Microscopia Óptica: Princípios e Tipos

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Microscopia 
Francine Padilha – LBMAT 8824-2575 
Bruno Humia – LBMAT 9191-0680 
 
Sumário 
• Introdução 
 
• Princípios de Funcionamento 
 
• Tipos de Microscopia óptica 
 
• Microscópio Óptico 
Primeiros Microscópios 
• Hans e Zachary Janssen – 1590; 
 
• Antonie van Leeuwennhoek – “Animáculos”C 
Primeiros Microscópios 
• Robert Hooke – “Células”. 
Dimensões Alcançadas 
• A microscopia permite a ampliação em caráter visual de 
estruturas invisíveis a olho nu. 
Princípio de funcionamento 
• Conjunto de lentes especializadas. 
 Vidro – Microscópio óptico; 
 
 Eletromagnética – Microscópio eletrônico. 
Princípio de funcionamento – Fluxo da luz 
Lâmpada de tungstênio 
 
Lentes de campo 
 
Condensador 
 
Amostra 
 
Lentes Objetivas 
 
Prisma 
 
Lentes oculares 
Exemplos de imagens 
LM 
Staphylococcus aureus 
MEV 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Óptico Composto; 
Estruturas celulares e teciduais 
 
Ampliação da luz refletida pela amostra 
 
Testes diagnósticos, pesquisa... 
Distorção da coloração – baixo contraste 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Óptico Composto; 
Reflexão de luz de fundo 
 
Visualização em único plano 
 
Completa visualização celular 
 
Amostras fixadas - Mortas 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Campo escuro; 
Reflexão da luz emitida pela amostra 
 
Fundo sem reflexão de luz 
 
Maior quantidade de detalhes 
Disco opaco 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Campo escuro; 
Diagnóstico de Síflis, leptospirose... 
 
Espiroquetas 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Contraste de Fase; 
Amostras não fixadas ou coradas - Vivas 
 
Perfil de fase e amplitude da luz 
 
Geração de contraste da imagem 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Sem contraste X Com contraste; 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Fluorescência; 
Visualização de estruturas específicas 
 
Anticorpos + Fluoróforos 
 
Emissão em diferentes comprimentos 
de onda 
 
Espelho dicróico 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Fluorescência; 
Análise em células vivas ou mortas 
 
Visualização em um único plano 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Confocal; 
Focalização de único plano 
 
Montagem tridimensional 
Tipos de Microscopia 
• Microscopia Óptica. 
Fluorescência X Confocal; 
Microscópio Óptico 
 • Estrutura Física. 
Microscópio Óptico 
 • OBS1 – Potência das lentes 
Pt = Plo x Plob 
Pt – Potência Total 
Plo – Potência da Lente Ocular 
Plob – Potência da Lente Objetiva 
Microscópio Óptico 
 • OBS2 – Lente objetiva 100x 
Índice de refração – h (ar = 1 / óleo de imersão =1,4) 
Obrigado!