerinck: Botánico y fitopatólogo holandés. En 1880 se interesó por primera vez en la enfermedad común a varias solanáceas conocida como «mosaico del tabaco», interés que renovó cuando retornó a la vida académica en 1895 en la Escuela Politécnica de Delft. En 1898 declaró que el agente causal de esa enfermedad no era bacteriano y habla por primera vez del virus filtrable autor Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 11 de la misma. Identificó las bacterias simbióticas de las plantas leguminosas como indispensables para que las raíces fijaran el nitrógeno atmosférico. 6.17 G. Domagk: Patólogo alemán. Durante algún tiempo enseñó patología, pero más tarde pasó a los laboratorios de investigación de la Bayer, en Elberfeld. Sus experimentos con el colorante prontosil hicieron posible la síntesis de la sulfapiridina, sulfatiazol, sulfadiazina y otras sulfamidas. En 1939 fue galardonado con el premio Nobel de Fisiología y Medicina, que rechazó presionado por el gobierno nacionalsocialista alemán. En 1947 aceptó la medalla del Nobel. Entre sus obras destaca PathologischeAnatomie und Chemotherapie der Infektionskrankheiten (Anatomía patológica y quimioterapia de las enfermedades infecciosas). 6.18 Salvatore Edoardo Luria: Médico y profesor nacido en Turín Italia, cursó estudios y se graduó en su ciudad natal, trasladándose más tarde a los Estados Unidos. Colaboró en trabajos de investigación en la Universidad de Columbia (1940), luego dio cátedra de microbiología en el Instituto Tecnológico de Massachusetts. En 1969 le fue otorgado el premio Nobel de Medicina por el Instituto Carolino Médico-Quirúrgico de Estocolmo al mismo tiempo que a los doctores Max Delbrück y Alfred D. Hershey. La citación decía que los tres científicos habían sido honrados por ”sus descubrimientos relacionados con el mecanismo de réplica y con la estructura genética de los virus” y como premio a sus esfuerzos de investigación sobre un número diverso de bacteriófagos. 6.19 F. Enders: Bacteriólogo estadounidense (1897-1985) formado en las universidades de Yale y Harvard, enseñó en la última (1929-1942) y trabajó para el Ejército como asesor en enfermedades epidémicas (1942-1946). Fue galardonado con el premio Nobel de Medicina (1954), en unión de Robbins y Weller, por el cultivo del virus de la poliomielitis que preparó el camino para la vacuna de Salk. 6.20 Albert Bruce Sabin: Médico polaco nacionalizado estadounidense. Profesor de pediatría y biomedicina que estudió la poliomielitis, lo cual le llevó a descubrir en 1953 un mutante que, aunque no determina la parálisis, se multiplica y estimula la producción de anticuerpos activos contra el virus de la polio. Este mutante permite fabricar la vacuna de Sabin desde 1956. 6.21 M. E. Patarroyo: Científico colombiano que estudió medicina en la Universidad Nacional de Colombia, donde consiguió el título en 1971, y en la Rockefeller de Nueva York, donde se especializó en virología. Profesor luego de ambas universidades, en 1992 fundó en Bogotá el Instituto Colombiano de Inmunología, del cual es director. Sus estudios se enfocaron a combatir la malaria, diseñando una vacuna sintética que fue validada en Latinoamérica. Sin embargo, Patarroyo tuvo que luchar para que la comunidad internacional la reconociera, ya que quedaba por determinar su grado de eficacia en África y Asia, y algún consejero de la OMS estimó que se debía esperar para conocer mejor los resultados. Cedió los derechos de fabricación y comercialización a la OMS y en 1994 le fue concedido el premio Príncipe de Asturias de Investigación Científica y Técnica. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 12 6.22 Shibasaburo Kitasato: Médico japonés, que fue uno de los principales colaboradores de Behring. Descubrió el bacilo de la peste bubónica a la vez que Yersin, y obtuvo el primer cultivo puro del bacilo tetánico. Fundó el instituto bacteriológico que lleva su nombre y dirigió (1917-1925) el Instituto Kitasato de Enfermedades Infecciosas. 7. ¿Qué es una vacuna? Son preparados antígenos atenuados que confieren respuesta inmune, pero no provocan enfermedad; esta respuesta genera memoria inmunológica produciendo, en la mayoría de los casos, inmunidad permanente frente a la enfermedad; la vacuna fue inventada por Edward Jenner. Las vacunas se clasifican en dos grandes grupos: • vivas o atenuadas. • muertas o inactivadas. Existen varios métodos de obtención: 1. Vacunas avirulentas preparadas a partir de formas no peligrosas del microorganismo patógeno. 2. Vacunas dosificadas a partir de organismos muertos o inactivos. 3. Antígenos purificados. 4. Vacunas genéticas. 8. ¿Cuáles son las vacunas que se aplican a los humanos? VACUNAS DESCUBRIMIENTO DESCUBRIDOR PAÍS AÑO Publicación sobre la vacuna Vacuna contra la viruela Edward Jenner (1749-1823) Gran Bretaña 1796 Vacuna antirrábica Vacuna contra el ántrax de los vacunos Luis Pasteur (1822-1895) Francia 1885 Vacuna anticolérica Hapfkine Rusia 1892 Contra el tifus Wright Gran Bretaña 1898 Inmunidad antidiftérica/toxina- antitoxina Behring Alemania 1913 BCG (antituberculosa) Calmette y Guérin Francia 1921 Anatoxina diftérica Ramon y Glenny Francia 1923 Vacuna contra la tos convulsa o tos ferina Madsen Gran Bretaña 1923 Anatoxina tetánica Ramon y Zoeller Francia 1927 Primera vacuna antigripal Salk Estados Unidos 1937 Vacuna amaril 17D Theiler Sudáfrica 1937 Cultivos celulares Engers, Robbin y Weller Estados Unidos 1949 Vacuna antipoliomielítica inerte Salk Estados Unidos 1954 Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 13 Vacuna antipoliomielítica oral activa atenuada Sabin Estados Unidos 1957 Vacuna contra el sarampión Engers Estados