relatório métodos 3

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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DO ESPÍRITO 
SANTO 
CURSO TÉCNICO EM BIOTECNOLOGIA INTEGRADO AO ENSINO MÉDIO 
 
 
 
 
 
Beatriz Ramos Terra 
Juliana Kelly dos Santos Lima 
 Kassyane Amorim Lourenço 
 Myllena Gil Contemor Evaristo 
Thiély Pereira Alves 
 
 
 
 
 
AULA PRÁTICA: IDENTIFICAÇÃO DE TRITERPENOS 
 
 
 
 
 
 Vila Velha, ES 
 Novembro de 2019 
Beatriz Ramos Terra 
Juliana Kelly Lima dos Santos 
 Kassyane de Amorim Lourenço 
 Myllena Gil Contemor Evaristo 
 Thiély Pereira Alves 
 
 
 
AULA PRÁTICA: IDENTIFICAÇÃO DE TRITERPENOS 
 
 
 
 
 
Relatório experimental da disciplina 
de Métodos de Separação acerca da 
aula em laboratório, 16/10, 
ministrada pelo professor Hildegardo 
França. 
 
 
 
 
 
 
 Vila Velha, ES 
 Novembro de 2019 
SUMÁRIO 
1.​ ​OBJETIVOS 
2.​ ​INTRODUÇÃO TEÓRICA 
3.​ ​MATERIAIS, REAGENTES E APARELHAGEM 
4.​ ​PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 
5.​ ​ RESULTADOS E DISCUSSÃO 
6.​ ​DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA E COMPLEMENTARES 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1. OBJETIVOS 
 
Identificar a presença ou ausência de saponinas em matéria prima de origem 
vegetal 
 
2. INTRODUÇÃO TEÓRICA 
 
Os glicosídeos saponosídicos têm este nome devido ao fato de formarem espuma 
abundante quando agitados com água (do latim sapo = sabão). Têm gosto amargo e 
acre e os medicamentos que os contêm geralmente são esternutatórios (provocam 
espirros) e irritantes para as mucosas. São compostos não nitrogenados que se 
dissolvem em água originando soluções espumantes, por diminuição da tensão 
superficial do líquido. Apresentam ainda as propriedades de emulsionar óleos e de 
produzir hemólise. Esta última deve-se à capacidade do glicosídeo de se combinar 
com as moléculas de colesterol presentes na membrana dos eritrócitos, perturbando 
o equilíbrio interno-externo e promovendo a ruptura da célula com consequente 
liberação da hemoglobina. Quimicamente, constituem um grupo heterogêneo, sendo 
classificados em glicosídeos saponosídicos do tipo esteroide e do tipo triterpênico. A 
caracterização das saponinas em uma amostra vegetal pode ser feita de maneira 
simples, com base na consequência da ação tensoativa de seus glicosídeos: 
investiga-se o poder espumante ou hemolítico de um macerado ou decocção 
aquosa da droga. 
Drogas cardioativas possuem em sua composição glicosídeos cardiotônicos, que 
são compostos que atuam diretamente no músculo cardíaco, sendo utilizados 
principalmente no tratamento da insuficiência cardíaca congestiva. Quimicamente, 
as agliconas (ou geninas) desse grupo caracterizam-se pelo núcleo fundamental do 
ciclopentanoperidrofenantreno e são divididas em dois grupos de acordo com o anel 
lactônico insaturado ligado ao C-17: pentacíclico (cardenólido) ou hexacíclico 
(bufadienólido). A glicona, ligada na aglicona em C-3 beta, é composta de até quatro 
unidades de açúcar, incluindo glucose e ramnose juntamente com outros 
desoxiaçúcares, por exemplo, 2,6-didesoxi-hexoses (digitoxose) ou seus 3-O-metil 
éteres (cimarose). A ação farmacológica é observada quando o princípio ativo está 
sob a forma de glicosídeo; a atividade inata reside nas agliconas (geninas), mas os 
açúcares conferem maior solubilidade e aumentam o poder de fixação dos 
glicosídeos ao músculo cardíaco. Por superdosagem esses compostos são muito 
tóxicos, o que torna necessário rigoroso controle da posologia dos princípios ativos. 
A droga exibe como efeito a soma da ação dos vários constituintes ativos que são 
de difícil separação. Para caracterização desses compostos, usam-se reações que 
evidenciam isoladamente partes da molécula do glicosídeo, como: reações de 
caracterização dos esteroides (Pesez e Liebermann), reações relacionadas com o 
anel lactônico pentacíclico (Baljet e Raymond) ou com desoxiaçúcares (Keller-Kiliani 
e xantidrol) 
 
3. MATERIAIS, REAGENTES E APARELHAGEM 
Etanol comercial Chapa aquecedora 
Ácido sulfúrico concentrado Tubos de ensaio 
Clorofórmio Pipeta volumétrica 
Anidrido acético Pipeta Pasteur 
Água destilada Becker 
 
