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DISCIPLINA DE FARMACOGNOSIA FICHA DE ANÁLISE Extração e detecção de flavonoides Analistas: Elaine Kutzner e Thamiris Franco Data: 02/09/2017 Ensaio: Extração e detecção de flavonoides de Eugenia uniflora Cálculos e Resultados Após obter a amostra preparada, foram realizadas as reações com hidróxidos alcalinos, cloreto férrico e cloreto de alumínio, também foi observada a reação oxalo bórica, as quais foram comparadas com o extrato sem reagente (Conforme POP-FAA-03 - POP de extração e detecção de flavonoides para Eugenia uniflora). O extrato sem reagentes químicos ficou diferente de todas as reações. O resultado geral pode ser observado nas Figuras 1. Figura 1- Imagem geral das reações químicas observadas na extração e detecção de flavonoides de Eugenia uniflora, da esquerda para a direita: 1-reação com hidróxido alcalino, 2-cloreto férrico, 3-cloreto de alumínio, 4-extrato sem reagente. A reação oxalo bórica evidenciou uma cor amarela esverdeada fluorescente, conforme podemos observar na Figura 2. Figura 2 – Reação oxalo bórica observada no experimento de extração e detecção de flavonoides de Eugenia uniflora A amostra sem qualquer reagente químico ficou em um tom verde forte e não observamos granulações. Comparando essa amostra (sem reagente) com a reação de hidróxido de sódio, observamos que a coloração se alterou para um amarelado em um tom escuro e com granulações. A Figura 3 mostra o comparativo dessas amostras. Figura 3- Comparativo entre extrato de Eugenia uniflora com hidróxido de alumínio (esquerda) e sem reagente químico (direita). A reação com cloreto férrico apresentou uma cor verde acastanhada escura, e, assim como a amostra sem reagente químico, não observamos granulações. A Figura 4 mostra esse comparativo. Figura 4- Comparativo entre extrato de Eugenia uniflora com cloreto férrico (esquerda) e sem reagente químico (direita). A reação química que apresentou cor mais clara, foi a com cloreto de alumínio, visualizamos um tom de amarelo claro também sem granulações. Na Figura 5 o comparativo entre essas amostras. Figura 5- Comparativo entre extrato de Eugenia uniflora com cloreto de alumínio (esquerda) e sem reagente químico (direita). Discussão dos resultados A Eugenia uniflora pertencente da família Myrtaceae, apresenta entre os constituintes isolados da planta taninos, flavonoides, saponinas e óleos essenciais1. Sendo a quercetina o principal flavonoide encontrado na Eugenia uniflora2. Flavonóides são compostos polifenólicos, precursores de substâncias como aminoácidos alifáticos, terpenoides, ácidos graxos dentre outros. Esses estão subdividos principalmente em: flavonas, flavonóis, chalconas, auronas, flavanonas, flavanas, antocianidinas, leucoantocianidinas, proantocianidinas, isoflavonas e neoflavonóides3. A reação de extrato de Eugenia uniflora com hidróxido de sódio, por apresentar cor amarela confirma a presença de flavonoides4. Assim como cor verde escura (acastanhada) apresentada na reação com o cloreto férrico indica que podem ocorrer flavonóis e flavanonas na amostra5. Flavonoides podem complexar com metais pelos grupos hidroxilas6. Para a amostra observada, o principal flavonoide presente é o flavonol quercetina. Na Figura 6 está ilustrada a ligação de um íon metálico genérico com a quercetina. Figura 6- Estrutura do flavonol quercetina coordenado com íon metálico (M) Disponível em: VALKO et al, 2005. O alumínio é muito utilizado em testes colorimétricos. A ligação da quercetina com o íon Al3+ faz com que a amostra apresente a cor amarelada. Esse flavonol complexa com o íon e se torna estável7. A Figura 7 ilustra a complexação da quercetina pelo AlCl3. Figura 7 - Esquema da complexação de quercetina com cloreto de alumínio formando complexo estável flavonoide e Al3+ Disponível em: PEIXOTO et al, 2012. Para a reação oxalo-bórica observamos uma cor amarela-esverdeada fluorescente. Esse resultado é dado como positivo de forma pontual para flavonóis. Nessa reação ocorre a formação de derivados do ácido borínico, compostos obtidos do ácido bórico por substituição na sua molécula por dois radicais orgânicos5. A Figura 8 mostra o esquema que indica a presença de flavonol na amostra. Figura 8- Reação Oxalo-bórica como método para indicar a presença do flavonoide flavonol. Fonte: Adaptado de COSTA, 2000. Com esses testes colorimétricos observamos na amostra de Eugenia uniflora a presença de flavonoides, especialmente o mais abundante nessa espécie, o flavonol quercetina. Referências Bibliográficas 1- SOUZA, G. H. B. ; MELLO, J. C. P. ; LOPES, N. P. Farmacognosia: coletânea científica. Ouro Preto MG, Editora: UFOP, 2012 2- BRASIL. Farmacopeia Brasileira, volume 2 / Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Brasília: Anvisa, 2010. 546p, 1v/il. 3- DORNAS, W. C.; OLIVEIRA, T. T.; RODRIGUES-DAS-DORES, R. G.; SANTOS, A. F.; NAGEM, T. J. 2007. Flavonoides: potencial terapêutico no estresse oxidativo. Revista de Ciências Farmacêuticas Básica e Aplicada, 28: 241- 249. 4- VIANA, F. C. ; SANTANA, A. C. M. Identificação fitoquímica de flavonóides e taninos em folhas de pitanga (Eugenia uniflora L.) utilizadas tradicionalmente na região sul da Bahia. Revista: Interfacis Informação Farmacêutica, 2012 vol 1. Disponível em: https://interphacis.files.wordpress.com/2012/11/identificac3a7c3a3o-fitoquc3admica-de-flavonc3b3ides-e-taninos-em-folhas-de-pitanga-eugenia-uniflora-l-utilizadas-tradicionalmente-na-regic3a3o-sul-da-bahia.pdf Acesso em: 20 set. 2017. 5- COSTA, A. F. Farmacognosia. vol. III, 3ª ed., Lisboa: Fundação Calouste Gulbenkian, 2000. 6- VALKO, M. ; RHODES C.J. ; MONCOL, J. ; IZAKOVIC M. ; MAZUR, M. Free radicals, metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer. Chem Biol Interact, 2005. 160: 1-40 Disponível em: https://www.researchgate.net/7342033_fig10_Fig-12-Structure-of-a-flavonoid-quercetin-M-coordinated-metal-ion Acesso em: 21 Set 2017. 7- PEIXOTO SOBRINHO, T. ; CARDOSO, K. GOMES, T. ; AMORIM, E. L. C. Teor de flavonoides totais em produtos contendo pata-de-vaca (Bauhinia L.) comercializados em farmácias de Recife/PE.. Revista Brasileira de Plantas Medicinais 2012, 14. 586-591