Unidos 1960 Vacuna contra la rubéola Weller Estados Unidos 1962 Vacuna meningocóccica C Gotschlich Estados Unidos 1968 Vacuna meningocóccica A Gotschlich Estados Unidos 1971 Vacuna contra la hepatitis B Maupas Francia 1976 Vacuna neumocóccica Austrian Estados Unidos 1978 Vacuna contra la varicela Takahshi Japón 1983 ROR Vacuna triple antisarampión, contra la paperas y contra la rubéola Mérieux Francia 1986 Primera vacuna por Ingeniería genética contra la hepatitis B Laboratorios Chiron Estados Unidos 1986 Vacuna contra la meningitis en lactantes Eskola Finlandia 1987 9. Escribe el nombre de las vacunas que se aplican a los niños en México: BCG: tuberculosis con Mycobacterium bovis, Sabin: poliomielitis con poliovirus, pentavalente, DPT: difteria, tosferina y tétanos con Corynebacterium diptheriae, Bordetella pertusis y Clostridium tetani, Hepatitis tipo B: con virus de la hepatitis tipo B e infecciones graves por H. influenzae b, Triple viral SRP: para sarampión con paramixovirus, rubéola, y parotiditis, adicionales para antisarampión, y tétanos y difteria. 10. Escribe correctamente el nombre de los siguientes microorganismos: 10.1 E. Coli: Escherichia coli 10.2 Estafilococo dorado: Staphylococcus aureus 10.3 Organismo causante del cólera: Vibrio cholerae 10.4 Organismo productor de la sífilis: Treponema pallidum 10.5 Organismo productor de la tuberculosis: Mycobacterium tuberculosis 10.6 Organismo productor de la neumonía: Klebsiella pneumoniae 10.7 Agente causal de la tifoidea: Salmonella typhi 10.8 Agente causal del ántrax: Bacillus anthracis 10.9 Levadura que se usa en la producción de cerveza: Saccharomices cerevisiae 10.10 Hongo productor de aflatoxinas: Asperguillus flavus 11. ¿Qué es una especie? Para muchos, el criterio con que se define una especie es la posibilidad de fecundación, es decir, pertenecen a una especie todos los animales que son capaces de procrear entre sí. Aunque también se utiliza el criterio morfológico, por el cual se considera de la misma especie a todos los individuos relacionados entre sí por semejanzas genotípicas y fenotípicas. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 14 INSTRUCCIONES: Relaciona las siguientes columnas, anotando en el paréntesis la letra que le corresponda 12. a. Descubrió la penicilina. ( c ) Louis Pasteur 13. b. Aisló el Bacillus anthracis. ( f ) Petróleo y queso 14. c. Desarrolló la pasteurización. ( g ) Lazaro Spallanzani 15. d. Bacteria presente en la flora intestinal de los humanos. ( a ) Alexander Fleming 16. e. Es el nombre científico de la Amiba ( h )Anton van Leewenhoek 17. f. Productos obtenidos a través de microorganismos. ( e ) Entamoeba 18. g. Científico que demostró que la generación espontánea era falsa. ( d ) Escherichia coli 19. h. Inventó el primer microscopio. ( b ) Roberto Koch 20. Menciona algunos productosproducidos por microorganismos: Vacunas y productos alimenticios como el yogurt y el pan. 21. Menciona tres descubrimientos importantes (microbiológicos) que se utilicen de manera frecuente en la vida cotidiana: La levadura en la elaboración de pan, yogurt y la producción de vacunas 22. Escribe el nombre de algunas ciencias y menciona brevemente de qué manera apoyan a la microbiología: Fisicoquímica: por la cinética de las reacciones, es decir, por todos los cambios fisicoquímicos que ocurren en ésta. Biología: porque está relacionada con los seres vivos, en los cuales están involucrados los microorganismos. Química: por los estados de agregación que ocurren en la materia, como a la hora de realizar un cultivo. Ética: por el comportamiento que tiene la materia en los seres vivos, es decir, se inclina a los personajes que realizaron grandes aportaciones ya que tuvieron que aplicar sus valores para realizar sus experimentos. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 15 23. Menciona algunas diferencias entre una célula eucariótica y una procariótica: CÉLULA EUCARIOTA CÉLULA PROCARIOTA CÉLULA ANIMAL CÉLULA VEGETAL 1. Tamaño Entre 0,5 y 5 µm de diámetro. Entre 5 µm y hasta 75 mm. (como es el caso del óvulo de avestruz.) Entre 10 µm y 100 µm. 2. Envoltura nuclear No posee envoltura nuclear, el ADN se encuentra disperso en el citoplasma. Posee una envoltura nuclear definida que contiene el ADN. Los muchos poros de la membrana dejan entrar o salir cosas. Posee envoltura nuclear definida, al igual que la célula eucarionte animal. 3. Nucléolos No posee nucléolos. Posee nucléolo más denso, para la síntesis de subunidades de ribosomas. Algunas veces posee más de uno. 4. Cromosomas El ADN se organiza en un solo cromosoma. Posee más de un cromosoma; en células de animales superiores se presenta en pares y su número depende de la especie a la cual corresponda. Posee más de un cromosoma; en células vegetales se presenta en pares y su número es fijo para cada especie. 5. Pared celular Posee pared celular rígida, protege frente a daño osmótico. Está constituida por polisacáridos. Se encuentra dentro de la cápsula o vaina y fuera de la membrana plasmática. No posee pared celular. Tiene pared celular rígida compuesta de celulosa, lo cual determina la forma de los tejidos vegetales, como el hexagonal observado en las células de la cubierta de las cebollas. 