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MÉTODOS DE ESTUDO DA CÉLULA MICROSCOPIA MICROSCÓPIO DE LUZ icrometro = 1mm 1nanômetro (nm)= 1 mm 1.000 1.000.000 º (Angstron) = 0,1 nm MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASE • Luz muda sua velocidade → Índice de refração diferente • Células vivas CÉLULA EPITELIAL Fig 3.3 3.4 pag 31 Shirlei ÁCARO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO PRETO → ELETRODENSO BRANCO → ELETROLÚCIDO SAIS DE METAIS PESADOS─ELÉTRONS MICROSCÓPIO FLUORESCÊNCIA CÉLULAS DE RIM DE HANSTER EM CULTURA PREPARAÇÕES CITOLÓGICAS ESFREGAÇO ESPALHAMENTO SHIELEI FIG 43 pag 39 ESMAGAMENTO DECALQUE • CORTES HISTOLÓGICOS MICRÓTOMO FIXAÇÃO • FINALIDADES: ►AUTÓLISE; ►ENDURECIMENTO DOS FRAGMENTOS; ►PRESERVAÇÃO DAS ESTRUTURAS E COMPOSIÇÃO MOLECULAR MÉTODOS DE FIXAÇÃO: • MÉTODOS QUÍMICOS ► FIXADORES: - FORMALINA 10% - GLUTARALDEIDO - TETRÓXIDO DE ÓSMIO - ETANOL: ÁCIDO ACÉTICO • MÉTODOS FÍSICOS ►CRIOSTATO CORTE HISTOLÓGICO DE TESTÍCULO DE RATO FAST GREEN ph 8,1 FORMALINA ETANOL:ÁCIDO ACÉTICO • ESCANEAR TABELA 4.2 Pag 42 Shirlei COLORAÇÃO • FACILITAR VISUALIZAÇÃO DE ORGANELAS E INCLUSÕES • PRINCIPIO? • CARGAS ELÉTRICAS OPOSTAS • CORANTES ÁCIDOS(ANIÔNICOS -) • CORANTES BÁSICOS (CATIÔNICOS +) ACIDOFILIA CORANTES ANIÔNICO TEM AFINIDADE POR MOLÉCULAS CATIÔNICAS FAST GREEN ORANGE G XYLIDINE PONCEAU AMARELO DE NAFTOL CORANTES ANIÔNICOS CARTILAGEM HIALINA DE CÃO – XYLIDINE PONCEAU PH 2,5 BASOFILIA • CORANTES CATIÔNICOTEM AFINIDADE POR MOLÉCULAS ANIÔNICAS • FIG. 4.10 pag44 JUNQ AZUL DE ALCIAN AZUL DE TOLUIDINA CORANTES CATIÔNICOS CARTILAGEM HIALINA - AT PH 2.5 TÚBULOS DE MALPIGHI DE TRIATOMÍDEO - AT- PH 4.0 INTESTINO GROSSO HUMANO- AZUL DE ALCIAN PH 1.0 MUCOSA ESTOMACAL RATO • REAÇÕES CITOQUIMICAS REAÇÃO DE FEULGEN TÚBULOS DE MALPIGHI DE PERIPLANETA AMERICANA ÁCIDO PERIÓDICO-SCHIFF(PAS) VILOSIDADE INTESTINAL LIPÍDIOS – FÍGADO DE PORCO - SUDAN BLACK SUDAN BLACK ÍONS CÁLCIO - OSSO ENZIMAS: FOSFATASE ÁCIDA E ALCALINA TÚBULO DE MALPIGHI DE TRIATOMÍDEO GLÂNDULA SALIVAR DE DROSOFILA IMUNOCITOQUÍMICA CÉLULA DECIDUAL DE CAMUNDONGO RADIOAUTOGRAFIA • ESTUDO FUNCIONAL DOS PROCESSOS BIOLÓGICOS → RADIOATIVIDADE: • MOLÉCULAS RADIOATIVAS → À CÉLULA • EMULSÃO FOTOGRÁFICA E REVELAÇÃO CENTRIFUGAÇÃO CULTURA DE CÉLULAS
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