 
5. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 
Experimento 1: 
Saponinas 
Neste ensaio, com 2,0 mL da solução etanólica, foi adicionado 5,0 mL de 
água destilada fervendo. Após resfriamento, agitou-se vigorosamente, deixando em 
repouso por 20 minutos. Classifica-se a presença de saponinas pela formação de 
espumas persistente. 
Experimento 2: 
Triterpenos - Neste ensaio, com 2,0 mL da solução etanólica, foi adicionado 
5,0 mL de clorofórmio em um tubo de ensaio. Após filtração, o extrato foi dividido em 
duas porções. Em cada um dos tubos realizaram-se as reações de 
Liebermann-Burchard e Salkowski. Os triterpenos desenvolvem coloração estável e 
os esteroides desenvolvem coloração mutável com o tempo. 
Reação de Liebermann-Buchard (reação do núcleo 
ciclopentanoperhidrofenantreno) 
Objetivo: ​Identificação do fenantreno.​ (Tubos 1) 
● Adicionar 1 mL de anidrido acético, em seguida, adicionar 1 mL de ac. 
sulfúrico conc. pelas paredes do tubo, sem agitar. 
● Observar o aparecimento de coloração na zona do contato entre o anidrido 
acético e o ac. sulfúrico. (NÃO MOVIMENTAR O TUBO). 
Cor azul ou verde → provavelmente núcleo esteroidal 
Cor vermelha, rosa, púrpura ou violeta → provavelmente núcleo triterpênico 
Reação de​ ​Salkowski ​(tubos 2) 
Adicionar 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado lentamente no tubo de ensaio. ​A 
mudança da coloração amarela para roxo indica resultado positivo para esteroides 
6.​ ​RESULTADOS E DISCUSSÃO 
6.1 Teste de Saponinas 
 Pode- se identificar a presença de saponinas 
nos tubos que possuem o extrato obtido 
através dos processos de percolação e 
soxhlet. Embora todos os tubos contenham a 
mesma planta, a ausência de saponinas em 
um deles pode ser explicada pois métodos de 
extração distintos podem extrair substâncias 
diferentes e nesse caso não foram extraídas 
saponinas no processo de maceração. 
A identificação de saponinas através da observação de espumas pode ser 
explicada pois elas possuem em partes de sua estrutura características 
lipofílicas (triterpenos ou esteróides) e hidrofílicas (açúcares), assim em solução 
aquosa, por possuírem propriedades tensoativas abaixam a tensão superficial da 
água e suas características detergentes e emulsificantes formam as espumas 
após agitação 
6.2 Teste de Triterpenos 
As reações de Liebermann-Burchard e de Salkowski são os testes mais usados 
para a identificação de triterpenoides e esteroides. A reação de 
Liebermann-Burchard é realizada a partir do tratamento da amostra com anidrido 
acético (C4H6O3) em meio no qual há a presença de ácido acético (CH3COOH) 
e gotas de ácido sulfúrico (H2SO4). Dessa forma, ocorre a desidratação e por 
conseguinte a oxidação do sistema de anéis do ciclopentanoperidrofenantreno, 
formando assim um esteróide aromático, o qual é evidenciado pela coloração 
azul esverdeada aparente. 
Ao passo que na reação de Salkowski há o aparecimento da cor amarelo, que por 
apresentar um núcleo esteroidal, varia até a coloração roxo sangue. 
Após a realização de ambos os protocolos das reações descritas e a análise da 
coloração apresentada e de acordo com os possíveis resultados que o grupo 
poderia encontrar, pode-seafirmar a presença de esteróides devida a cor 
esverdeada do tudo 1 (um), contendo a reação de Liebermann-Burchard e 
avermelhada na mistura referente ao tubo 2 (dois), com a reação de Salkowski. 
Sendo confirmado pela pesquisa de mestrado de Viana,Abraão José Silva (2011). 
7.​ ​REFERÊNCIAS 
http://www.sbfgnosia.org.br/Ensino/saponinas.html 
https://www.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/conteudo/saponinas/17460 
https://www.passeidireto.com/arquivo/2278813/saponinas 
http://www.sbfgnosia.org.br/Ensino/saponinas.html
https://www.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/conteudo/saponinas/17460
https://www.passeidireto.com/arquivo/2278813/saponinas
http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/bitstream/1/499/1/abraao_jose_silva_viana.pdf 
https://portalarquivos2.saude.gov.br/images/pdf/2019/setembro/18/cp-28-2014-verno
nia-condensata.pdf 
https://www.passeidireto.com/arquivo/44255414/apostila-pratica-bioquimica 
 
 
 
 
 
http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/bitstream/1/499/1/abraao_jose_silva_viana.pdf
https://portalarquivos2.saude.gov.br/images/pdf/2019/setembro/18/cp-28-2014-vernonia-condensata.pdf
https://portalarquivos2.saude.gov.br/images/pdf/2019/setembro/18/cp-28-2014-vernonia-condensata.pdf
https://www.passeidireto.com/arquivo/44255414/apostila-pratica-bioquimica