6. Organelos -Ribosomas (partículas formadas por proteínas y ácidos nucleicos que sintetizan proteínas). -Aparato de Golgi -Vacuolas pequeñas -Ribosomas -Lisosomas -Retículo endoplasmático liso y rugoso -Mitocondrias -Centríolos -Aparato de Golgi -Vacuolas grandes -Ribosomas -Lisosomas -Retículo endoplasmático liso y rugoso -Mitocondrias -Cloroplastos 7. Membrana plasmática Tiene una membrana plasmática formada por una doble capa de lípidos y de proteína; tiene pliegues hacia el interior llamados mesosomas. Rodea a la célula manteniendo la individualidad. Hay muchos transportadores que permiten la entrada o salida de moléculas. Además, tiene la función de producir energía. Posee una membrana plasmática, permite entrada o salida de componentes mediante multitud de transportadores específicos. Asimismo, tiene muchos receptores de señales. No se relaciona con la producción de energía. Posee una membrana plasmática. Su forma se adapta a la rigidez de la pared celular. 24. Menciona si los microorganismos (bacterias, mohos y protozoarios) son eucarióticos o procarióticos: Las bacterias son procariontas y los mohos y protozoarios son eucariontes. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 16 25. Escribe el nombre científico (género y especie) de los siguientes microorganismos correctamente: 25.1 Agente etiológico de la disentería: Shigella dysenteriae. 25.2 Agente etiológico de la ascariasis: Ascaris lumbricoides. 25.3 Agente etiológico de la enteritis: Escherichia coli. 25.4 Agente etiológico de la cisticercosis: Taenia solium. 25.5 Agente etiológico de la tricocefalosis: Trichuris trichiura. 25.6 Agente etiológico de la uncinariasis: Necator americanus. 25.7 Agente etiológico de la oxiuriais: Enterobius vernicularis. 25.8 Agente etiológico de la oncocercosis: Onchocerca volvulus. 25.9 Agente etiológico del paludismo: Plasmodium vivax. 25.10 Agente etiológico de la giardiasis: Giardia lamblia. 25.11 Agente etiológico de la meningitis: Neisseria meningitidis. 25.12 Agente etiológico de la gangrena gaseosa: Clostridium perfringens. 25.13 Agente etiológico de la fiebre tifoidea: Salmonella typhi. 25.14 Agente etiológico del carbunco: Bacillus anthracis. 25.15 Agente etiológico de la tosferina: Bordetella pertussis. 25.16 Agente etiológico de la enteritis: Escherichia coli. 25.17 Agente etiológico productor de aflatoxinas: Aspergillus flavus. 25.18 Agente etiológico productor de la penicilina: Penicillium notatum. 26. Menciona el nombre de algunas colecciones microbianas: ATCC, American Type Culture Collection, Manassas EUA, Culture Collection, University of Goteborg; Colecciones Españolas de cultivos tipo, Universidad de Valencia; Center for Disease Control, Atlanta, EUA; Collection of Institut Pasteur, París, Francia; University of Western Cultura Collection, Ontario, Canadá; y Microbiological Culture Collection, Toronto, Canadá. 27. Escribe algunos sustratos de donde podemos aislar a los microorganismos: En productos alimenticios, suelo, agua, garganta, aguas residuales de vegetales, tejidos, etcétera. 28. Escribe brevemente qué características se tomaron en cuenta para nombrar a los microorganismos: Quimiotaxonomía: presencia o ausencia de componentes subcelulares. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 17 Morfología de la colonia: tamaño y forma (presencia de pigmentos). Micromorfología: tamaño celular, motilidad, pruebas de dimorfismo o poliformismo, presencia de esporas. Serología: presencia o ausencia de reacciones de aglutinación a antisueros específicos. Bioquímica: metabolismo, presencia de catalasas, oxidasas u otras enzimas; capacidad para degradar moléculas complejas. Pruebas de inhibición: presencia o ausencia de crecimiento. Genética molecular: presencia de relaciones guanina- citosina. Características de crecimiento: aerobiosis o anaerobiosis, requerimiento especial para el crecimiento. 29. ¿Qué reglas taxonómicas se utilizaron para nombrar a los microorganismos? La nomenclatura propuesta fue de fácil pronunciación y bastante distinta para evitar confusión; algunas bacterias pueden tener nombres comunes como el ántrax, que es el Bacillus anthracis. Se usa el sistema binomial propuesto por Carlos Linneo, y se conforma de la siguiente manera: a. El idioma utilizado es el latín por ser una lengua muerta. b. Se forma de dos palabras. c. La primera letra es mayúscula y conforma el género, la segunda palabra es el género; se escriben en minúscula, por ejemplo, Escherichia coli. d. Por convención, el nombre de la especie debe ir en itálicas, subrayada o en negritas. e. El nombre se feminiza. f. El nombre se debe relacionar con el hábitat, o bien con el del científico que lo descubrió con el aislamiento. g. Podemos abreviar siempre que no existan confusiones, por ejemplo: Pseudomonas aeruginosa: P. aeruginosa 30. Da el nombre de los reinos que se estudiarán en este curso de microbiología: Eucarionte (algas, mohos y protozoarios), Procarionte (arqueobacteriasy eubacterias) y Acelular (virus). 31. Menciona brevemente el contenido de la NOM-087-ECOL: Esta norma indica los requisitos para la separación, envasado, almacenamiento, recolección, transporte, tratamiento y disposición final de los residuos peligrosos biológico-infecciosos que se generan en establecimientos que presten atención médica. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 18 INSTRUCCIONES: resalta la respuesta correcta. 