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Genética Curso Medicina Veterinária Prof(a): Betânia Glória Campos M. Veterinária – Doutora Produção Animal UFMG Patos de Minas, 2018 Aula 3 – Natureza química do material genético; Estrutura dos ácidos nucléicos; Duplicação do DNA, trancrição e tradução. NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA • Depois de muitos experimentos, somente em 1952 a comunidade científica aceitou o DNA como sendo o material genético. • Porque da relutância? • Achavam a substância química do DNA muito simples para tanta habilidade. Quais habilidades? • Estocar todas as informações sobre as características de um organismo; • Passar a informação adiante de uma geração para seguinte; • O material genético tem tanto a habilidade em codificar uma informação específica, quanto a capacidade em duplicar esta informação com precisão Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Prova de que o DNA é o material genético •Pesquisa de Hershey e Chase em 1952. •Esclareceu a dúvida se o material genético era formado por DNA ou protéina. BacteriófagoFosforo Enxofre Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab C T G A C T G A C T G A C A G C T G A C T G Armazena e codifica grande quantidade de informação (4n - 4 - bases AGCT e n- número de bases da molécula). Autoduplicação. Apresenta mecanismo de defesa contra a perda de informação genética (informação nas duas cadeias). A complementaridade das bases do DNA permite que as cadeias se identifiquem e se reúnam numa mistura complexa de moléculas – hibridização.A DUPLA HÉLICE WATSON E CRICK 1953 Porque o o DNA é o material genético NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA – Watson e Crick (1953). O DNA é composto de 4 moléculas básicas chamadas: NUCLEOTÍDEOS NUCLEOTÍDEOS: são idênticos exceto por conterem uma base nitrogenada diferente. Cada NUCLEOTÍDEO contém: Um grupo fosfato, um açúcar (desoxirribose) e uma das 4 bases nitrogenadas . Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA Purinas: adenina e guanina; Pirimidinas: citosina e timina Quais são as 4 bases nitrogenadas? Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA – Regras de Chargaff Vamos à umas regrinhas 1. A quantidade total de purinas (A+G) = pirimidinas (T+C); 2. A quantidade de Timina = Adenina; 3. A quantidade de Citosina = Guanina; 4. Mas a quantidade de A+T ≠ C+G. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA • Relação A+T/G+C Organismo Tecido A+T/G+C Mycobacterium tuberculosis - 0,42 Humano Fígado 1,53 Humano Espermatozóide 1,62 Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO 2-Deoxy-D-ribose Desoxirribose – Pentose - Açúcar Estrutura do DNA 1c 2c NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA E como seria a estrutura espacial do DNA? Elucidada em 1953 por Watson e Crick o Modelo Helicoidal – Dupla Hélice Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA E como seria a estrutura espacial do DNA? DNA é longo e fino; Tem duas partes paralelas uma à outra, correndo ao longo da molécula; Molécula é helicoidal; Estrutura em dupla hélice que se assemelha a uma escada em caracol, enrolada para direita. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA Modelo de Watson e Crick Dupla hélice; Cada metade é formada por uma cadeia de nucleotídeos mantidos juntos por LIGAÇÕES FOSFODIÉSTER ou açúcar-fosfato; As duas hélices são mantidas juntas por PONTES DE HIDROGÊNIO. As pontes de hidrogênio são ligações bem fracas e isto tem uma importância, que será vista. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Revisão!!!!!! O que é um éster? Os ésteres são compostos orgânicos cujas moléculas possuem o grupo acila (COO) ligado a dois radicais orgânicos (iguais ou não). Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Revisão!!!!!! O que são pontes de hidrogênio? Atração elétrica fraca onde um átomo com carga negativa (O, Flúor e N) de uma molécula, atria outro átomo com carga positiva de outra molécula. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Estrutura do DNA - Modelo de Watson e Crick As duplas fitas correm anti-paralelas Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab OS NUCLEOTÍDEOS SÃO LIGADOS ATRAVÉS DO C5 E C3 DAS PENTOSES NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Capacidade do DNA em codificar informações x computador Curiosidade Trabalham em sistema binário Processam 2n 1bit=1unidade binária (0 ou 1) Trabalham em sistema quaternário Processam 4n DNA humano – praticamente infinito 4 2,9bilhões Apresentador Notas de apresentação Centenas de bilhões de nucleotideos NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Pares de nucleotídeos por organismo Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA • Replicação semiconservativa – Modelo de Watson e Crick • Watson e Crick perceberam que o pareamento complementar de bases fornecia o fundamento da fidelidade de replicação do DNA. • Cada base no filamento molde dita a base complementar no filamento novo. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Propriedades da duplicação O DNA é a única molécula capaz de sofrer auto-duplicação. A duplicação do DNA ocorre sempre quando uma célula vai se dividir. Ocorre durante a fase S da intérfase. Fase S Interfáse: 8 horas para replicar 6x109 pares de base. Interfase Mitose G22G1 S Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA • Hoje é sabido que o processo de replicação do DNA é muito complexo. • Abaixo algumas das principais enzimas envolvidas: Helicases – separa as duas fitas da molécula de DNA. Primase – sintetiza pequenas moléculas de RNA (10 bases) utilizadas como iniciadores (primers) durante o processo de replicação do DNA. DNA polimerase –adição de um nucleotídeo de acordo com a sequência exposta. Sempre no radical hidroxil da extremidade 3’ da cadeia que está se formando. Desta forma, as fitas só podem crescer no sentido 5“----3’. Revisão contra mutações – atividade exonucleásica 3’-- 5’. Remoção do primer. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicaçãodo DNA SSB (“single-strand-binding”) – ligam-se a cada uma das fitas impedindo o reanelamento das mesmas. Topoisomerases – responsáveis por aliviar a torção na parte da fita que não está sendo replicada. DNA Ligase - completa a ligação fosfodiester após retirada fragmentos de okazaki. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA 1) Origem de Replicação Por ser muito extenso o DNA é aberto em locais específicos chamados Origens de replicação. As origens de replicação formam “bolhas de replicação” que avançam para os dois lados simultaneamente. Por isso a replicação do DNA é dita Bidirecional A medida que vão avançando elas vão se encontrando até duplicar o DNA inteiro. Apresentador Notas de apresentação Replicação ocorre em todos cromossomos ao mesmo tempo Mais de 3.000 regioes de replicação Duplicação do DNA, transcrição e tradução Início da replicação do DNA 1. A enzima DNA polimerase não é capaz de iniciar uma fita a partir do nada. 2. As DNA’s polimerase necessitam de uma fita inicializadora auxiliar (PRIMER) 3. Uma enzima chamada PRIMASE confecciona o primer para que a DNA polimerase possa iniciar a duplicação do DNA. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução A Enzima DNA polimerase capta nucleotídeos e os unem, conforme o pareamento: A-T / G-C Início da replicação do DNA Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Sentido de alongamento do DNA 5’ 3’ • A DNA polimerase percorre o DNA sempre no sentido 5’ 3’ • Dessa maneira o DNA novo só pode crescer neste sentido 5’ 3’ Etapas da duplicação Só que o DNA apresenta uma orientação anti-paralela entre as duas fitas. No final do processo: Os primers da fita retardada são removidos e os fragmentos de DNA unidos pela DNA ligase. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA FITA CONTÍNUA (FITA LÍDER) – sintetizada continuadamente a partir de um iniciador na fita molde 3’_ 5’ FITA DESCONTÍNUA (FITA RETARDADA) – sintetizada descontinuadamente a partir de múltiplos iniciadores • Sítios descobertos no molde da fita descontínua são copiados em pequenos iniciadores de RNA pela primase. • Cada iniciador é alongado pela DNA polimerase resultando na formação dos FRAGMENTOS DE OKAZAKI. •DNA polimerase remove o primer do RNA do fragmento adjacente e preenche os “gaps” entre os fragmentos que, então, são unidos pela DNA ligase. Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Duplicação do DNA, transcrição e tradução Mecanismo de replicação do DNA Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Rapidez e Precisão da Replicação do DNA Espécie Humana: 5,81 x109 pares de bases por célula somática. Para ocorrer mitose todo este material deve ser replicado Comparação a um livro: 1900 pares de base/página; 3.000.000 páginas ou 6.000 livros de 500 paginas; Deveria ser digitado em 6 horas; Erro permitido: 1 par de base para cada 1.000.000; No total de DNA de uma célula humana é esperado cerca de 12.000 nucleotídeos inseridos erradamente em cada replicação Variação Taxa de reparo – revisão editorial – DNA Polimerase Curiosidade 5.810.000.000 Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução O Dogma da Biologia Molecular O Dogma propõe que existe uma unidirecionalidade na informação contida nos genes em que esta informação genética é perpetuada através da replicação do DNA e é traduzida através de dois processos: Transcrição: que converte a informação do DNA em uma forma mais acessível (uma fita de RNA complementar); Tradução: que converte a informação contida no RNA em proteínas. Este dogma foi proposto pela primeira vez por Francis Crick, em 1958. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Composição e Estrutura do RNA O RNA, ou ácido ribonucléico tem muitas semelhanças com o DNA, porém apresenta diferenças fundamentais: é formado por uma fita simples que pode dobrar-se sobre si mesma (produzindo formas tridimensionais complexas através da ligação intramolecular de pares de bases nitrogenadas), possui o açúcar ribose em vez da desoxirribose; e a base nitrogenada uracila em vez da timina. