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Técnicas de Obtenção de Espermatozóides 
●MESA – microsurgical epidydimal sperm 
aspiration – ou aspiração microcirúrgica de 
espermatozóides do epidídimo (exposto); → 
Mais chances de colher SPTZ. 
●PESA – percutaneous epidydimal sperm 
aspiration – ou aspiração percutânea de 
espermatozóides do epidídimo (agulha 
entrando); 
↳ aspiração do epidídimo - Técnica é 
indicada para: homens com vasectomia e 
homens com azoospermia por obstrução dos 
ductos deferentes. Mesa e Pesa são as 
técnicas mais indicadas. 
 
●TESA – testicular sperm aspiration – ou 
aspiração percutânea de espermatozóides do 
testículo; 
●TESE – testicular sperm extraction – ou 
extração de espermatozóides do testículo. 
↳ Todas essas técnicas permitem a obtenção 
de espermatozóides para fertilizar os óvulos 
através da técnica de injeção 
intracitoplasmática de espermatozóide (ICSI). 
●MicroTESE - Microdissection Testicular 
Sperm Extraction – ou Extração de 
Espermatozóides por microdissecação 
testicular. 
 
 
 
Técnicas de Fertilização 
●Coito Programado → Curto prazo → 
Mulher faz um tratamento hormonal com 
hormônios para estimular o desenvolvimento 
do(s) folículo(s), quando ele atinge o tamanho 
ideal, a mulher utiliza outro hormônio para 
induzir a liberação do óvulo (ovulação). → 
Após a indução da ovulação, o casal deverá 
manter relações sexuais próximas ao 
momento da ovulação, isto é, 36 horas após 
a injeção. 
●FIV → Médio prazo → Origem fora do 
corpo da futura mãe. → Uso de drogas que 
estimulem a produção de mais de um óvulo 
por ciclo. → Óvulos são aspirados por uma 
agulha e colocados em uma substância cheia 
de nutrientes, para mantê-los vivos. → Os 
espermatozoides são colocados no mesmo 
recipiente, para que haja a fecundação. → 
Após sua fertilização, o óvulo é mantido em 
uma estufa, onde começa a ocorrer a divisão 
celular. → Depois de se formarem 8 ou 16 
células, o embrião é colocado no útero da 
mulher. 
●ICSI → Longo prazo (para quem tenha há 
muitos anos) →A injeção intracitoplasmática 
de espermatozoides (ICSI). → Consiste em 
introduzir um único espermatozoide 
previamente selecionado dentro do óvulo e, 
dessa forma, realizar a fecundação. → Cortar 
o caminho percorrido pelos espermatozoides. 
→ Sêmen do parceiro é coletado e 
introduzido diretamente no óvulo 
→ Indicações ICSI: infertilidade de fator 
masculino grave ou quando há uma amostra 
limitada de SPTZ → oligospermia e 
vasectomia, doença infecciosa, infertilidade 
causa imunitária → amostras criopreservadas 
→ após vários ciclos de FIV, baixo número de 
óvulos, ejaculação retrógrada. 
→ Diferenças: Na fertilização, no 
laboratório, o espermatozoide deve penetrar 
sozinho no óvulo para ser fecundado. → ICSI, 
o espermatozoide é injetado no óvulo 
maduro, dessa forma, melhorando os índices 
de fertilização → etapas de tratamento são 
as mesmas → A paciente recebe estimulação 
do ovário, Coleta de óvulos e 
espermatozoides, Transferência do embrião 
no útero. 
 
Cultivo In Vitro 
● Desenvolvimento dos ovócitos fecundados 
até o estágio de desenvolvimento do 
blastocisto. →Durante esse período, é que 
ocorre o processo de clivagem e posterior 
compactação dos blastômeros no estágio de 
mórula (até 5° dia), início da diferenciação 
embrionária, com a formação do blastocele 
(7° dia) → troca dos meios (finalidade nutrir 
os embriões), realizada 18 h depois da 
fecundação, quando os ovócitos são retirados 
do meio de fecundação e colocados em um 
meio de desenvolvimento (SOF) → No 
segundo dia e no quinto dia, é realizada a troca 
de metade da gota com meio SOF. 
→ Limite legal de 14 dias para o cultivo de 
embriões humanos in vitro 
→ Até o 13° dia para fazer a implantação, após 
esse prazo os embriões devem ser 
descartados. 
→ SNC à 22/23 dia 
→ 5° e 7° dia, momento ideal para fazer a 
implantação, pois após ocorrer a fertilização, 
irá ocorrer a formação de blastocistos → 
mórula (até 5° dia) → 7° formação dos 
blastocistos, dia seleção e avaliação final dos 
embriões para a transferência embrionária a 
fresco ou para o congelamento 
●Passo-a-Passo 
→ Dia 0 → Fecundação → FIV ou ICSI 
→ Dia 1 → A fecundação se comprova a 
partir da observação do núcleo masculino e 
do núcleo feminino se fundindo. → Este 
estágio é conhecido como zigoto. 
→ Dia 2 → Zigoto, que é uma célula única, 
irá começar a dividir-se para formar o 
embrião no processo chamado de primeira 
clivagem. → Divide-se uma ou duas vezes. 
→ Dia 3 → A segunda clivagem acontece no 
dia 3 do embrião. → Momento em que se 
espera observar entre 7 e 8 células. → 
Avaliar: Quantidade de células, percentual de 
fragmentação, qualidade do citoplasma, entre 
outros fatores que indicam a qualidade do 
embrião. 
→ Dia 4 → Assim como em todos os dias, a 
divisão de células do embrião continua, porém, 
não apresentam mudanças significativas para 
a observação, o embrião também não é 
retirado da incubadora 
→ Dia 5 → É um momento muito 
importante na vida do embrião, pois ele atinge 
o estágio de blastocisto, onde dois grupos de 
células se dividem para que um deles dê 
origem à placenta (trofoectodermo) e outro 
dê origem ao bebê (massa celular interna). 
Ao retirar da incubadora, deve-se observar a 
massa celular interna e as células do 
trofectodermo, dependendo do 
desenvolvimento do embrião poderá repetir-
se no dia 6 e excepcionalmente no dia 7. 
Em caso de diagnóstico pré-implantacional, 
serão retiradas algumas células do 
trofectodermo, que serão enviadas para 
análise. 
 