32. Principal aportación microbiológica realizada por Anton van Leeuwenhoek: a. Pulido de las lentes b. Inventó el microscopio c. Creó telas finísimas d. Clasificó lentes 33. Investigador que demostró que la generación espontánea es falsa: a. Louis Pasteur b. Alexander Fleming c. Robert Koch d. Paul Ehrlich 34. Principal aportación de Louis Pasteur a la microbiología: a. Vacuna contra la rabia b. Descubrió la penicilina c. Descubrió el salvarsán d. Diseñó cultivos 35. Investigador que aisló el Bacillus anthracis: a. Robert Koch b. Louis Pasteur c. Alexander Fleming d. Francisco Redi 36. Forma correcta de escribir E. Coli: a. Escherichia coli b. Escherichia Coli c. ESCHERICHIA COLI d. E. Coli 37. Al organismo causante del cólera, científicamente se le llama: a. Vibrio choleare b. Vibrio parahaemolitycus c. Vibrio vulnificus d. Vibrioalginolyticus 38. Levadura que se usa en la producción de cerveza: a. Saccharomyces cerevisiae b. Candida utilis c. Hansenula sp d. Candida albicans 39. Organismo que pertenece al reino Protista: a. Entamoeba coli b. Vibrio parahaemolitycus c. Penicillium notatum d. Bacillus subtilis 40. Hongo productor de aflatoxinas: a. Aspergillus flavus b. Penicillum notatum c. Mucor sp d. Rhizopus sp 41. Bacillus subtilis es un ejemplo del reino: a. Monera b. Protista c. Fungi d. Eucariotes Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 19 42. Organismo productor de la neumonía: a. Kebsiella pneumoniae b. Brucilla abortus. c. Pseudomonas aeruginosa d. Salmonella cholerae 43. Las bacterias son organismos: a. Eucariotes b. Procariotes c. Pluricelulares. d. Multinucleadas 44. Las levaduras son organismos: a.- Eucariotes b. Procariotes c. Pluricelulares d. Ramificados 45. Los mohos son organismos: a. Levaduriformes b. Procariotes c. Unicelulares d. Eucariotes 46. Los virus son considerados: a. Eucariotes b. Procariotes c. Partículas d. Unicelulares 47. Para escribir el nombre de los microorganismos se utiliza el idioma: a. Inglés b. Latín c. Alemán d. Español 48. La primera letra del género debe escribirse en: a. Mayúscula b. Minúscula c. De manera indistinta d. Depende si es en el inicio del texto 49. Saccharomyces sp pertenece al reino: a. Monera b. Eucariote c. Procariote d. Fungi 50. Principal aportación de Robert Koch a la microbiología: a. Descubrió el bacilo de la tuberculosis b. Desarrolló la quimioterapia c. Clasificó las lentes en convergentes y divergentes d. Descubrió la penicilina 51. Principal aportación de Alexander Fleming a la microbiología: a. Descubrió la penicilina b. Descubrió la lisozima c. Cristalizo el ácido tartárico d. Diseñó medios de cultivo Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 20 52. Principal aportación de Paul Ehrlich a la Microbiología: a. Descubrió el salvarsán. b. Desarrolló la primera vacuna. c. Sintetizó la penicilina d. Identificó el agente etiológico de la tuberculosis 53. El estafilococo dorado científicamente se trata de: a. Staphylococcus aureus b. Staphylococcus epidermidis c. Staphylococcus haemolyticus. d. Staphylococcus saprophyticus 54. Hongo productor de penicilina con el mayor rendimiento, científicamente se le llama: a. Penicillium crysogenes b. Penicillium notatum c.Penicillium citrinum d. Penicillium islandicum 55. Amiba responsable de la amibiais: a. Enterobios vernicularis b. Ascaris lumbricoides c. Entamoeba coli d. Taenia solium 56. Organismo productor de la sífilis: a. Escherichia coli b. Treponema pallidum c. Staphylococcus aureus d. Streptococcus viridans 57. Microorganismo habitante natural de la flora intestinal humana: a. Escherichia coli b. Treponema pallidum c. Staphylococcus aureus d. Ascaris lumbricoides 58. Son algunos productos obtenidos a través de microorganismos: a. Agar de papa y dextrosa b. Caldo nutritivo c. Vino y pulque d. Extracto de malta 59. Organismo productor de la tuberculosis: a. Mycobacterium tuberculosis b. Mycobacteriu m lepre c. Mycobacterium avium d. Mycobacterium marinu. 60. Organismo que pertenece al reino Monera: a. Entamoeba coli b. Vibrio parahaemol- itycus c. Penicillum notatum d. Candida albicans Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 21 61. Organismo que pertenece al reino Fungi: a. Entamoeba coli b. Vibrio parahaemoli- tycus c. Penicillum notatum d. Corynebacterium diphthrriae 62. Es la principal diferencia entre una célula eucariota y una procariota: a. La presencia de un núcleo b. El hábitat en que se desarrollan c. Su metabolismo d. su organización celular INSTRUCCIONES: Relaciona las siguientes oraciones colocando el número del investigador que corresponda: 63. (3) Tinción que lleva su nombre y diferencia en dos grupos a los procariotes. 64. (4) Investigador que demostró que el vehículo del microorganismo de la malaria era un mosquito. 65. (6) Conjuntamente con otros investigadores, desarrolló estudios relacionados con el mecanismo de réplica y con la estructura genética de los virus. 66. (5) Con el bacteriólogo japonés Shibasaburo Kitasato descubrió la antitoxina del tétanos en la cual se aplicaba el suero contra la difteria; demostró que el poder de resistencia a la enfermedad no reside en las células del cuerpo, sino en el suero sanguíneo libre de células. 67. (7) Al estudiar la poliomielitis, descubrió en 1953 un mutante que, si bien no determina la parálisis, se multiplica y estimula la producción de anticuerpos activos contra el virus de la polio. 68. (9) Dedicado al estudio de los retrovirus, dirigió el equipo de investigadores que aisló, en 1983, el virus causante del llamado síndrome de inmunodeficiencia adquirida (sida). 69. (15) Microbiólogo que aisló por primera vez las bacterias quimioautótrofas. 70. (10) Microbiólogo que al trabajar con la enfermedad del mosaico del tabaco, demostró que el agente causal es filtrable. 71. (1). Investigador que descubrio la pasteurización . 72. (8) Sus experimentos con el colorante prontosil hicieron posible la síntesis de la sulfapiridina, sulfatiazol, sulfadiazina y otras sulfamidas. 73. (14) Investigador que contribuyó a la cirugía, pero sobre 1.-Louis Pasteur 2.-E. Jenner 3.-Christian Gram 4.-Charles L.A. Laveran 5.-Emil A. Behring 6.-Salvatore E, Luria 7.-Albert Bruce Sabin 8.-Paul Ehrlich 9.-Luc Montagnier 10.-Martinus Williem Beijerink 11.-Alexander Fleming 12.-Antón Van Leewenhock 13.-Robert Koch 14.-J.Lister 15.