Influência do Inseticida Fipronil Sobre o Crescimento de Bactérias Fixadoras de Nitrogênio Associadas ao Solo Cultivado com Cana-de-Açúcar

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Influência do Inseticida Fipronil Sobre o Crescimento de Bactérias Fixadoras 
de Nitrogênio Associadas ao Solo Cultivado com Cana-de-Açúcar 
 
Adijailton José de Souza
(1)
; Bruno Augusto Prohmann Tschoeke
(2)
; Jessica Rafaella de Sousa 
Oliveira
(3)
; Jose Aldo Teixeira da Silva
(4)
; Cícero Geraldo Gualter dos Santos
(5)
; Maria Camila 
de Barros da Silva
(6)
; Fernando José Freire
(7)
; Júlia Kuklinsky-Sobral
(8) 
 
(1)Discente de graduação em Agronomia – Bolsista CNPq, Laboratório de Genética e Biotecnologia Microbiana (LGBM), Unidade 
Acadêmica de Garanhuns (UAG), Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE), Av. Bom Pastor, s/n, Boa Vista, Garanhuns, 
PE, CEP 55296-901. Email: adjailtonjose@hotmail.com; (2)Discente de graduação em Agronomia – Bolsista PET-Biotecnologia, 
(3)Discente de graduação em Agronomia – Bolsista PET-Biotecnologia, LGBM/UAG/UFRPE; (4)Discente de graduação em 
Agronomia, LGBM/UAG/UFRPE; (5)Discente de graduação em Agronomia, - Bolsista de Extensão, LGBM/UAG/UFRPE; 
(6)Mestranda do programa de Pós-Graduação em Produção Agrícola, LGBM/UAG/UFRPE; (7)Professor, Departamento de 
Agronomia, UFRPE; (8)Professora, Tutora do Grupo PET Biotecnologia, LGBM/UAG/UFRPE. 
 
 
RESUMO – Objetivo desse trabalho foi estudar o 
efeito do inseticida fipronil sobre linhagens bacterianas 
isoladas do microcosmo do solo cultivado com cana-
de-açúcar no estado Pernambuco quanto à capacidade 
de fixação biológica de nitrogênio in vitro. O 
experimento foi realizado no Laboratório de Genética e 
Biotecnologia Microbiana (LGBM), Unidade 
Acadêmica de Garanhuns – Universidade Federal 
Rural de Pernambuco (UAG/UFRPE), foram utilizadas 
cinco bactérias, isoladas do microcosmo do solo 
cultivado com cana-de-açúcar e tratado com inseticida 
fipronil, essas linhagens receberam os tratamentos: 
Controle (0 g.ha
-1
), ½ da concentração de campo (100 
g.ha
-1
), a concentração de campo (200 g.ha
-1
) e o dobro 
da concentração de campo (400 g.ha
-1
), as condições de 
campo foram convertidas para as de laboratório, e se 
adicionadas as correspondentes quantidades do 
inseticida ao meio NFb semi-sólido, sendo duas 
repetições para cada bactéria, que após inoculadas, 
foram incubadas a temperatura de 28°C, e aos oito dias 
foram feitas as leituras. De acordo com os resultados 
observados, pode-se constatar que não houve uma 
influência muito severa sobre capacidade destas 
bactérias quanto à fixação biológica de nitrogênio, 
sendo considerada a quantidade do inseticida fipronil 
como fator influência. 
 
Palavras-chave: bactérias diazotróficas, controle 
químico, Saccharumspp., interação bactéria-planta. 
 
INTRODUÇÃO - Os cupins tornaram-se importantes 
pragas da cana-de- açúcar, principalmente as espécies 
Heterotermes tenuis e Cornitermes cumulans, pois são 
as mais frequentes e de maior distribuição (Arrigoniet 
al., 1989). 
O fipronil é um inseticida utilizado nas culturas de 
cana-de-açúcar da zona da mata pernambucana, sua 
aplicação é realizada pré-plantio, buscando maior 
prevenção contra o ataque de cupins aoscolmos de cana 
soca (Souza et al., 2011). 
Logan et al. (1990), o princípio de controle do 
método químico convencional é a aplicação de 
inseticida em área total, formando uma barreira 
química, o que na verdadenão aproveita os aspectos 
sociais dos cupins, não eliminando de fato as colônias. 
O manejo da adubação nitrogenada em cana-de-
açúcar constitui-se fator de produtividade importante 
especialmente nas soqueiras (Prado e Pancelli, 2008). 
Os fertilizantes nitrogenados aplicados ao solo 
sofrem uma série de transformações químicas e 
microbianas, que podem resultar em perdas para os 
vegetais (Franco et al., 2008). Além do nitrogênio, a 
cultura da cana requer grande quantidade de fertilizante 
fosfatado, devido às características dos solos em que 
são cultivadas (Simões Neto et al., 2009). 
A cana-de-açúcar é altamente extratora, retirando 
do solo quantidades maiores de nitrogênio do que 
aquelas que são adicionadas em adubações, podendo 
ser explicado pela fixação biológica de nitrogênio 
(FBN) (Boddey et al., 2003). 
Dentre os processos que permitem maior 
sustentabilidade, a fixação biológica de nitrogênio 
(FBN) é reconhecida por diminuir o custo da produção 
e a dependência do agricultor por insumos 
industrializados (Medeiros et al., 2007). 
Os estudos referentes ao uso de parâmetros 
microbianos como indicadores de poluição do solo e do 
ambiente têm sido desenvolvidos com o objetivo de 
verificar a ação dos elementos contaminantes, 
provenientes de fertilizantes, pesticidas, resíduos 
orgânicos e do manejo do solo sobre a comunidade e a 
atividade microbianas do solo (FLIESSBACH, et al. 
1994; FERNANDES, 1999;FORTES NETO, 2000, 
FERNANDES & BETTIOL,2003). 
A possibilidade de substituição parcial ou total 
desses adubos pelo nitrogênio atmosférico, fixado por 
sistemas biológicos, apresenta-se como uma alternativa 
- FERTBIO 2012 Maceió (AL), 17 a 21 de setembro- 
- Resumo Expandido - 
 2 
de grande relevância econômica e ambiental (National 
Academy of Sciences, 1994). 
Neste contexto, a busca de práticas sustentáveis 
para conversação do solo e da comunidade microbiana 
nele presente tem tomado cada vez mais espaço nas 
pesquisas científicas atuais. Portando, o presente 
trabalho objetivou estudar os efeitos de diferentes 
concentrações do pesticida fipronil, in vitro, sofre 
linhagens bacterianas fixadoras de nitrogênio, isoladas 
do microcosmo do solo cultivado com cana-de-açúcar 
na zona da mata pernambucana. 
 
