Validação testes imunológicos

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IMPORTÂNCIA DOS TESTES SOROLÓGICOS PARA O DIAGNÓSTICO DAS DOENÇAS
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IMPORTÂNCIA DA PESQUISA DE ANTICORPOS NO DIAGNÓSTICO INDIVIDUAL
Elucidar processos patológicos com sintomas e sinais clínicos confundíveis
Diferenciar a fase da doença
Diagnosticar doença congênita
Selecionar doadores de sangue
Selecionar doadores e receptores de órgãos para transplantes
Avaliar o prognóstico da doença
Avaliar a eficácia da terapêutica e a suspensão da terapêutica
Avaliar a imunidade específica naturalmente adquirida ou artificialmente induzida
Verificar o agravamento da patologia
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IMPORTÂNCIA DA PESQUISA DE ANTICORPOS EM INQUÉRITOS SOROEPIDEMIOLÓGICOS
Estabelecer a prevalência da doença
Verificar a erradicação da doença
Verificar a reintrodução de novos casos em áreas consolidadas
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IMPORTÂNCIA DOS TESTES SOROLÓGICOS NA PESQUISA DE ANTÍGENOS
Como critério de cura
Na definição da etiologia da doença
Na seleção de doadores de sangue
Em inquéritos epidemiológicos
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PARÂMETROS PARA VALIDAÇÃO DE UM TESTE SOROLÓGICO
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Combinação binária entre os resultados prováveis obtidos em um determinado teste e o diagnóstico verdadeiro da doença
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Validade Intrínseca
É o desempenho do teste quando 
comparado a um teste de referência.
Sensibilidade
Especificidade
Eficiência
Característicos do teste e não da população em estudo
Fornecem resultados consistentes independente da prevalência da doença
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Validade Intrínseca
Sensibilidade
 É a porcentagem de pacientes com determinada 
condição/doença para os quais, se o teste é utilizado, se obtém resultados positivos. 
 Estes também são denominados "verdadeiros positivos". 
 Quanto maior a sensibilidade, maior o poder do 
teste de detectar a condição ou doença
É o desempenho do teste quando 
comparado a um teste de referência.
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 Testes com alta sensibilidade ( 99%) podem, ao se obter resultado negativo, excluir a presença da condição ou doença. 
 Existem casos em que os pacientes estão sem a determinada condição ou doença, o teste é utilizado e apresenta resultado positivo. Estes casos denominam- se falsos positivos. A maioria dos testes apresentam alguma margem/proporção de falsos positivos. 
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Validade Intrínseca
Especificidade
 É a porcentagem dos indivíduos que não tem a condição/doença e ao utilizar-se o teste apresenta resultados negativos. 
 Estes são denominados "verdadeiros negativos". 
 Os testes com alta especificidade ( 99%) e que são negativos em indivíduos sadios ou que apresentam sintomas similares mas não apresentam a condição/doença, são muito úteis para
confirmar o diagnóstico.
É o desempenho do teste quando 
comparado a um teste de referência.
Especificidade = VN
 VN + FP
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 Quanto mais alta a especificidade, menor será a taxa de falso positivos e menor será a proporção das pessoas desnecessariamente preocupadas ou expostas a tratamentos indevidos. 
A maioria dos testes mostra alguns "falso-negativos“: os pacientes estão com a condição ou doença e nos quais o teste se apresenta negativo. 
Em algumas situações ou condições em que há riscos de omitir ou retardar tratamentos necessários, a proporção de falso negativos pode ser inaceitável. 
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Combinação binária entre os resultados prováveis obtidos em um determinado teste e o diagnóstico verdadeiro da doença
SENSIBILIDADE
ESPECIFICIDADE
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Validade Intrínseca
Eficiência
É a porcentagem correta de resultados do testes, 
verdadeiros positivos e negativos.
 Em economia da saúde, ao comparar produtos, eficiência 
inclui a variável custo, indicando o mesmo ou maior efeito 
pelo menor custo.
É o desempenho do teste quando 
comparado a um teste de referência.
Eficiência = VP + VP
	 VP + VN + FP + FN
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É a freqüência da condição ou doença na população em dado momento.
 Esta se baseia na incidência de novos casos em um período de um ano, geralmente, por 100.000 habitantes e na duração de episódio de estar com a condição ou doença. 
 A densidade e concentração de casos em uma população em um determinado momento, influência as proporções de testes positivos detectados. 
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	É a probabilidade que um paciente com um teste positivo tenha efetivamente a condição ou doença, baseada na PREVALÊNCIA da condição ou doença na população estudada.
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	Mede a probabilidade de obter "verdadeiros negativos": sem a condição ou doença nos quais se obtém resultados negativos, baseado na PREVALÊNCIA desta condição, nesta população, neste período de tempo. 
 Enquanto a sensibilidade e a especificidade de um teste são constantes na população em estudo sempre que testadas, o valor preditivo varia com a sensibilidade e com a prevalência. 
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Por exemplo, se um teste tem sensibilidade de 96%, o valor preditivo positivo varia com a prevalência como segue:
A significância de um teste pode ser muito diferente no
 hospital comparado a uma clínica geral, pois a 
prevalência é mais elevada na população referida.