-SergeiWinogradsky Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 22 todo a la desinfección de heridas utilizando el ácido fénico. 74. (13) Investigador que desarrolló los cultivos puros, además de deducir algunos postulados que demostraban que cierto tipo de microorganismo puede causar una enfermedad específica. 75. (12) Iniciador de la microbiología al observar organismos pequeños con el primer microscopio. 76. (11) Descubridor de la lisozima y de la penicilina. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 23 UNIDAD II TÉCNICAS DE APLICACIÓN EN MICROBIOLOGÍA 77. Menciona cuál es el fundamento de la tinción de Gram: La pared celular es responsable de la tinción de Gram. El procedimiento se inicia con una tinción de las células bacterianas fijadas mediante el colorante básico cristal violeta. Posteriormente se trata con una disolución de yodo, que a su vez forma un complejo con el cristal violeta insoluble en agua y sólo medianamente soluble en alcohol o acetona. Las células se tratan después con alcohol para diferenciarlas: las células Gram positivas retienen el complejo colorante-yodo, por lo que las vemos de color morado-azules; y las células Gram negativas son decoloradas por el alcohol, por lo que se hacen visibles mediante la coloración de contraste, en este caso la fucsina. 78. Menciona brevemente los pasos a seguir para la realización de la tinción de Gram: a) Colocar el frotis correspondiente en el puente de coloración. b) Cubrir los frotis con cristal violeta (colorante primario) durante un minuto. c) Lavar los frotis con agua de la llave para eliminar el exceso de colorante. d) Cubrir los frotis con lugol (mordente) durante un minuto. e) Lavar los frotis con agua de la llave. f) Aplicar gota a gota el alcohol-acetona (decolorante). g) Lavar inmediatamente con agua de la llave. h) Cubrir los frotis con safranina (colorante secundario) durante 30 segundos. i) Lavar los frotis con agua de la llave. j) Dejar secar los frotis, colocar una gota de aceite de inmersión y observarlos al microscopio con el objetivo 100 X. (Previamente realizar la técnica de iluminación de Köhler y enfocar a 10 y 40 X.) Menciona el fundamento de la tinción de Ziehl Neelsen: La tinción de los microorganismos requiere una pared celular en buen estado. El interior de la célula --rico en lípidos-- conserva el colorante, pero la pared no. La función de ésta, y el fenómeno de resistencia a los ácidos, se debe a la insensibilidad de la pared frente a la acción del aclarador, en este caso el ácido. A fin de que el colorante primario, la carbolfucsina, penetre a través de las cápsulas cerosas de los bacilos acidorresistentes, se requiere cierto tipo de tratamiento físico como el calor. Como el calor favorece la fusión de las ceras, el colorante puede penetrar; al dejar enfriar, nuevamente las ceras solidifican, de modo que el colorante ya no puede salir. Como el tratamiento es muy enérgico, cualquier bacteria que no tenga un alto contenido de lípidos como Mycobacterium y Nocardia perderá el colorante primario durante la decoloración, por lo que se teñirá con el colorante de contraste, esto es, azul de metileno. Si resisten la decoloración por alcohol ácido, las bacterias se denominan de ácido alcohol resistente (BAAR), y las vemos al microscopio de color rojo, mientras que las BAAR negativas las vemos de color azul. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 24 79. ¿Cómo se realiza un frotis para una preparación? Método A a) En la gradilla se tiene un tubo de ensayo de 13 ± 100 mm con 2 ml de agua, tomar de ahí con el asa una pequeña gota de agua y colocarla en el centro de la superficie de un portaobjetos. (Para este paso no se necesita agua estéril ni esterilizar el asa.) b) Encender el mechero, flamear el asa al rojo vivo y en un radio de 20 cm de la flama del mechero, abrir el tubo de ensayo y flamearlo, tomar la muestra con el asa, volver a flamear el tubo y taparlo. Dejar el tubo sobre la gradilla y ahora con la mano izquierda tomar el portaobjetos y con la mano derecha en la que tenemos el asa extender el inóculo aproximadamente 1 cm2 para obtener una película delgada de microorganismos. c) Dejar secar el frotis a temperatura ambiente. d) Fijar el frotis con calor, es decir, pasarlo rápidamente por la flama del mechero, y colocarlo en el dorso de la mano; si soportamos el calor, pasarlo de nuevo. Realizar esta operación una vez más. El calor deseable del portaobjetos apenas debe ser demasiado caliente para colocarlo en el dorso de la mano. e) Dejar enfriar el portaobjetos antes de teñir. Nota: Procurar no tomar una gran cantidad del inóculo, de lo contrario quedará un frotis grueso, la luz no pasará y no observaremos; en caso de ya haber ocurrido esto, observa en la periferia del frotis Método B a) Si se proporciona un tubo con una suspensión bacteriana, encender el mechero. b) En un radio de 20 cm abrir el tubo, flamearlo y con el asa tomar un inóculo de la suspensión. c) Flamear la boca del tubo de ensayo, cerrarlo y colocarlo en la gradilla. d) Colocar el inóculo en el centro de un portaobjetos limpio. Extender el inóculo por lo menos 1 cm2. 80. Menciona brevemente cuáles son los pasos a seguir para la tinción de Ziehl Neelsen: a) Colocar el frotis correspondiente en el puente de coloración. b) Cubrir los frotis con fucsina-fenicada y calentar con una lámpara de alcohol hasta que emita vapores; aplicar calor periódicamente durante 5 minutos sin que se seque la preparación y esperar a que se enfríe. c) Enjuagar con agua de la llave. d) Cubrir los frotis con alcohol ácido por un minuto. e) Enjuagar con agua de la llave. f) Cubrir los frotis con azul de metileno por un minuto. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 25 g) Enjuagar y dejar secar los frotis y observarlos con el microscopio utilizando lente de inmersión. 81. ¿Cuál es el fundamento de la tinción de esporas? Sólo un pequeño grupo de bacterias son formadoras de endosporas y éstas tienen una gran resistencia al calor; las endosporas termorresistentes soportan grandes calentamientos. La termorresistencia de las esporas ofrece, por otra parte, la posibilidad singular del enriquecimiento selectivo de esporulados: se calienta la tierra o material de otro hábitat 10 minutos a 80°C, con lo que mueren todas las células vegetativas. La espora contiene casi toda la materia seca de la célula materna, pero ocupa sólo un décimo de su volumen. Como contiene una gran cantidad de ácido dipicolínico debe calentarse para permitir que el colorante penetre a la espora. En una tinción de Shaefer y Fulton las esporas toman la coloración del verde de malaquita y las células vegetativas, el color rosa de la safranina. 82. Escribe los pasos a seguir para la tinción de Shaefer y Fulton: a) Cubrir el frotis correspondiente con verde de malaquita y calentar con una lámpara de alcohol hasta que emita vapores; aplicar calor periódicamente durante cinco minutos, sin que se seque la preparación. b) Dejar que el frotis se enfríe. c) Lavar con agua de la llave. d) Cubrir el frotis con safranina por un minuto. e) Enjuagar, dejar secar y observar con el microscopio mediante lente de inmersión. 83. ¿Cual es la finalidad de realizar un microcultivo? Obtener estructuras de reproducción de los mohos y compararlos con las claves dicotómicas y de esta manera identificarlos. 84. ¿Para qué sirve el colorante azul de algodón lactofenol? Para realizar una preparación en fresco de mohos y así poder observarla al microscopio. 85. ¿Qué utilidad tiene observar en el microscopio una preparación fija y una en fresco? Una preparación fijacomo la tinción de Gram nos permite observarla por más tiempo sin que sufra modificaciones, mientras que una preparación en fresco sólo es para ser observada al momento. 86. Define qué es la esterilización y las condiciones que se requieren para una por calor húmedo y por calor seco La esterilización es un proceso físico que consiste en la eliminación de toda forma de vida, incluyendo virus y esporas. Las condiciones de esterilización son las siguientes: Calor seco (horno): 2 h a 170 a 175°C o 1 h a 180°C Calor húmedo (autoclave): 15 minutos a 121 ± 1°C. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 26 87. ¿Para qué nos sirve el aceite de inmersión? Para evitar la refracción de la luz, ya que el aceite tiene el mismo indice de refracción nsidad que el vidrio del portaobjetos. 88. ¿Por qué utilizamos filtro azul en el microscopio de campo brillante? Para intensificar más los colores rosas de los colorantes. 89. ¿Por qué utilizamos filtro verde en el microscopio de contraste de fases? Para contrastar el campo. 90. Anota por lo menos tres ejemplos de materiales que se esterilizan por calor húmedo: Medios de cultivo, pipetas individuales y cajas de Petri. 91. Anota por lo menos tres ejemplos de materiales que se esterilizan por calor seco: Pipetas en cilindros, cajas en cilindros y material de cristalería. 92. Anota por lo menos tres ejemplos de materiales que se esterilizan por filtración a través de membrana: Vitaminas, antibióticos y ácidos orgánicos débiles. 93. Anota por lo menos tres ejemplos de materiales que se esterilizan por luz ultravioleta química: Quirófano, habitaciones grandes y microorganismos en cajas de Petri. 94. ¿Todos los medios se esterilizan? Explica tu respuesta. No; no todos los medios se esterilizan, ya que por su alta alcalinidad o acidez, e incluso por su contenido de inhibidores, algunos no permiten el crecimiento de bacterias o microorganismos. Además, los inhibidores en un medio de temperatura alta se desnaturalizan y esto provoca crecimiento bacteriano. 95. ¿Cómo se produce el gas H2 y el CO2 en la jarra de anaerobiosis? Adicionando un sobre de calidad con bicarbonato de sodio, ácido cítrico y borohidruro de sodio. 96. ¿Cuáles son los microorganismos indicadores en los siguientes medios? Jarra de anaerobiosis: Micrococcus luteus, ATCC 9341, Neisseria gonorrhoeae Esterilización por calor húmedo: Bacillus stearothermophilus, Bacillus subtilis Esterilización por calor seco: Bacillus subtilis var níger, Geobacillus stearothermophilus, Aspergillus niger Esterilización por filtración a través de membranas: Pseudomonas diminuta 97. Anota el nombre de dos materiales con los que se forma un filtro: Ésteres de celulosa, PVC y Carbonato de calcio. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 27 98. ¿Para qué sirve el glicerol en un microcultivo? Mantiene una atmósfera húmeda necesaria para el crecimiento de los mohos. 99. ¿Para qué sirve el formol al 40% en el microcultivo? Inactiva al hongo sin alterar su estructura, de tal forma que la podamos observar en el microscopio. 100. Indica el nombre de dos medios de cultivo que no se esterilicen: (TCBS). Agar tiosulfato citrato sales biliares sacarosa (SS).Agar Salmonella y Shigella 101. ¿Cuál es la función de los colorantes en microbiología? Como algunos microorganismos son transparentes o incoloros, en Microbiología usamos diversos colorantes esto con el fin de teñir teñirlos al microorganismo para poder verlos con mayor claridad en el microscopio, es decir, el objetivo principal es colorear la membrana de los microorganismos. 102. ¿Cuál es la qué cantidad y la concentración del ácido tartarico que tartárico se utiliza para acidificar el PDA? La concentración de la solución estéril de ácido tartárico es de 10%, y según la NOM 111-SSA se adiciona 1,4 ml por cada 100 ml de medio de cultivo para tener un pH de 3,5. 