AULA 07 BASES DIAGNÓSTICAS

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Prof. Msc. Daiane Siqueira de Luccas
EXAMES IMUNODIAGNÓSTICOS
EXAMES IMUNODIAGNÓSTIOS
Também chamados de sorodiagnóstico;
Pesquisa reações antígeno-anticorpo para diagnóstico de doença: infecciosa, Distúrbios autoimunes,Alergias imunes.
Antígenos são substâncias que estimulam e subsequentemente reagem com os produtos de uma resposta imune.
Podem ser enzimas, toxinas, micorganismos tumores ou fatores autoimunes.
Anticorpos são proteínas produzidas pelo sistema imune do corpo em resposta a um ou mais antígenos.
A resposta antígeno-anticorpo é a defesa natural do corpo contra microrganismos invasores.
EXAMES IMUNODIAGNÓSTIOS
DISTÚRBIOS AUTOIMUNES: são produzidos por autoanticorpos, isto é, anticorpos contra o próprio organismo. Ex. lúpus.
IMUNODEFICIÊNCIA: há ausência de um ou mais componentes básicos do sistema imune, o que inclui linfócitos B, linfócitos T. Ex. AIDS.
REAÇÕES DE HIPERSENSIBILIDADE: são definidas como aumento anormal das respostas imunes a alguns alérgenos (ex. picada de abelha e importante para detectar e evitar rejeição imune no transplante)
EXAMES IMUNODIAGNÓSTIOS
COLETA DE SORO PARA TESTES IMUNOLÓGICOS:
Anticorpos específicos podem ser detectados no soro e em outros líquidos corporais (líquido cerebrospinal p. ex.)
Fatores que afetam os resultados do teste:
História de infecção prévia pelo mesmo microrganismo
Vacinação prévia
Presença de outras doenças graves (p. ex. tratamento de câncer)
EXAMES IMUNODIAGNÓSTIOS
Os testes sorológico para imunologia microbiana avalia a presença de anticorpos provocados por antígenos de bactérias, vírus, fungos e parasitas.
A melhor forma de determinar a etiologia da doença infecciosa é por meio de isolamento e confirmação do patógeno envolvido.
Os métodos sorológicos podem ajudar ou confirmar a análise microbiológica:
quando o teste é realizado na doença avançada, 
o tratamento antimicrobiano inibe o crescimento dos microrganismos, 
ou métodos de cultura não podem determinar o agente etiológico.
TESTES BACTERIANOS 
Testes para detecção de sífilis
SÍFILIS: doença sexualmente transmissível causada pelo Treponema pallidum;
Os anticorpos contra sífilis começam a aparecer no sangue 4 a 6 semanas depois da infecção.
Testes não treponêmicos: reagina plasmática rápida (RPR) e Venereal Disease Reserach Laboratory (VDRL). Detectam anticorpos contra antígeno lipídicos derivados de membrana celular do treponema. 
Testes treponêmicos: detectam anticorpos contra T. pallidum – teste de aglutinação passiva de partículas de Trepenoma (TP-PA) e teste de absorção de anticorpo treponêmico fluorescente (FTA-ABS). Confirmam o diagnóstico de sífilis quando se obtém um resultado positivo do teste não treponêmico.
TESTES BACTERIANOS 
Testes para detecção de sífilis
Valor de referência: não reativo, negativo para sífilis.
Um teste sorológico negativo pode indicar uma das seguintes circunstâncias:
O paciente não tem sífilis.
A infecção é muito recente para que sejam produzidos anticorpos. Os testes devem ser repetidos em intervalos de 1 semana, 1 mês e 3 meses para confirmar a presença ou ausência.
A sífilis está em um fase latente ou inativa.
TESTES VIRAIS
Testes para hepatites
A hepatite pode ser causada por vírus e vários outros agentes, inclusive drogas.
95% dos casos de hepatite são causados por cinco tipos principais de vírus: hepatites A,B,C,D e E.
Dificuldade diagnosticar o vírus específico, porque os sintomas (emagrecimento, febre, perda de apetite, fezes claras) causados por todos os tipos de vírus são semelhantes.
Os testes sorológicos para marcadores do vírus da hepatite facilitam a definição do tipo específico.
TESTES VIRAIS
Testes para hepatites
HEPATITE A
Sorologicamente a presença do anticorpo IgM contra HAV e do anticorpo total contra HAV identifica a doença e determina exposição prévia ao HAV ou recuperação.
TESTES VIRAIS
Testes para hepatites
HEPATITE B
Tem um núcleo central que contém o antígeno do núcleo e um envoltório que contém um antígeno de superfície.
