1 INTRODUÇÃO

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1 INTRODUÇÃO
Coloração de Gram o método de coloração utilizado para diferenciar espécies bacterianas em dois grupos, bactérias gram-positivas e gram-negativas. Entre os fatores que irão diferenciar gram-positivos de gram-negativos, está a coloração das bactérias, a composição e propriedades químicas e físicas das paredes celulares.
Outro método de diferenciação é a detecção de quantidade de peptídeoglicano nas bactérias gram-positivas e nas bactérias gram-negativas. As bactérias gram-positivas serão azul violeta, enquanto as gram-negativas serão vermelhas.
2 OBJETIVOS
Coloração de Gram positivo e negativo.
3 MATERIAIS E MÉTODOS
3.1 MATERIAIS UTILIZADOS
Lâminas para microscopia; óleo de imersão; lamínulas; microscópio; alça de platina; bico de Bunsen; tubo contendo solução com água esterilizada e corante: cristal de violeta.
Bactérias gram-positiva: lugol
· Estafilococcus aureus - Safranina
· Staphylococcus saprophyticus - Álcool 95%
Bactéria gram-negativa: gaze
· Escherichia coli - Pisseta água destilada
3.2 METODOLOGIA
	Em uma lâmina, contendo esfregaço seco, cubra-o pingando gotas de violeta-de-metila e deixe agir por 15 segundos;
Adicione água ao esfregaço, em cima do violeta-de-metila, cobrindo toda a lâmina. Deixe agir por mais 45 segundos;
Após o tempo corrido, escorra o corante e lave o esfregaço em um filete de água corrente.  Cubra a lâmina com lugol ou Iodo de Gram e deixe por 60 segundos;
Escorra todo o lugol e lave em um filete de água corrente;
Aplique álcool etílico a 95%, ou acetona, para descorar a lâmina por 10 a 20 segundos;
Lave em um filete de água corrente;
Cubra toda a lâmina com safarina e deixe corar por aproximadamente 30 segundos;
Lave a lâmina em um filete de água;
Seque a lâmina com auxílio de um papel de filtro limpo ou deixe-a secar ao ar livre;
Aplique uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço e observe no microscópico com objetiva de imersão (100 X).
4 REFERÊNCIAS
Protocolo de aula prática e explicação dados pelo professor Cynthia Coimbra.
http://www.provida.ind.br/site/index.php/bacterias/bacterias/122-tecnica-de-gram.htmlm
https://en.wikipedia.org/wiki/Gram_staining
http://www.biomedicinabrasil.com/2011/06/coloracao-de-gram.html
http://serc.carleton.edu/microbelife/research_methods/microscopy/gramstain.html
5 ANEXOS
GRAM NEGATIVO GRAM POSITIVO 
NARA RAQUEL ALVES BEZERRA
RAIANE AZEVEDO VIANA DA SILVA
REBECCA TEIXEIRA ALVES SILVA
RELATÓRIO DA AULA PRÁTICA DE MICROBIOLOGIA
Relatório produzido e apresentado ao professor Cynthia Coimbra, referente à aula prática do dia 11/03/2019, como requisito da disciplina de Microbiologia.
 
 CARUARU – 2019
ASSOCIAÇÃO CARUARUENSE DE ENSINO SUPERIOR
CENTRO UNIVERSITÁRIO TABOSA DE ALMEIDA
(ASCES-UNITA)
BACHARELADO EM FARMÁCIA
NARA RAQUEL ALVES BEZERRA
RAIANE AZEVEDO VIANA DA SILVA
REBECCA TEIXEIRA ALVES SILVA
RELATÓRIO DA AULA PRÁTICA DE MICROBIOLOGIA
CARUARU – 2019