103. ¿Con qué agua debo enjuagar el material para uso en microbiología? Agua destilada, y en cultivos celulares agua desionizada. 104. ¿Qué función desempeña el tapón de algodón en la boquilla de la pipeta? Es un medio de seguridad, ya que al manipular volúmenes de microorganismos a veces es necesario pipetear con la boca, y el algodón impide el paso de la carga microbiana a ésta. 105. ¿Por qué es necesario colocar un gorro de papel Kraf a los matraces? Impide el humedecimiento del tapón de algodón-gasa cuando se lleva a cabo esterilización por calor húmedo; también impide el intercambio de gases. 106. Anota dos métodos de conservación de esporas: Tierra y arena. 107. Describe brevemente qué es la liofilización: Consiste en pasar el agua del producto sólido a gas por medio de la sublimación. Consta de tres pasos: (1) Congelación, (2) Secado o desecación primaria y (3) Secado secundario. Se usa en la conservación de microorganismos. 108. ¿Cuál es el área en la que puedo trabajar sin riesgo de contaminar mi medio en un mechero? Debemos trabajar alrededor del mechero a una distancia no mayor de 20 cm de éste. 109. ¿Para qué sirve una campana de flujo laminar? Es una campana que se utiliza para sembrar microorganismos. Emplea un ventilador para forzar el paso del aire a través de un filtro barriendo la superficie de trabajo. El flujo del Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 28 aire, que puede ser vertical u horizontal, protege únicamente el material que se maneja en su interior, pero nunca al operador; algunas campanas poseen lámpara de luz ultravioleta. 110. ¿Por qué la temperatura de esterilización por calor húmedo es mas baja que la de calor seco? Se debe a la presión que se ejerce dentro del autoclave; además, en el horno sólo se tiene la presión atmosférica, y el aire es mal conductor del calor. 111. ¿Qué espesor de los cubreobjetos se recomienda utilizar en un microscopio de enseñanza? De 0,17 hasta 0,22 mm de espesor. 112. ¿Qué tipo de aberraciones se presentan en las lentes de un microscopio compuesto? Aberración cromática: se debe a que el índice de refracción de cada sustancia depende de la longitud de onda. Aberración esférica: como los rayos parten de un único punto situado sobre el eje de la lente, no enfocan el mismo punto del eje. 113. ¿Qué indica el color negro del anillo en el objetivo de un microscopio? Facilita el reconocimiento del coeficiente de aumento: en el caso del color negro es el objetivo de inmersión con un aumento de 100 X. 114. ¿Para qué sirve el aceite de inmersión en el microscopio? Para disminuir el índice de refracción de la luz, debido al cambio de un medio a otro de diferente densidad. 115. ¿Qué es un microscopio? Es un instrumento óptico usado para observar, determinar y cuantificar seres o estructuras microscópicas. 116. ¿Como se llaman los microscopios utilizados en un laboratorio de enseñanza? Microscopio de campo brillante y microscopio de contraste de fases. 117. Menciona los sistemas que conforman al microscopio. Iluminación, óptico y mecánico. 118. ¿Qué partes integran al sistema de iluminación? Lámpara, diafragma de campo, condensador (lente frontal, diafragma de iris y lente auxiliar). 119. ¿Cuáles son las partes del sistema óptico? Objetivo, tubo y ocular. 120. ¿Cuáles son las partes del sistema mecánico? Base, estativo, tornillos, platina, revolver, pinzas, etcétera. Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 29 121. ¿Cuál es la función del diafragma de campo y dónde lo localizamos? Regula el diámetro de la emisión de la luz de modo que se ilumine sólo el área de campo visual y se localiza en la base del microscopio. 122. ¿Cuál es el nombre del otro sistema queregula la emisión de la luz para contrastar la imagen? Diafragma de iris. 123. ¿Para qué sirve el condensador? Para efectuar una iluminación correcta del objeto. 124. ¿Para qué sirve el diafragma de campo? Para regular el diámetro de la emisión de luz, de modo que se ilumine sólo el área de campo visual. 125. ¿Qué nos indica el anillo superior en el microscopio, y qué colores se presentan con mayor frecuencia? El aumento del objetivo. 126. ¿Qué nos indica el anillo inferior en el microscopio, y cuáles son los colores de mayor frecuencia? Si va inmerso en alguna sustancia. Correspondencia entre los aumentos y los anillos de colores grabados. Aumentos Color de anillo superior 1,0 X Negro 2,5 X Pardo 4,0 X Rojo 6,3 X Anaranjado 10 X Amarillo 16 X Verde claro 25 X Verde oscuro 40 X Azul claro 63 X Azul oscuro 100X Blanco Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 30 127. ¿Qué otras sustancias podemos utilizar para evitar la refracción de la luz? Agua, glicerina y aceite. 128. ¿Qué características debe tener el aceite de inmersión para utilizarlo en microscopia? Tener un índice de refracción semejante al vidrio. 129. Si observo una preparación a 10 X, ¿cuál es el aumento real? (10 X) (1,25) (10 X) = 125 aumentos. 130. ¿En qué lugar del microscopio veo el aumento del ocular y qué valor que le corresponde a este microscopio? En el ocular, y generalmente corresponde a 10 X. 131. ¿Para qué me sirve la escala del ocular? Para ver las dioptrías. 132. ¿Como obtengo la distancia interpupilar? Separando los binoculares hasta ver con los dos ojos los campos visuales del microscopio. 133. ¿Cuándo debo utilizar el microscopio de campo brillante? En frotis teñido principalmente y en preparaciones en fresco. 134. ¿Cómo debo limpiar el microscopio? La parte mecánica con una franela húmeda y la parte óptica con papel seda; cuando los objetivos tienen grasa, humedecer un algodón con una mezcla 1:1 de agua–alcohol. 