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MICROBIOLOGIA IMUNOLOGIA Aracaju 2019 CRESCIMENTO BACTERIANO Profª. Msc. Elizabete Silva Filha Aracaju 2019 Crescimento bacteriano • O crescimento e divisão celulares necessitam de um ambiente propício, isso é com todos os constituintes químicos e físicos necessários para o seu metabolismo. • Essas necessidades específicas são dependem de informações genéticas para cada espécie bacteriana. • Algumas células são capazes de sintetizar muitos de seus metabólitos através de forma simples, enquanto outras espécies são mais exigentes, necessitando de nutrientes complexos para crescimento e reprodução. Crescimento bacteriano • A análise das estruturas bacterianas revela que sua arquitetura é formada por diferentes macromoléculas, em particular, proteínas e ácidos nucleicos. • Os precursores das macromoléculas podem ser retirados do meio ambiente ou ser sintetizados pelas bactérias a partir de compostos mais simples. • A alternativa escolhida vai depender da disponibilidade do composto no meio e da capacidade de síntese do microrganismo. Nutrição Microbiana • As células são constituídas de macromoléculas e água. • As macromoléculas são compostas por unidades menores, denominadas monômeros. • A nutrição microbiana pode ser definida como um mecanismo que fornece às células as ferramentas químicas necessárias à síntese dos diversos monômeros. • Essas ferramentas químicas correspondem aos nutrientes. Nutrição Microbiana • Organismos distintos requerem diferentes conjuntos de nutrientes, sendo geralmente necessários uma ou outra forma específica. • Os nutrientes podem ser divididos em duas classes: macronutrientes e micronutrientes. • Ambos são imprescindíveis, mas os primeiros são requeridos em grandes quantidades por serem os principais constituintes dos compostos orgânicos celulares e/ou serem utilizados como combustível. Fatores necessários para o crescimento microbiano •Temperatura •pH •Pressão osmótica •Carbono •Nitrogênio •Vitaminas e Minerais •Oxigênio •Fatores orgânicos FÍSICOS QUÍMICOS Temperatura •temperatura mínima de crescimento •temperatura ótima de crescimento •temperatura máxima de crescimento Temperatura As variações quanto ao requerimento térmico permite classificação das bactérias segundo a temperatura ótima para o seu crescimento: Temperatura Mesmo havendo grupos que necessitam de altas temperaturas para o seu crescimento, a maioria concentra-se no grupo de mesófilas, principalmente as de interesse médico, veterinário e agronômico. Preservação de alimentos Considerando uma panela rasa e um pote fundo com o mesmo volume, qual vai resfriar mais rápido? Esse fator pode ter alguma implicação no crescimento bacteriano? pH •Os valores de pH em torno da normalidade são os mais adequados para a absorção de alimentos para a grande maioria das bactérias. •Existem, no entanto, grupos adaptados a viver em ambientes ácidos e alcalinos. pH •Um tipo de bactéria quimioautotrófica, encontrada na água de drenagem das minas de carvão e que oxida enxofre para formar ácido sulfúrico, pode sobreviver em pH 1. •Acidófilas Pressão osmótica Pressão osmótica halófilos extremos (até 30% de sal) halófilos facultativos (até 15% de sal) Fatores químicos Carbono, enxofre, nitrogênio e fósforo Fatores químicos Carbono e nitrogênio • Carbono – tem como fonte os carboidratos, usados para síntese da maioria dos compostos celulares. • Nitrogênio – Proteínas, aminoácidos e ureia, usadas como matéria prima na síntese de ácidos nucleicos (DNA e RNA). • Minerais e Vitaminas- B12 , Ácido fólico, zinco, cobre e ferro. O oxigênio é sempre essencial a vida!!! O oxigênio é sempre essencial a vida!!! EXOENZIMAS • A seletividade da membrana impede que macromoléculas como proteínas, amido, celulose e lipídeos sejam transportadas para o interior da célula. • Para essas moléculas serem utilizadas pelos microrganismos, é necessário dividi-las, dando origem a compostos menores, aos