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“A IMPORTÂNCIA DA QUALIDADE DA ÁGUA REAGENTE NO LABORATÓRIO CLÍNICO” LABORATÓRIO CLÍNICO, BIOSSEGURANÇA E CONTROLE DE QUALIDADE CAROLINE H. PITON INTRODUÇÃO • A ÁGUA É O REAGENTE MAIS UTILIZADO NA PRÁTICA LABORATORIAL; • NO LABORATÓRIO, A ÁGUA É UTILIZADA PARA DIVERSAS APLICAÇÕES COMO: RECONSTITUIÇÃO DE REAGENTES, DILUIÇÕES, SOLUÇÕES BRANCAS OU PADRÕES, TAMPÕES, CONFECÇÃO DE MEIOS DE CULTURA, LAVAGEM, SANITIZAÇÃO E RECUPERAÇÃO DE UTENSÍLIOS; • A ÁGUA PRECISA SER OTIMIZADA PARA REDUZIR ERROS E A QUALIDADE DOS EXAMES; INTRODUÇÃO O ABASTECIMENTO URBANO QUE ALIMENTAM OS LABORATÓRIOS CONTEM: • ÍONS INORGÂNICOS PODEM AFETAR REAÇÕES BIOQUÍMICAS • MOLÉULAS ORGÂNICAS • PARTÍCULAS • COLOIDES • GASES • BACTÉRIAS INTERFERE NAS ANÁLISES, SEJA DIRETAMENTE OU PELA AÇÃO DE SEUS PRODUTOS (NUCLEASES, FOSFATASE ALCALINA) INTRODUÇÃO • ENTIDADES INTERNACIONAIS COMO TÊM ESTABELECIDO PARÂMETROS PARA A ÁGUA REAGENTE; • A RDC 302:2005 PRECONIZA QUE O LABORATÓRIO CLÍNICO DEVE DEFINIR O GRAU DE: • PUREZA DA ÁGUA REAGENTE UTILIZADA EM SUAS ANÁLISES • FORMA DE OBTENÇÃO • CONTROLE DE QUALIDADE INTRODUÇÃO • OS PADRÕES ESTABELECIDOS PELO CLSI SÃO OS MAIS EMPREGADOS NO BRASIL, SENDO CLASSIFICADAS EM: CLINICAL LABORATORY REAGENT WATER (CLRW) E SPECIAL REAGENT WATER (SRW) • EM RELAÇÃO ÀS BACTÉRIAS DEVEM SER INFERIORES A 10 UFC/ML PARA AMBAS INTRODUÇÃO CLRW • RECONSTITUIÇÃO DE REAGENTES • LAVAGEM DE CUBETAS • ESSA ÁGUA É ISENTA DE MATERIAIS ORGÂNICOS E INORGÂNICOS, PARTÍCULAS E COLOIDES, E BACTÉRIAS E SEUS SUBPRODUTOS SRW • LIVRE DE NUCLEASES (DNASES E RNASES) • RECOMENDADA EM TÉCNICAS MOLECULARES Vale ressaltar que a água não deve ser estocada; deve ser usada no momento que é produzida devido à contaminação por gases do ambiente e crescimento microbiano TECNOLOGIAS DE PURIFICAÇÃO • FILTRAÇÃO: PROCESSO DE SEPARAÇÃO DE PARTÍCULAS CONTAMINANTES PRESENTES NA ÁGUA POR MEIO DA UTILIZAÇÃO DE CARVÃO ATIVADO OU CELULOSE; • DESTILAÇÃO: SEPARAR MISTURAS HOMOGÊNEAS • DESINFECÇÃO POR SISTEMA ULTRAVIOLETA (UV): EM CONTATO COM A LUZ OS MICRORGANISMOS SÃO INATIVADOS, RESULTANDO NUM DANO FOTOQUÍMICO AO ÁCIDO NUCLEICO; • DEIONIZAÇÃO: UTILIZADA PARA REMOÇÃO DE SUBSTÂNCIAS INORGÂNICAS; • ELETRODEIONIZAÇÃO: UM PROCESSO CONTÍNUO QUE A ÁGUA PASSA EM CANAIS; • MICROFILTRAÇÃO E ULTRAFILTRAÇÃO: MEMBRANA QUE NÃO DEIXA QUAISQUER PARTÍCULAS PASSAREM; • OSMOSE REVERSA: PASSAGEM DA ÁGUA ATRAVÉS DE UMA MEMBRANA SEMIPERMEÁVEL; TECNOLOGIAS DE PURIFICAÇÃO DISCUSSÃO • AS ANÁLISES SÃO REALIZADAS CADA VEZ COM MENOR VOLUME DE AMOSTRAS E POR ISSO EXIGE REAGENTES MAIS PUROS, INCLUSIVE A ÁGUA; • SE A ÁGUA NÃO ESTIVER NO SEU GRAU DE PUREZA ADEQUADO PODE ALTERAR EXAMES DE DOSAGENS DE SÓDIO E POTÁSSIO Nos imunoensaiosPresença de enzimas liberadas (por bactérias, íons e moléculas) Por exemplo: Citrobacter sp secreta fosfatse alcalina Gerando uma reação cruzada DISCUSSÃO • OS IMUNOENSAIOS ESTÃO