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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RECÔNCAVO DA BAHIA CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS, AMBIENTAIS E BIOLÓGICAS SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS Maria Angélica Pereira de Carvalho Costa CCA 024 - Biologia Geral SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS INTRODUÇÃO O Sistema de endomembranas se distribui por todo o citoplasma e é formado por vários compartimentos :Cisternas, Sacos e Túbulos que se comunicam entre si por comunicação direta ou mediada por vesículas transportadoras RETICULO ENDOPLASMÁTICO Constitui uma rede de distribuição dentro da célula. Por que o RER possui íntimo contato com a carioteca? É uma rede intercomunicante de vesículas achatadas, vesículas redondas e túbulos, formada por uma membrana contínua. RETICULO ENDOPLASMÁTICO Apresenta continuidade com o envoltório nuclear; Ocupa cerca de 10% do volume celular, correspondendo a mais da metade do total de membranas presente em uma célula animal; CARACTERÍSTICAS A quantidade de RE e sua localização no citoplasma varia de acordo com o tipo e metabolismo celular. células da adrenal (Liso), hepatócitos, células secretoras, como as células pancreáticas, parênquima vegetal, vasos lactíferos, pelos glandulares, plantas insetívoras, dentre outras COMPLEXO DE GOLGI Esta organela celular se Esta organela celular se localiza entre o retículo endoplasmático (RE) e a membrana plasmática. O complexo de Golgi é formado por unidades, os dictiossomas, que estão ligados entre si. Cada dictiossoma é composto por um conjunto de sacos ou cisternas discóides e aplanadas, cercadas de vesículas secretoras de diversos tamanhos. COMPLEXO DE GOLGI tamanhos. Cada dictiossoma agrupa, em média, seis cisternas, entretanto, em alguns casos, esta quantidade pode atingir cinco vezes mais. O número de dictiossomas pode variar desde poucas unidades até algumas centenas, isto ocorrerá de acordo com a função realizada pelas células eucariotas. Lisossomos COMPLEXO DE GOLGI COMPOSIÇÃO QUIMICA DO RE, CG E LISOSSOMOS citoplasma Lumem FOSFOLIPIDIOS E PROTEINAS RETICULO ENDOPLASMÁTICO Composição química 70% de proteínas: estruturais, receptoras ou enzimáticas (oxidativas, peptidase, hidrolase e transferases ). 30% de lipídios: fosfolipídios, colesterol e glicolipidios - Assegura o transporte de substâncias, realizando uma verdadeira circulação intracelular, através dele também são realizadas trocas entre a célula e o meio circundante. - Armazena e concentra substâncias provenientes do meio extracelular, através da pinocitose, bem como substâncias produzidas pela própria célula, como é o caso dos anticorpos que se acumulam no retículo endoplasmático FUNÇÕES DO RETICULO ENDOPLASMATICO como é o caso dos anticorpos que se acumulam no retículo endoplasmático dos plasmócitos. -Suporte mecânico ao citossol; -Responsável pela biogênese das membranas celulares -O retículo endoplasmático rugoso está relacionado com a síntese e concentração de proteínas, interferindo no transporte não só de proteínas mas também de substâncias procedentes ao meio exterior. Promover a síntese de lipídos na célula, ou seja, o retículo produz colesterol, triglicéridos, fosfolípidos e esteróides; Metabolização de vários compostos nocivos, nomeadamente drogas, que nele são transformadas em substâncias inócuas ou então em substâncias facilmente RETICULO ENDOPLASMATICO LISO F U N Ç Õ E S são transformadas em substâncias inócuas ou então em substâncias facilmente eliminadas. os barbitúricos, degradados nas membranas do retículo endoplasmático liso das células hepáticas. Controle da atividade de contração muscular: mecanismos ativos de transporte associados à membrana do REL possibilitam a rápida movimentação do Ca2+ para fora e para dentro de suas cisternas. F U N Ç Õ E S RETICULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO Apresenta bastante desenvolvido nas células com intensa síntese protéica destinadas a secreção. A associação dos ribossomos é transitória tão logo a leitura do RNAm termine o ribossomo é liberado no citoplasma até ser novamente engajado na síntese protéica. SINTESE DE PROTEINAS RETICULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO SINTESE DE PROTEINAS OH – C – C – N – H H HR O OH – C – C – N – H H HRLigação peptídica HO