quais as membranas são permeáveis. • A quebra das moléculas é promovida por enzimas hidrolíticas. EXOENZIMAS • Apresentam especificidade pelo substrato, atuando sobre proteínas ou amidos, ou determinados lipídeos, e constituem um fator de virulência. • Podem hidrolisar componentes estruturais dos tecidos, conferindo aos microrganismos a capacidade invasora e de permanência em outros organismos vivos. • Também podem contribuir para a sobrevivência dos microrganismos, uma vez que catalisam a hidrólise de substâncias que lhes são tóxicas ou mesmo letais. Fatores orgânicos de crescimento Algumas bactérias tem enzimas para própria produção de vitaminas Biofilmes Os microrganismos em um biofilme provavelmente sejam 1.000 vezes mais resistentes aos microbicidas. Especialistas do Centro para Controle e Prevenção de Doenças (CDC) estimam que 70% das infecções bacterianas humanas envolvam biofilmes. A maioria das infecções hospitalares estão relacionadas a presença de biofilmes nos cateteres médicos. MEIOS DE CULTURA MEIOS BÁSICOS MEIOS COMPLEXOS • Os meios básicos permitem o crescimento, porém não atendem a nenhuma condição nutricional específica de um determinado microrganismo. São exemplos de meio de cultura simples o caldo e o ágar simples. Meios básicos • Meios especiais ou complexos possuem condições específicas que atendem às exigências de determinado microrganismo, pois contêm substâncias que propiciam a produção de enzimas e secreções específicas de determinados microrganismos, e que impedem o crescimento de outros que não são de interesse de análise. Meios complexos Meios complexos Meios básicos Feitos de nutrientes como extratos de leveduras, de carnes ou de plantas, ou produtos de digestão destas ou de outras fontes. Se um meio apresenta forma liquida, ele é chamado de caldo nutriente. Quando ágar é adicionado, ele é chamado de ágar nutriente. Composição do ágar nutriente para crescimento de bactérias heterotróficas Ágar Extraído de algumas algas. Poucos microrganismos podem degradar o ágar, o que permite que ele permaneça sólido. Além disso, o ágar se liquefaz a cerca de 100°C (o ponto de ebulição da agua) e ao nível do mar ele permanece liquido ate a temperatura diminuir até cerca de 40°C. Para utilização no laboratório, o ágar e mantido em banho- maria a 50°C. O ágar por si não é um nutriente!!! Meios e métodos para o crescimento anaeróbico • Meios redutores : utilizados para diminuir a concentração de oxigênio. Meios e métodos para o crescimento anaeróbico • Meios redutores : utilizados para diminuir a concentração de oxigênio. Técnicas especiais de cultura • Foto do micobacterium leprae • Foto do tatu Mycobacterium leprae Meios seletivos • são elaborados para impedir o crescimento de bactérias indesejadas e favorecer o crescimento dos micro-organismos de interesse. Ágar sulfito é um meio utilizado para isolar a bactéria gram-negativa Salmonella typhi, a partir das fezes. Bactérias gram-positivas não se desenvolvem nesse meio. Meios diferenciais • facilitam a diferenciação das colônias de um micro-organismo desejado em relação a outras colônias crescendo na mesma placa.Meios de enriquecimento •Como as bactérias em pequeno número podem ser perdidas, em particular se outras bactérias estiverem presentes em maior numero, algumas vezes e necessário utilizar uma cultura de enriquecimento. •Ex.: Crescimento em solução com fenol. Preservação de culturas bacterianas • Congelamento em baixas temperaturas. • Liofilização (desidratação de substância). Crescimento bacteriano (fissão binária) As bactérias se reproduzem por fissão binária, processo no qual uma célula parental se divide para formar duas células-filhas (crescimento exponencial ou crescimento logarítmico). Crescimento bacteriano (fissão binária) Crescimento Exponencial •O crescimento exponencial e o curto tempo necessário para a duplicação de certos organismos resultam na rápida produção de grandes números de bactérias. •O tempo de duplicação