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Introdução à Biologia molecular Prof. Gustavo Ventura E-mail: gustavo.ventura@unesa.br A Biologia molecular A Biologia molecular busca compreender a vida em seu nível fundamental, estuda as macromoléculas e como suas interações controlam as atividades e características dos organismos vivos; O foco da disciplina está em explorar as informações genéticas e a função celular: o DNA, RNA, proteínas, a estrutura e função do gene, a sua natureza molecular, replicação,mutação e expressão; A Biologia molecular está em constante evolução, apresentando resultados fascinantes, principalmente para a investigação médica e desenvolvimento de fármacos; Ela envolve muitos campos de pesquisa e faz uso de teorias e técnicas de diferentes ciências como bioquímica e genética. 1866: Gregor Mendel desenvolveu a lei da herança (ervilhas). 1869: Friedrich Miescher descobre o ácido nucleico. 1939: Warren Weaver cria a expressão “biologia molecular” para designar o trabalho conjunto da biologia, física e química na busca do conhecimento das moléculas. 1944: Oswald Avery mostrou que as informações genéticas estavam guardadas no DNA. 1952: Rosalind Franklin e Maurice Wilkins obtêm a primeira imagem da molécula de DNA. 1953: James Watson e Francis Crick anunciam a estrutura de dupla hélice do DNA. Histórico da Biologia molecular 1966: Marshall Nirenberg e Har Khorana decifram o código genético humano. 1972: Stanley Cohen e Herbert Boyer desenvolvem a tecnologia de DNA recombinante. 1977: Frederick Sanger desenvolve o método de sequenciamento de DNA. 1982: Richard Palmiter e Ralph Brinster criaram o primeiro exemplar vivo de clonagem. 1983: Kary Mullis inventa a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). 1985: Alec Jeffreys desenvolve a técnica de impressão digital por DNA. 1996: Ian Wilmut clona um mamífero, a ovelha Dolly. 2001: Cientistas realizam o mapeamento de 99% do genoma humano. 2010: Craig Venter cria primeira forma de vida “sintética” em laboratório. Histórico da Biologia molecular Propôs a teoria da Herança Particulada (1865) Características são determinadas por unidade discretas que são herdadas intactas ao longo de gerações. Gregor Mendel Experimentos de Mendel Conceito de Gene É uma unidade funcional básica da hereditariedade, portadora de informação de uma geração para a seguinte. Pisum sativum • Sementes em ampla variedade de formas e cores. • Autofecudação ou polinização cruzada. Caracteristicas estudadas: Sementes maduras lisa ou rugosa, Interior das sementes amarelo ou verde, Pétalas púrpuras ou branca, Vagens maduras inflada ou murcha, Vagem não madura verde ou amarelo, Flores axiais ou terminais e Caules longo ou curto. Linhagem Pura É uma população que não apresenta variação da caracteristica que esta sendo estudada A descoberta do DNA ocorreu em 1869 e foi feita pelo bioquímico alemão Johann Friedrich Miescher (1844 – 1895). Buscava determinar os componentes químicos do núcleo celular e usava os glóbulos brancos contidos no pus para suas pesquisas. Analisando os núcleos, Miescher descobriu a presença de um composto de natureza ácida que era desconhecido até o momento. Esse composto era rico em fósforo e em nitrogênio e resistente à ação da pepsina (enzima proteolítica). Esse composto, que aparentemente era constituído de moléculas grandes, foi denominado, por Miescher, nucleína. A descoberta do DNA 1952 – Rosalind Franklin e Maurice Wilkins (Primeiras imagens da molécula de DNA por difração de raios-X) 1953 – James Watson e Francis Crick (Propuseram a estrutura do DNA em dupla hélice) Composição química dos ácidos nucléicos RNA DNA Composição química dos ácidos nucléicos RNADNA Composição química dos ácidos nucléicos Composição química dos ácidos nucléicos Composição química dos ácidos nucléicos Estrutura do DNA Estrutura do DNA Propriedades químicas do DNA Ligações 3’,5’-fosfodiéster linear de fita simples, RNA de fita dupla pode estar presente em genomas virais. Podem apresentar uma estrutura secundária e terciária que envolve o pareamento de bases intramoleculares, empilhamento de bases e pontes de hidrogênio entre diferentes parte da molécula. Estrutura do RNA Estruturas secundárias de RNA Estruturas terciárias de RNA Tipos de RNA e características estruturais Tipos de RNA e características estruturais: mRNA (mensageiro) Em geral, representam entre 3 a 5% do total de RNAs em uma célula de mamífero; Responsáveis pela transmissão da informação genética do DNA para a síntese de proteínas nos ribossomos; Normalmente apresentam apenas estrutura em fita simples, sem estruturas secundárias ou terciárias. Tipos de RNA e características estruturais: rRNA (ribossomal) Representam cerca de 80% dentre todos os tipos de RNA em uma célula; São grandes moléculas de RNA que se combinam com proteínas para formar os ribossomos, sendo responsáveis pela síntese de proteínas na célula a partir do mRNA; São encontrados normalmente em fita simples contendo regiões desestruturadas e outras em forma de grampos, podendo formar grandes complexos estruturais. Estrutura dos rRNAs na subunidade grande de um ribossomo bacteriano Tipos de RNA e características estruturais: rRNA (ribossomal) Em geral, constituem entre 10 a 20% do total de RNAs em uma célula; São pequenas moléculas de RNA, com cerca de 80 nucleotídeos, sendo responsáveis por carrear os aminoácidos codificados por códons específicos no momento da síntese de proteínas; Possuem sequências específicas para cada um dos tipos de aminoácidos, porém apresentam uma estrutura geral em forma de trevo, contendo algumas regiões em fita simples e outras em fita dupla. Tipos de RNA e características estruturais: tRNA (transportador) Referências bibliográficas Alberts, B., et al. Biologia Molecular da Célula (2017). Artmed, Porto Alegre. 6ª ed. 1427p. Nelson, D. L. & Cox, M. M. Princípios de Bioquímica de Lehninger (2014). Artmed, Porto Alegre. 6ª ed. 1304p.
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