AULA 04 técnicas

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Técnicas histológicas para identificação 
 
1) Montagem do órgão vegetal com água destilada entre lâmina e lamínula: 
aplicável ao cálice persistente que envolve o fruto de C. sativa. 
 
2) Cortes transversais: fazer uma pequena incisão em um bloco de isopor e incluir, 
sem deixar folgas, o órgão a ser cortado (folha, caule etc.). Com uma lâmina 
afiada, realizar cortes transversais finos e transferi-los para um vidro de relógio 
contendo água destilada. 
 
3) Cortes paradérmicos (Técnica de “Peeling”): fazer pequena incisão vertical 
no órgão e, com pinça de relojoeiro, puxar horizontalmente um fragmento de 
epiderme de modo a destacá-lo. Transferir para um vidro de relógio contendo água 
destilada, cuidando para não inverter a posição do tecido. 
 
4) Montagem da lâmina com água destilada ou solução alcalina de Fast Blue B 
(BB) Salt (identificação de canabinoides nas estruturas secretoras): posicionar 
os cortes histológicos em lâminas de vidro contendo uma gota de água destilada 
ou uma gota de solução alcalina de Fast Blue B (BB) Salt recentemente preparada 
(50mg de sal em 20mL de NaOH 0,1M). 
 
Cobrir as preparações com lamínula e observar em microscópio óptico. As lâminas 
montadas com Fast Blue devem ser observadas após 30 minutos ou mais da 
preparação, tempo necessário para o reagente pigmentar adequadamente as 
estruturas secretoras ricas em canabinoides. 
 
5) Teste para identificação do carbonato de cálcio (CaCO3) nas inclusões 
cristalinas dos tricomas cistolíticos: em lâmina montada com água destilada, 
retirar a água com um papel filtro posicionado em uma das laterais, 
concomitantemente à adição, pela lateral oposta, de gotas de solução aquosa de 
HCl ou HNO3 1M. 
 
 
 
 
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Se a transferência de meio líquido for realizada ao microscópio, poderão ser 
observadas bolhas de gás (CO2) sobre os cistólitos, com consequente esvaziamento 
da base do tricoma cistolítico. 
 
A reação está resumida abaixo: 
CaCO3 + 2HCL/2HNO3 (aq.) ------ H2CO3-------H2O + CO2