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Composição e Estrutura do RNA Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Composição e Estrutura do RNA Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Composição e Estrutura do RNA Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Composição e Estrutura do RNA Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Transcrição Os primeiros pesquisadores tiveram bons motivos para pensar que a informação não é transferida diretamente do DNA para a proteína. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Transcrição Formação do mRNA a partir da informação contida no DNA (núcleo) e por complementaridade. As cadeias do DNA se separam e uma serve de molde para o RNA, enquanto a outra fica inativa. Ao fim da transcrição, as cadeias que foram separadas voltam a unir-se. Para que ocorra a transcrição é necessário a ação de uma enzima que catalisa o processo, a RNA polimerase. Apresentador Notas de apresentação A transcriçao dso ocorre de genes ou grupos de genes. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Transcrição O mRNA, formada a partir do molde de uma das cadeias do DNA, é polimerizado no sentido 5´-3´e as bases ligam-se por complementaridade. (Timina é substituída pela Uracila e liga-se à Adenina). Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Transcrição Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Transcrição Etapas 1 – Reconhecimento da cadeia molde de DNA O DNA e as polimerases do RNA (enzimas catalisadoras da reação) estão livres na célula e podem se encontrar ao acaso; A transcrição só tem início quando a enzima encontra e liga-se fortemente ao sítio promotor. Quando isso acontece, a dupla-hélice é desenrolada e as fitas são separadas. 2 – Início da transcrição A RNA polimerase ligada à região promotora inicia o processo de transcrição, promove a separação pontual das cadeias e inicia-se a transcriçãoda informação, formação do RNA a partir de nucleotideos livres na célula e faz-se sempre na direção 5´-3´. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Transcrição Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Transcrição Etapas 3 – Alongamento À medida que vai sendo fabricado o RNA mensageiro, liberta-se da cadeia- molde de DNA e o DNA já transcrito enrola-se quase imediatamente, voltando ao seu estado inicial (dupla hélice). A este processo, dá-se o nome de Elongação Curiosidade: A cadeia de RNA produzida é simples e livre. Cerca de 40 nucleotídeos podem ser produzidos por segundo, a uma temperatura de 37ºC em bactérias. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Transcrição Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Transcrição Etapas 4 – Finalização O RNA polimerase percorre a cadeia e transcreve o DNA em RNA até encontrar a sequência de término, que contém bases específicas que determinam o fim da transcrição. Quando a RNA polimerase encontra a sequência de terminação, o RNA para de ser transcrito. Neste momento, liberta-se uma molécula de RNA e imediatamente a molécula de DNA se enrola completamente. A sequência de DNA que contém os genes sinalizadores do término é chamada de região terminação. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Transcrição Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Maturação No RNA formado a partir do DNA há a formação de códons, que nada mais são que grupos de três bases nitrogenadas que formam um código para um determinado aminoácido. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. Duplicação do DNA, transcrição e tradução Maturação Algumas partes do RNA produzido não são codificantes, ou seja, não serão utilizadas para produzirem proteínas. Estas partes são chamadas de íntrons. As regiões que serão expressadas são chamadas de éxons. Assim que é formada, a molécula de RNA passará por um processo de maturação, onde os íntrons serão removidos. Apresentador Notas de apresentação O dna se encontra no núcleo e a proteína é sabido sintetizada no citoplasma. FIM Apresentador Notas de apresentação Concentração em cidades com até 100.000 hab Genética�Curso Medicina Veterinária NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Número do slide 3 Número do slide 4 NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Número do slide 9 NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO OS NUCLEOTÍDEOS SÃO LIGADOS ATRAVÉS DO C5 E C3 DAS PENTOSES Número do slide 18 NATUREZA QUÍMICA DO MATERIAL GENÉTICO Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Curiosidade Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Número do slide 37 Número do slide 38 Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução Transcrição Transcrição Transcrição Transcrição Transcrição Transcrição Duplicação do DNA, transcrição e tradução Duplicação do DNA, transcrição e tradução FIM
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