As provas para monitorização da hepatite em testes incluem 4 marcadores:
HBsAg – antígeno do núcleo.
HBeAg – antígeno do envoltório.
Anti-Hbe: anticorpo contra antígeno de envoltório da hepatite B.
antiHBs: anticorpo contra antígeno de superfície da hepatite B.
TESTES VIRAIS
Testes para hepatites
TESTES VIRAIS
Testes para hepatites
TESTES VIRAIS
Testes para hepatites
Continua...
TESTES VIRAIS
Detecção de anticorpos antivírus da Imunodeficiência Humana (HIV) / AIDS
Os testes para determinar a presença de anticorpos contra o HIV incluem ELISA, Western blot , imunofluorescência indireta e Rápido
Teste Elisa
É o mais realizado para diagnosticar a doença. 
Buscam por anticorpos contra o HIV no sangue do paciente. 
Se uma amostra não apresentar nenhum anticorpo, o resultado negativo é fornecido para o paciente. 
Caso seja detectado algum anticorpo anti-HIV no sangue, é necessária a realização de outro teste adicional, o teste confirmatório (p. ex. o Western Blot e o Teste de Imunofluorescência)
TESTES VIRAIS
Detecção de anticorpos antivírus da Imunodeficiência Humana (HIV) / AIDS
TESTE ELISA
Testes confirmatórios
Porque, algumas vezes, os exames podem dar resultados falso-positivos em consequência de algumas doenças.
Nesse caso, faz-se uma confirmação com a mesma amostra e o resultado definitivo é fornecido ao paciente. Se o resultado for positivo, o paciente será informado e chamado para mais um teste com uma amostra diferente. Esse é apenas um procedimento padrão para que o mesmo não tenha nenhuma dúvida da sua sorologia.
TESTES VIRAIS
Detecção de anticorpos antivírus da Imunodeficiência Humana (HIV) / AIDS
Teste Elisa
Independentemente do resultado do exame, + ou - , o paciente é encaminhado ao aconselhamento pós-teste.
O Elisa é feito com uma placa de plástico que contém proteínas do HIV absorvidas ou fixadas nas cavidades em que cada amostra de soro ou plasma (que são frações do sangue) será adicionada. Após uma sequência de etapas, em que são adicionados diferentes tipos de reagentes, o resultado é fornecido por meio de leitura óptica, em um equipamento denominado leitora de Elisa.
TESTES VIRAIS
Detecção de anticorpos antivírus da Imunodeficiência Humana (HIV) / AIDS
Teste Western Blot
De custo elevado, o western blot é confirmatório, ou seja, indicado em casos de resultado positivo no teste Elisa. Nele, os profissionais do laboratório procuram fragmentos do HIV.
Para a realização do Western Blot, utiliza-se uma tira de nitrocelulose em que serão fixadas proteínas do HIV. O plasma do paciente é adicionado, ficando em contato com a tira de nitrocelulose. Depois da adição de vários tipos de reagentes, o resultado é fornecido por meio de leitura visual, pelo profissional do laboratório.
TESTES VIRAIS
Detecção de anticorpos antivírus da Imunodeficiência Humana (HIV) / AIDS
Teste de imunofluorescência indireta 
Também confirmatório, o teste de imunofluorescência indireta para o HIV permite detectar os anticorpos anti-HIV. 
Nele, o soro ou plasma do paciente é adicionado a uma lâmina de vidro que contém células infectadas com o HIV, fixadas nas cavidades. 
Após uma sequencia de etapas, em que são adicionados diferentes tipos de reagentes, o resultado é fornecido por meio da leitura em um microscópio de imunofluorescência.
TESTES VIRAIS
Detecção de anticorpos antivírus da Imunodeficiência Humana (HIV) / AIDS
Teste rápido
Possui esse nome, pois permitem a detecção de anticorpos anti-HIV na amostra de sangue do paciente em até 30 minutos. Por isso, pode ser realizado no momento da consulta. 
Os testes rápidos permitem que o paciente, no mesmo momento  que faz  o teste, tenha conhecimento do resultado e receba o aconselhamento pré e pós-teste. 
O teste rápido é preferencialmente adotado em populações que moram em locais de difícil acesso, em gestantes que não fizeram o acompanhamento no pré-natal e em situações de acidentes no trabalho.TESTES DE ALERGIA
Anticorpo IgE, alérgeno único
Um grande número de substâncias tem potencial alérgico. As dosagens de anticorpos IgE são úteis para diagnosticar doenças alérgicas e definir a especificidade do alérgeno nas reações de hipersensibilidade imediata.