MATERIAL E MÉTODOS - O experimento foi 
realizado no Laboratório de Genética e Biotecnologia 
Microbiana (LGBM), Unidade Acadêmica de 
Garanhuns, Universidade Federal Rural de 
Pernambuco (UAG/UFRPE), selecionando-seda 
coleção do LBGM, cinco bactériasdiazotróficas 
(UAGMc 7, UAGMc 18, UAGMc 20, UAGMc 30 e 
UAGMc 38)isoladas de microcosmo do solo cultivado 
com cana-de-açúcar, na zona da mata pernambucana. 
As bactériasforam inoculadas, a partir de col6onias 
isoladas, em meio TSA (Tryptcase Soy Agar) 10% 
líquido, e colocadas em mesa agitadora por dois dias, 
sob rotação de 120 rpm, paralelamente preparou-se a 
solução estoque do pesticida fipronil a 497,5mM, que 
posteriormente foi adicionado em 7 ml de meio NFb 
semi-sólido (meio livre de fonte de nitrogênio) 
(Dobereiner et al., 1995), a quantidade proporcional às 
concentrações de 0, 100, 200 e 400 g.ha
-1
 (controle, 
metade da concentração de campo, concentração de 
campo, e o dobro da concentração de campo). Logo em 
seguida, inoculou-se 10µL de cultura líquida, sendo 
duas repetições para cada bactéria. Os inóculos forma 
incubados a 28
o
C por 8 dias, quando se realizou as 
leituras, caracterizando os isolados qualitativamente 
em positivos e negativos, utilizando como parâmetro 
de classificação a formação de um halo característico 
para esse teste. 
 
RESULTADOS E DISCUSSÃO - Avaliação da 
fixação biologia de nitrogênio se realizou através da 
observação visual, por meio do halo de crescimento, 
para os isolados positivos (Figura 1). E sem formação 
de halo de crescimento para os negativos (Figura 2). 
As bactérias, avaliadas quanto às condições da 
presença do pesticida fipronil no meio de cultura, não 
se mostraram inibidas quanto à fixação biológica de 
nitrogênio, sendo que a linhagem UAGMc 7 
apresentou-se negativa na concentração de 200 g.ha
-1
. 
Verificou-se também que não teve efeitos do pesticida 
nos demais tratamentos para essa mesma bactéria. 
Enquanto que as linhagens UAGMc 20, UAGMc 30 e 
UAGMc 38 apresentaram-se100% positivas diante 
todos os tratamentos, resultado semelhantes ao de 
Souza et al 2011, onde foi observado que a inseticida 
fipronil não afetou a funcionalidade das bactérias 
quanto ao potencial de fixação biológica de nitrogênio 
in vitro. Já a linhagem UAGMc 18, sofre influência do 
pesticida quando a sua concentração de campo foi 
dobrada, deixando evidente que a quantidade do 
pesticida no solo pode sim ser um fator limitante a 
fixação biológica de nitrogênio, dependendo do 
genótipo bacteriano. 
 
CONCLUSÕES - Pode-se concluir que o inseticida 
fipronil não exerce efeitos negativos sobre a fixação 
biológica de nitrogênio de bactérias diazotróficas 
avaliadas, associadas ao solo cultivado com cana-de-
açúcar, e que isso poder favorecer grupos específicos, e 
desfavorecer outros, dentro de uma gama de diferentes 
quantidades do produto aplicado. 
 
AGRADECIMENTOS- Agradecemos ao CNPq, a 
FACEPE pelo apoio financeiro; e, ao grupo do 
Laboratório de Genética e Biotecnologia Microbiana 
da UAG/UFRPE. 
 
REFERÊNCIAS 
 
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Figura 1 -Linhagem positivaem meio NFb, e formação de halo de Fixação. 
 Biológica de Nitrogênioin vitroem meio NFb. 
 
 
Figura 2 - Linhagem negativaem meio NFb, sem formação de halo de Fixação. 
 Biológica de Nitrogênioin vitro.