HO H2O C – C – N – H H O R OH – C – C – N H O R RETICULO ENDOPLASMÁTICORUGOSO SINTESE DE PROTEINAS MET 1 TIR 2 ARG 3 ALA 4 HIST 5 SER 6 AUG UAC CGA GCU CAC UCA UAA 5 3 1 2 3 4 5 6 ALA HIST SERTIRMET ARG RETICULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO HIPOTESE DO SINAL RETICULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO HIPOTESE DO SINAL RETICULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO HIPOTESE DO SINAL: FASES Reconhecimento: ligação da partícula reconhecedora do sinal (SRP) ao ribossomo e reconhecimento do peptídio sinal. Direcionamento: a conformação adotada pela SRP facilita o seu reconhecimento pelo seu receptor ancorando na superfície do RE.RE. Associação: o ribossomo se ancora ao seu receptor e peptidio nascente se associa ao poro de translocação. Clivagem: a peptidade do sinal cliva o peptidio sinal da estrutura da proteína. Transferência: o peptidio em formação é transferido através do poro para a luz do RE. Inserção de proteínas integráis na membrana do RER PROTEINAS DE MEMBRANA PROTEINAS ?????? CG RETICULO ENDOPLASMÁTICO LISO Fosfatidilcolina: formada na face citosolica do REL pela associação do 1-2- diacilglicerol com a citidina- difosfato-colina (CDP- colina) citidina- difosfato-etanolamina - fostatidiletanolamina Fosfatidilcolina RETICULO ENDOPLASMÁTICO LISO Fosfatidilserina: forma da na face citosolica do REL pela associação do CTP 1-2- diacilglicerol com o aminoacido serina. Fosfatidilinositol: forma na face citosolica do REL, semelhante a fosfatidilserina, exceto pelo fato de que esta está unida ao polialccol ciclico inositol em vez da serina Acido fosfatidico + CTP _________ CDP-1,2-diacilglicerol + PPTransferase + inositol fosfatidilnositol + CMP Acido fosfatidico + CTP _________ CDP-1,2-diacilglicerol + PP Transferase Transferase Fosfatilserina + CMP + Serina Os lipídios são glicosilados no CG Processamento de substancias. Ex: glicosilação dois lipídios, glicosilação de proteínas O-glicosidicas (serina e tronina) Armazenamento e secreção de substâncias, tais como os hormônios; Síntese da lamela média nas células vegetais; FUNÇÕES DO COMPLEXO DE GOLGI Síntese da lamela média nas células vegetais; Origem dos lisossomos; Formação do acrossomo do espermatozóide; Centro de distribuição de moléculas para diversas partes da célula Processamento no CG Proteólise final Glicosilação final (proteínas) Glicosilação (lipídios) SINAL TRANSPORTE KDELLLXX Do RE para o CG e retorno ao RE GPI Do CG para membrana plasmática (secreção) Manose-6 –fosfato Do CG para os endossomos (enzimas Sinais envolvidos no transporte de proteínas pelo sistema de endomembranas. Manose-6 –fosfato Varias L e Y Do CG para os endossomos (enzimas hidrolíticas) YQEL NPXY Da membrana plasmática para os endossomos (endocitose) D=ácido aspartico, E= ácido glutaminico, K=lisina, N=asparagina, F=prolina, Q=glutamina, R=arginina, Y=tirosina, X= qualquer aminoacido, GPI = glicosilfosfatidilinositol LISSOSSOMOS Funções - Fazer a degradação e digestão de partículas originárias do meio exterior às células; - Reciclar (função de renovação celular) outras organelas celulares que estão envelhecidas. Este processo é conhecido como autofagia. ENDOCITOSE Captação de moléculas e células Projeções da membrana plasmática, que se fecham formandouma vesícula intracelular com o material envolvido ROTAS ENDOCITICAS uma vesícula intracelular com o material envolvido PINOCITOSE ingestão de fluidos e solutos por meio de vesículas pequenas (100 a 150 nm de diâmetro) ingestão de partículas grandes, como microorganismos e pedaços de células, via vesículas grandes (250 nm de diâmetro), denominados fagossomos FAGOCITOSE São compartimentos de forma variada, localizados entre o complexo de Golgi e a membrana plasmática, responsáveis pelo transporte e digestão de partículas e ENDOSSOMOS digestão de partículas e grandes moléculas que são captadas pela célula através de uma variedade de processos conhecidos como endocitose. LISSOSSOMOS Organela esférica, envolvida por uma membrana vesicular, presente no citoplasma, sobretudo em células vegetais. São as organelas responsáveis pelo armazenamento das enzimas diretamente relacionadas com o metabolismo do peróxido de hidrogênio, substância altamente tóxica para a célula. PEROXISSOMOS não possuem DNA próprio, nem ribossomos e suas proteínas são importados