135. ¿Cuál es la resolución de un microscopio óptico y el de un electrónico? El límite de resolución del microscopio óptico es de 200 nm y el de un electrónico es de 0,5 nm. 135 ¿Cuál es la forma correcta de guardar el microscopio? Platina hasta abajo; el cable debe estar enrollado procurando que no sea aplastado al bajar la platina, y cubrirlo con una funda que no guarde polvo para evitar que se acumule en las lentes. 136. ¿En qué casos debo usar el microscopio de contraste de fases? Colores para el anillo inferior que indican en qué medio se debe hacer la inmersión del objetivo. Carácter Sustanc ia Índice de refracción Color del anillo Oil Aceite 1,515 Negro W Agua 1,333 Blanco Glyz Glicerin a 1,455 Anaranjado Metileno Yoduro de metileno 1,740 Amarillo Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 31 Cuando necesito observar microorganismos vivos o que no se pueden teñir. 137. Describe brevemente el funcionamiento del microscopio de contraste de fases: El principio físico se basa en que la luz transmitida por esta placa tiene dos componentes que al interferir entre sí permiten que se logre una imagen contrastada. La teoría de Abbe indica un desfasamiento y sumación o anulación de ondas en la marcha de los rayos luminosos. Lograr este efecto requiere colocar un filtro verde en el condensador para seleccionar una sola longitud de onda; tiene un sistema óptico que descompone la luz en dos partes: una de ellas llega a una velocidad normal al ocular y la otra se retrasa un 1/4 de longitud de onda respecto a la primera. Para lograr este retardo se requiere un objetivo especial que tiene grabado en el tubo las letras pH. El efecto de contraste se obtiene al centrar el anillo luminoso del condensador con el anillo de fase del objetivo. Esto se logra mediante unos tornillos laterales colocados en el portacondensador y con la ayuda de un ocular especial que se sustituye por un momento en el microscopio, que sirve únicamente para observar y centrar los anillos ya que es imposible verlos con un ocular convencional. Una vez centrados los anillos, se vuelve a cambiar la lente por el ocular normal para realizar las observaciones. Este microscopio es útil para observar muestras de células vivas sin necesidad de fijar o teñir. 138. ¿Cómo se realiza la iluminación de Köhler? a. Luz amarilla (bajo voltaje). b. Ajustar la distancia interpupilar. c. Ajustar las dioptrías. d. Abrir el diafragma de campo e iris. e. Subir completamente el condensador con la lente frontal introducida. f. Enfocar la preparación con el objetivo 4 X o 10 X y con los tornillos macro y micrométrico. g. Observar y cerrar el diafragma dispuesto en el pie del microscopio. h.- Bajar el condensador hasta obtener máxima nitidez de la imagen del diafragma. i. Centrar el diafragma de campo luminoso en el campo visual con los dos tornillos del condensador. j. Abrir el diafragma de campo luminoso casi hasta el borde del campo visual, centrando con exactitud, y abrirlo hasta que desaparezcas detrás del borde del campo visual. k. Regular el contraste de la imagen con ayuda del diafragma del condensador. l. Insertar el filtro azul y regular la intensidad de la luz con el control del voltaje. m. A cada cambio de objetivo: enfocar con el micrométrico y contrastar con el diafragma del condensador. n. Al utilizar objetivos panorámicos de bajo aumento rebatir la lente frontal del condensador sin alterar su altura. 139. En el microscopio de contraste de fases ¿Se realiza la iluminación de Köhler? ¿Cómo se hace? Sí, y es igual que en el microscopio compuesto. 140. Anota tres métodos para conservar cultivos microbianos: Guía de estudio para asignatura de Microbiología General 32 Conservación con aceite mineral, en refrigeración, congelación, liofilización y en arena o tierra estéril. 141. ¿Qué es el poder de resolución en un microscopio? Es la capacidad de resolver dos líneas separadas la menor distancia entre sí. 142. ¿Cuál es la función de los colorantes en Microbiología? Sirven para teñir las células y aumentar su contraste. Los colorantes son compuestos orgánicos con afinidad por materiales orgánicos específicos; muchos tienen carga positiva, son catiónicos (como el azul de metileno, cristal violeta y la safranina) y se combinan con los constituyentes celulares de carga negativa como los ácidos nucleicos y los polisacáridos. INSTRUCCIONES: resalta la respuesta correcta. 143. Una preparación en fresco para ser observada al microscopio debe: a. Teñirse cuidadosamente para evitar la muerte de los microorganismos. b. Colocarse entre porta y cubreobjetos. c. Aplicársele colorantes débiles para evitar la muerte. d. Aplicársele un mordente y luego el colorante. 144. La técnica de cubo de agar es ideal para observar: a.Gemación de las levaduras. b. Germinación de las bacterias. c. Estructuras de reproducción de moho d. Obtener micelio vegetativo 145. La técnica de microcultivo es ideal para observar estructuras: a. Reproductivas de los mohos. b. Reproductivas de bacterias. c. Reproductiva de levaduras. d. Reproductivas de protozoarios. 146. La observación en el microscopio compuesto emplea preparaciones: a. En fresco o fijas b. Solamente preparaciones fijas c. Aquellas que tienen grupos cromóforos d. Sólo aquellas que tienen movilidad 147. Las tinciones diferenciales permiten identificar: a. Grupos bacterianos b. La pared celular de un procarionte c. Estructuras de reproducción d. El género y la especie 148. Se aplica calor a una preparación de Micobacterium para: a.- Fundir las ceras de las bacterias b. Disolver el colorante c.
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