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Introdução à Histologia Marco A. Prates Nielebock Mestre em Patologia – UFF Doutorando em Doenças Infecciosas – INI - FIOCRUZ Preparo de Lâminas Histológicas OBJETIVOS • Estudo da estrutura e inter-relação dos constituintes teciduais de um organismo • Células e material extracelular • Tecidos Preparo de Lâminas Histológicas OBTENÇÃO DAS AMOSTRAS 1- FIXAÇÃO - prevenção de autólise e ataque bacteriano - preservar a estrutura e composição das moléculas dos tecidos - permite uma coloração adequada - endurecimento do material FORMOL 2- DESIDRATAÇÃO • Tem como objetivo eliminar toda água existente na célula. Para isso se usa o etanol 70% até chegar ao 100%. ÁLCOOL 3- DIAFANIZAÇÃO OU CLARIFICAÇÃO A DIAFANIZAÇÃO QUE TEM COMO OBJETIVO GARANTIR QUE NÃO EXISTE MAIS ÁGUA NA CÉLULA. NESSE PROCESSO É USADO O XILOL, QUE TORNA MISCÍVEL O TECIDO COM A PARAFINA. XILOL 4- INCLUSÃO EM PARAFINA A INCLUSÃO, EM QUE SE UTILIZA A PARAFINA QUENTE NO SEU PONTO DE FUSÃO (MAIS OU MENOS 56-60ºC). 5- MICROTOMIA REALIZADO PELO MICRÓTOMO, ESSE CORTE DEVE SER EXTREMAMENTE FINO COM APROXIMADAMENTE 5-10µM. 6- COLORAÇÃO NESSE PROCESSO É REMOVIDO A PARAFINA E HIDRATADO O TECIDO QUE SERÁ CORADO E DESIDRATADO RAPIDAMENTE EM ÁLCOOL 70% A 100%. CORANTE UNIVERSAL: HEMATOXILINA E EOSINA 7- MONTAGEM PARA FINALIZAR O PROCESSO É REALIZADA A MONTAGEM DA LÂMINA, E DEIXANDO A MESMA EM BÁLSAMO DO CANADÁ PARA CONSERVAÇÃO DO TECIDO E FIXAÇÃO DA LAMÍNULA NA LÂMINA. UM VÍDEO RAPIDINHO...
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