do citosol. Ácido graxo da semente é transformado em hidrato de carbono, num ciclo chamado de ciclo do gliaxilato. Nas células das folhas, o peroxissomo participa juntamente com a mitocôndria e o cloroplasto, de um processo chamado fotorrespiração. O peroxissomo GLIOXISSOMOS fotorrespiração. O peroxissomo catalisa a oxidação do glicolato (molécula de dois carbonos), que é produzido pelo cloroplasto, consome O2 e produz o peróxido de hidrogênio e glioxilato, este em seguida é convertido em glicina, utilizado no metabolismo da mitocôndria produzindo CO2. BIBLIOGRAFIA BÁSICA: ALBERTS, B.; JOHNSON. A.; LEWIS, J.; RAFF, M.; ROBERTS, K.; WALTER, P. Biologia Molecular da Célula. Editora: Artmed, Porto Alegre 2006. ( Cap.12) RETICULO ENDOPLASMÁTICO DE ROBERTIS, E. D. P.; DE ROBERTIS, J. E. M. F. Bases da biologia celular e molecular. Trad: supervisão Carneiro, J. Rio de Janeiro. Editora: Guanabara Koogan, 2001. (Cap. 7) JUNQUEIRA, L. C. U., CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. Editora Guanabara Koogan. Rio de Janeiro. 2005 (Cap. 10) RETICULO ENDOPLASMÁTICO Eritroblasto: Célula precursora do glóbulo vermelho, produzida na medula óssea, que não se observa no sangue circulante. Células que sintetizam proteína e segregam nas cisterna do RER e permanecem no citosol Eosinófilos: uma classe de células sanguíneas leucocitárias que fazem parte do sistema imunitário e é um dos 5 principais tipos de leucócitos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monócitos e linfócitos . Células que sintetizam proteína e segregam nas cisterna do RER. Passam pelo CG e depois são acumuladas em grânulos de secreção para posterior uso. RETICULO ENDOPLASMÁTICO Plasmócito:Estas células têm a capacidade de produzir anticorpos contra substâncias e organismos estranhos que casualmente invadam o tecido conjuntivo. Ricas em ergastoplasma . Células que sintetizam proteína e segregam nas cisterna do RER exportam essas proteínas diretamente, sem acumular em grânulos. Células acinosa do pâncreas: Secreta o suco pancreático que contém enzimas que intervêm na hidrolização de proteínas, gorduras, ácido nucléico e carboidratos; também secreta insulina e glucagon que verte na corrente sangüínea e é independente do suco pancreático que intervém na digestão Células que sintetizam proteína e segregam nas cisterna do RER acumulam em grânulos de secreção, que são exportadas por exocitose. RETICULO ENDOPLASMÁTICO METODOLOGIA DE ESTUDO Microscopia eletrônico de transmissão Microscopia de luz: corantes básicos Métodos enzimáticos ou Imunológicos: A enzima glicose-6-fosfatase permite identificar especificamente o RE Centrifugação diferencial: após a sedimentação de núcleo, mitocôndria, lisossomos e peroxissomos, pode-se obter frações correspondente aos microssomos (fragmentos das estruturas tubulares e cisterna do RE, que podem ser identificadas como vesículas de aproximadamente 100 nM de diâmetro Os ácinos pancreáticos pertencentes à porção exócrina do pâncreas caracterizam-se por apresentar células piramidais com ápice acidófilo (terço superior) contendo grânulos de zimogênio. A região apical das células acinares apresenta-se bem corada em rosa relativa aos grânulos secretores que contém proenzimas Microscopia de luz: corantes básicos METODOLOGIA DE ESTUDORETICULO ENDOPLASMÁTICO: grânulos secretores que contém proenzimas digestivas. A base das células é basófila devido a grande quantidade de retículo endoplasmático granular situado logo abaixo do núcleo (terço inferior). Técnica utilizada: HE Substâncias basófilas e acidófilas - HE: a principal técnica de coloração de tecidos para o estudo de Histologia básica é a técnica HE (Hematoxilina-Eosina). Através dessa técnica, podemos diferenciar porções basófilas e acidófilas do tecido estudado. A hematoxilina é basófila, ou seja, tem afinidade por substâncias básicas. Sendo assim, ela costuma corar os núcleo e o Retículo Endoplasmático Rugoso, locais onde há grande quantidade de proteínas (básicas pelo seu grupamento amina). A eosina é acidófila, tendo afinidade pelo citoplasma, fibras colágenas e outras substânicias ácidas das células. METODOLOGIA DE ESTUDORETICULO ENDOPLASMÁTICO: Microscopia eletrônico de transmissão RER REL METODOLOGIA DE ESTUDORETICULO ENDOPLASMÁTICO: Centrifugação diferencial
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