Exemplos de doenças alérgicas incluem asma, rinite alérgica, dermatite. 
O imunoensaio enzimático fluorescente (FEIA) avalia o aumento e a quantidade de anticorpos IgE alérgeno-específicos e diagnostica a alergia a uma alérgeno específico. (fungos, alimentos)
TESTES DE ALERGIA
Anticorpo IgE, alérgeno único
Valores de Referência
Com base no FEIA, a fluorescência é proporcional à quantidade de IgE específica presente na amostra do paciente.
Adulto <100UI/mL
Oito alimentos (ovos, trigo, leite, soja, peixe, frutos do mar, amendoim, frutos oleaginosas – castanha-de caju ou nozes) são responsáveis por cerca de 90% das alergias alimentares. 
Os alimentos são listados a seguir com o risco associado de 95% de alergia clínica:
Ovo
Leite
Amendoim
Peixe
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
Esses testes são realizados para:
Selecionar componentes do sangue que terão sobrevida aceitável quando transfundidos;
Para evitar possíveis reações a transplantes e transfusões; 
Para identificar possíveis problemas, como doença hemolítica do RN e a necessidade de transfusão intrauterina; 
O teste imunoematológico identifica antígenos altamente reativos em células do sangue e seus anticorpos que podem estar presentes no soro.
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
TESTE DO SANGUE DOADO E PROCESSAMENTO DO SANGUE
Testes para sangue doado:
Grupos ABO
Fator Rh
Pesquisa de anticorpos
Antígeno de superfície da hepatite B (HBsAg)
Vírus da hepatite C(anti-HCV)
Sífilis (VDRL)
HIV
Doença de Chagas
Teste para os receptores
Grupo ABO 
Fator Rh
Pesquisa de anticorpos
Prova cruzada para determinar a compatibilidade entre as células do doador e o soro do receptor.
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
GRUPOS SANGUÍNEOS (grupos ABO)
O sangue humano é classificado de acordo com a presença ou a ausência de antígenos específicos do grupo sanguíneo ABO.
Esses antígenos, encontrados na superfície das hemácias, podem induzir a produção de anticorpos pelo organismo.
Foram identificados mais de 300 antígenos distintos. 
A compatibilidade do grupo ABO é a base de todos os outros testes pré-transfusão.
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
Em condições normais o soro de uma pessoa não contém o anticorpo especificamente capaz de destruir seu antígeno.
Por exemplo: uma pessoa com antígeno A não tem anticorpos anti-A no soro; entretanto pode ter anticorpos anti-B.
Portanto, é necessário teste de antígeno e anticorpo para confirmar a classificação ABO.
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
DESIGNAÇÃODO Grupo
Antígenopresente na hemácia
Anticorpos presentes no soro
O (doador universal de hemácias)
Nenhum
Anti-A,anti-B
A
A
Anti-B
B
B
Anti-A
AB (receptoruniversal de hemácias)
AB
nenhum
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
DETERMINAÇÃO DO FATOR Rh
O sangue humano é classificado como Rh positivo ou Rh negativo. 
Isso está relacionado com a presença ou a ausência do antígeno D na membrana das hemácias.
A determinação do fator Rh deve ser realizada pelas seguintes razões:
A administração de sangue Rh-positivo a uma pessoa Rh-negativa pode sensibilizar a pessoa para formar antiD(Rh)
O sangue Rh-positivo administrado a um receptor que tem soro anti-D(Rh) poderia ser fatal.
TESTES IMUNOEMATOLÓGICOS 
Doença hemolítica do Recém-nascido pode causar reações que variam de anemia (leve ou intensa) a morte fatal intrauterina. 
Gestantes Rh negativas cujos parceiros são Rh-positivos podem ter fetos Rh-positivos;
Células fatais podem atravessar a placenta materna e causar a produção de anticorpos no sangue materno.
O anticorpo materno, por sua vez, pode atravessar a placenta, entrar na circulação fetal e provocar a destruição das células sanguíneas fetais. 
O distúrbio pode ser evitado se uma gestante Rh-negativa receber uma dose de RhIG antes do parto, com 28 semanas de gestação, e uma injeção pós-parto de Rh IG logo após o nascimento de um RN Rh-positivo.
REFERÊNCIAS
BRASIL. Ministério da Saúde. Exames diagnósticos para AIDS. Disponível em: http://www.aids.gov.br/pagina/tipos-de-exames. Acesso em 17/10/2015.
FISCHBACH, F.T. Manual de enfermagem: exames laboratoriais e diagnósticos. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.