varia não apenas entre as espécies, mas também com a quantidade de nutrientes, a temperatura, o pH e outros fatores ambientais. Crescimento Exponencial Crescimento bacteriano (brotamento) Tempo de geração • É o tempo necessário para uma célula se dividir (e sua população duplicar). • A maioria das bactérias tem um tempo de geração de 1 a 3 horas. Fase lag (fase de retardo): Ocorre atividade metabólica, mas as células não se dividem. Pode durar de poucos minutos a muitas horas. Fases do crescimento Fase log (logarítmica): Ocorre uma rápida divisão celular. Fases do crescimento Fase estacionária: Ocorre quando há carência de nutrientes ou a presença de produtos tóxicos provoca a redução do crescimento até que o número de células novas produzidas seja equivalente ao número de células que morrem, resultando numa situação de equilíbrio na população. Fases do crescimento Fase final, de morte ou de declínio: Marcada por um declínio no número de células viáveis. Fases do crescimento Fases do crescimento Metabolismo Bacteriano • Uma vez garantidos pelo ambiente os nutrientes e as condições adequadas, as bactérias vão absorver e transformar para que cumpram suas funções básicas (ex. o suprimento de energia e de matéria prima). • Como matéria prima, os nutrientes vão ser transformados em estruturas celulares ou em moléculas acessórias à sua síntese e funcionamento. Fermentação •A fermentação é um processo de obtenção de energia utilizado por algumas bactérias e outros organismos. •Ele ocorre com a quebra da glicose (ou outros substratos como o amido) em piruvato, que depois é transformado em algum outro produto, como o álcool etílico e lactato, definindo fermentação alcoólica e láctica. Fermentação •Este tipo de obtenção de energia não necessita do oxigênio como aceptor final de elétrons, por isso é chamado de respiração anaeróbica. •A fermentação é utilizada na produção de massas, iogurtes, coalhadas, queijos e outros produtos. PUTREFAÇÃO •Decomposição de compostos nitrogenados (proteínas). •É um tipo de fermentação que produz produtos finais de odor desagradável. Respiração •É o processo pelo qual os seres vivos conseguem energia para realizar suas atividades, oxidando compostos orgânicos – principalmente a glicose. •A maioria dos seres vivos utiliza o gás oxigênio para extrair energia da glicose. •O processo é chamado respiração aeróbia. Respiração •Respiração anaeróbica: o oxigênio é substituído por outro receptor inorgânico de elétrons. •As bactérias aeróbias dependem de oxigênio para conseguir energia e não sobrevivem sem esse gás. •As anaeróbias facultativas podem viver com ou sem oxigênio. se houver oxigênio no ambiente, podem realizar respiração aeróbia; caso contrário, sobrevivem à custa de processos anaeróbios. Respiração • A quantidade de energia obtida pela bactéria na respiração anaeróbia (fermentação) é menor que a da respiração aeróbia. • As bactérias anaeróbias obrigatórias ou estritas não possuem enzimas necessárias ao aproveitamento do oxigênio e, por isso, morrem a partir de determinada concentração de oxigênio no ambiente. • Isto acontece porque, se o oxigênio não for utilizado, ficando livre na célula, ele poderá danificar moléculas importantes, como o DNA e as enzimas (radicais livres). Nutrição • A maioria das bactérias é heterotrófica (conseguem o seu alimento a partir de seres vivos) por absorção, retirando moléculas orgânicas já digeridas do ambiente ou de seres vivos que parasitam. • As outras são autotróficas por fotossíntese (usam a energia da luz para sintetizar compostos orgânicos) ou por quimiossíntese (usam energia química para produzir compostos orgânicos). Revisão 1. Descreva a fissão binária. 2. Por congelamento em baixa temperatura, as bactérias podem ser armazenadas sem danos durante longo períodos. Por que a refrigeração e o congelamento preservam as alimentos? 3. Descreva através de um gráfico o ciclo de crescimento bacteriano. OBRIGADO Silva.elizaf@gmail.com