Punção Folicular 
●Os ovócitos são coletados no interior dos 
folículos ovarianos, 34-36 horas após a 
administração hormonal, em pacientes 
submetidas à estimulação ovariana. 
●Ovócito normal: 
→ Forma esférica 
→ 1° Corpúsculo Polar intacto 
→ Espaço Perivitelínico pequeno 
→ Citoplasma (Ooplasma) transparente, 
homogêneo e sem inclusões 
→ zona pelúcida clara (camada de célula 
externa do óvulo) e o oolema (parte interna 
do óvulo)
 
● Características morfológicas: 
→ Ideal: forma esférica; citoplasma 
transparente moderadamente granular e livre 
de inclusões; pequeno espaço perivitelino 
(EPV) livre de granulações com um único 
Corpúsculo Polar redondo e intacto; zona 
pelúcida clara. 
 ●Podem apresentar dimorfismos: 
→ Intra/extracitoplasmáticos: 
• Grânulos 
• Inclusões 
• Vacúolos 
• Ovócito disforme 
 
●Dismorfismos 
 
 
 
 
 
 
 
 
(A) Grânulos difusos, 
(B) Grânulos citoplasmáticos 
localizados, 
(C) Aglomerados de R.E., 
(D) vacúolos, 
(E) zona pelúcida amorfa, 
 
(F) espaço perivitelino 
aumentado. 
 
 
●Vacúolos, citoplasma escuro e 
fragmentos – diminui qualidade 
embrionária e gravidez 
 
 
 
 
 
 
Simulação 
●Você irá explicar quantos óvulos serão 
retirados e testados na técnica de ICSI, e os 
espermatozóides pela técnica de MESA Além 
disso, irá explicar como será feita a fertilização 
dos óvulos, através da dessa técnica e que 
após a fertilização os embriões se 
desenvolverão em cultura até o dia 5° e 7° 
da transferência embrionária, podendo ficar 
armazenado até o dia 13° antes da introdução 
 
●No laudo diz que foram recuperados 12 
óvulos, o que é um número excelente de 
gametas. Se todos os óvulos forem 
fertilizados, há a chance de, ao final do 
desenvolvimento embrionário, restarem cerca 
de 12 embriões para transferência pela técnica 
de ICSI. Como a paciente possui 40 anos, a 
chance de gravidez dela é baixa e 
normalmente são transferidos de 2 embriões, 
os embriões excedentes devem ser 
preservados até 3 anos ou descartados.(fazer 
o que?) 
 
→ Por lei só podem ser transferidos 2 
embriões → Podendo ser preservados por 
até 3 anos, durante esse prazo podem ser 
reimplantados mais embriões ou descartar. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
●Avaliação da condição genética do embrião 
→ Os testes genéticos pré-implantacionais 
são técnicas utilizadas para avaliar a condição 
genética do embrião obtido por FIV ou ICSI. 
→PGD (Diagnóstico Genético Pré-
Implantacional) 
→PGS (Screening Genético Pré-
Implantacional) 
→ evitar doenças genéticas e cromossômicas 
→ evitar abortos de causa genética 
 
 
 
●Criopreservação 
→Variações no estágio celular do embrião, 
tipo de crioprotetor e velocidade de 
resfriamento. 
→Objetivo final: Prevenção da formação de 
cristais de gelo dentro das células, condição 
incompatível com os sistemas biológicos. 
→Definição: Redução ou mesmo parada de 
todos os fenômenos biológicos (movimentos 
moleculares, reações químicas e atividades 
enzimáticas), as temperaturas inferiores a - 150 
°C. 
 
 
 
 
 
 
 
Gametogênese Feminina

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