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Validade Extrínseca
É a capacidade do teste em detectar a real situação
da população em relação à doença que está sendo
estudada. Também avalia o desempenho do teste em
uma dada população.
Precisão
Acurácia ou 
exatidão
Reprodutibilidade
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Validade Extrínseca
É a capacidade do teste em detectar a real situação
da população em relação à doença que está sendo
estudada. Também avalia o desempenho do teste em
uma dada população.
Precisão
 É um parâmetro que determina existir concordância dos resultados obtidos quando um mesmo teste é feito várias vezes.
 Mede o erro acidental do método, que corresponde ao erro experimental acumulado (erro aleatório).
 É a reprodutibilidade dos resultados ao repetir o teste várias vezes, no mesmo ou em vários laboratórios, em circunstâncias
 similares. A precisão não implica acurácia!
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Validade Extrínseca
É a capacidade do teste em detectar a real situação
da população em relação à doença que está sendo
estudada. Também avalia o desempenho do teste em
uma dada população.
Acurácia ou 
exatidão
 É um parâmetro que determina a capacidade do teste
em fornecer resultados muito próximos ao verdadeiro
valor do que se está medindo.
 Mede o erro sistemático ou a tendência dos resultados
de se desviarem em uma dada direção e proporção
em relação ao valor real.
 É a habilidade o teste de obter resultados similares 
ao teste padrão ("Gold Standard").
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Validade Extrínseca
É a capacidade do teste em detectar a real situação
da população em relação à doença que está sendo
estudada. Também avalia o desempenho do teste em
uma dada população.
Reprodutibilidade
 É a obtenção de resultados iguais em testes realizados com a mesma amostra de material biológico, quando feitos por pessoas diferentes em locais variados e se garante quando a
precisão e a exatidão são sempre avaliadas.
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Fórmulas
VPP = VP
	VP + FP
VPN = VN
 VN + FN
VP = Sensibilidade x Prevalência
FN = (1 – Sensibilidade) x Prevalência
VN = Especificidade x (1 – Prevalência)
FP = (1 – Especificidade) (1 – Prevalência)
Probabilidade da doença se o teste
é positivo.
Probabilidade da doença se o teste
é negativo.
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EXEMPLO 1
VPP = ?
VPN = ?
Sensibilidade = 95%
Especificidade = 95%
Prevalência da doença = 1%
Amostragem = 2000 pessoas 
VPP = 19 = 0,16 ou 16%
 118
VPN = 1881 = 0,999 ou 99,9%
 1882
VPP = VP
	VP + FP
VPN = VN
 VN + FN
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EXEMPLO 2
VPP = ?
VPN = ?
Sensibilidade = 95%
Especificidade = 95%
Prevalência da doença = 20%
Amostragem = 2000 pessoas 
VPP = 380 = 0,82 ou 82%
 460
VPN = 1520 = 0,98 ou 98%
 1540
VPP = VP
	VP + FP
VPN = VN
 VN + FN
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EXEMPLO 3: teste para doença de ChagasVPP = ?
VPN = ?
Sensibilidade = 98%
Especificidade = 98%
Prevalência da doença = 0,5%
Amostragem = 10.000 pessoas
(população de bancos de sangue de áreas não-endêmicas do Brasil) 
VPP = 49 = 0,198 ou 19,8%
 248
VPN = 9751 = 0,9998 ou 99,98%
 9752
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Ainda tem mais?!
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APLICAÇÃO DE TESTES DIAGNÓSTICOS
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Limiar de reatividade ou cut off é a região de corte do teste sorológico. 
Ou seja, é um valor acima do qual os resultados são considerados + (DOENTES) e abaixo do qual os resultados são considerados – (NÃO-DOENTES).
LIMIAR DE REATIVIDADE OU CUT OFF
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Curva de distribuição da freqüência de títulos normalmente observada na população
Cut off ou 
limiar de reatividade
LIMIAR DE REATIVIDADE OU CUT OFF
Falso-Positivos
Falso-Negativos
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LIMIAR DE REATIVIDADE OU CUT OFF
Imagine que você trabalha num banco de sangue e precisa
selecionar um teste para detectar determinado antígeno...
Onde seria o limiar de reatividade ou cut off?
Ponto de máxima sensibilidade
Aumentou o número de resultados FALSO-POSITIVOS!!
Este teste deverá ter máxima....
SENSIBILIDADE!!! Portanto:
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LIMIAR DE REATIVIDADE OU CUT OFF
Imagine que você trabalha num laboratório de análises clínicas e precisa
selecionar um teste para detectar determinado antígeno...
Onde seria o limiar de reatividade ou cut off?
Ponto de máxima especificidade
Este teste deverá ter máxima....
Aumentou o número de resultados FALSO-NEGATIVOS!!
ESPECIFICIDADE!!! Portanto:
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Exercício para fixação:
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EXERCÍCIO
Você é o analista clínico de um laboratório de referência e precisa aplicar um teste diagnóstico para uma doença com prevalência de 1% na região onde trabalha. Este teste tem sensibilidade de 97% e especificidade de 92%. Supondo que a amostragem seja de 10.000 pessoas, calcule o valor preditivo positivo e o valor preditivo negativo para a menor e a maior prevalência.
VPP = ?
VPN = ?
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