SENDO MAIS UTILIZADOS VALOR DE AMOSTRA MENOR + MAIOR QUALIDADE DA ÁGUA PARA REDUZIR O NÚMERO DE FALHAS; • NOS TESTES DE BIOLOGIA MOLECULAR RNASES E DNASES SÃO RETIRADAS DA ÁGUA PARA NÃO ALTERAR; • FUNDAMENTAL FAZER A MANUTENÇÃO DOS EQUIPAMENTOS RESPONSÁVEIS PELA PURIFICAÇÃO DA ÁGUA MINIMIZANDO CONTAMINAÇÃO MICROBIANA; • NA PREPARAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA ÁGUA POR OSMOSE REVERSA POR SER LIVRE DE SUBSTÂNCIAS BACTERICIDAS; PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE (PNCQ) • DEFINE A ÁGUA REAGENTE E SEU NÍVEL DE PUREZA PARA SER UTILIZADA NO LABORATÓRIOS CLÍNICOS; Água reagente Tipo l • Ideal para utilização em laboratórios clínicos. Água reagente Tipo ll • Usada quando a presença de bactérias é tolerada, como nos testes de rotina. • Usada para dissolver os soros controles; • Preparar reagentes; • Diluir amostras; PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE (PNCQ) Água reagente Tipo lll • Usada para rinsar frascos de vidros; • Também pode ser utilizada como água original (para obtenção de água de alto grau de pureza); Água reagente especial • Quando há necessidade de que sejam removidos contaminantes; • Usada para preparar soluções injetáveis, exames microssomais... • Não deve conter: substâncias orgânicas, silicatos, bactérias, ou substâncias em suspensão. PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE (PNCQ) PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE (PNCQ) PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE (PNCQ) • RECIPIENTES PARA DEPOSITAR A ÁGUA REAGENTE: • METÁLICOS AÇO, TITÂNIO OU PINTURA METÁLICA (CUIDADO PARA QUE NÃO HAJA TRANSFERÊNCIA DE TRAÇOS DE METAL) • NÃO METÁLICOS POLIPROPILENO, POLIETILENO, PVC (NÃO RECOMENDANDO PARA ÁGUA REAGENTE I E II); • VIDRO INACEITÁVEIS PARA ESTOCAR ÁGUA REAGENTE, APESAR DA ALTA QUALIDADE TRANSFEREM TRAÇOS DE: CHUMBO, BORO, SÓDIO, ARSÊNIO E SÍLICA. PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE (PNCQ) SÃO NECESSÁRIOS OS SEGUINTES TESTES E PERIODICIDADE: • DETERMINAÇÃO DE RESISTIVIDADE DIARIAMENTE • ESTERILIDADE COM CONTAGEM DE COLÔNIAS SEMANALMENTE • PH QUANDO NECESSÁRIO • CONTAMINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS INORGÂNICAS QUANDO NECESSÁRIO • SÍLICA SOLÚVEL QUANDO NECESSÁRIO *VALORES CONTIDOS NA TABELA 1. CONCLUSÃO • CONCLUI-SE QUE OS TIPOS DE ÁGUA E A RESPECTIVA ESPECIFICAÇÃO DEVEM ESTAR DE ACORDO COM OS REQUISITOS; • O TRATAMENTO DA ÁGUA DEVE SER RIGOROSAMENTE MONITORADO; • CUIDADOS PARA PREPARAÇÃO E MANUSEIO AUXILIAM NA MINIMIZAÇÃO DE POSSÍVEIS ERROS ANALÍTICOS, AUMENTANDO CONFIABILIDADE DOS RESULTADOS. REFERÊNCIAS • MENDES, M. E. ET AL. A IMPORTÂNCIA DA QUALIDADE DA ÁGUA REAGENTE NO LABORATÓRIO CLÍNICO. J BRAS PATOL MED LAB, V.47, N.3, P. 217-223, 2011. • SOCIEDADE BRASILEIRA DE ANÁLISES CLÍNICAS. PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE DE QUALIDADE.
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