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Estrutura do DNA Ácidos nucléicos- DNA e RNA São compostos de monômeros que formam um polímero de nucleotídeos; DNA (ácido desoxirribonucléico)- contém a informação genética; Sem hidroxila no 2C RNA- (ácido ribonucléico)- Leva a informação (mensagem) até o local que será sintetizada a informação; Presença de hidroxila no 2C Todo nucleotídeo é composto por: 1 grupo fosfato- carbono 5’; 1 pentose (açúcar com 5C); 1 base nitrogenada. Obs: o que muda de um nucleotídeo para outro é o açúcar e a base nitrogenada. Bases nitrogenadas Purinas- Adenina (A) e Guanina (G)- anel duplo; Pirimidinas- Citosina (C), Timina (T) e Uracila (U)- anel simples. Obs: Timina apenas em DNA e Uracila apenas em RNA Caracterização DNA RNA Açúcar Desoxirribose Ribose Grupo fosfato H3PO4 H3PO4 Bases nitrogenadas Pirimidinas: Citosina e Timina Purinas: Adenina e Guanina Pirimidinas: Citosina e Uracila Purinas: Adenina e Guanina DNA é um polímero de nucleotídeos que contém o material genético de todos os seres vivos. Fica no núcleo das células dos eucariotos e dispersos no citoplasma de procariotos; Formado por duas cadeias de nucleotídeos ligadas através de pontes de hidrogênio; Enrolam-se para a direita ficando num formato de dupla hélice. Pontes de hidrogênio (interna)- ligação das bases nitrogenadas; Ligação fosfodiéster (externa)- hidroxila do carbono 3’ do açúcar se liga ao fosfato do carbono 5’ do outro açúcar. Direcionalidade da síntese de DNA- 5’3’ Fosfato C5 e hidroxila C3; As fitas são antiparalelas, ou seja, seguem em sentidos opostos Uma começa com 5’3’- fosfato livre; Outra começa com 3’5’- hidroxila livre. Replicação Importante para transmitir a informação genética às células filhas originada na divisão celular. Duplicação que antecede a divisão celular, separando as duas cadeias da fita de DNA; É a capacidade do DNA de fazer novas cópias de si mesmo; As pontes de hidrogênio são desfeitas e as fitas são abertas, separando uma da outra; Cada uma das fitas originais vai servir como molde para uma nova fita ser construída. No final duas cópias serão formadas do mesmo DNA. No final da divisão cada uma das cópias terá uma fita de DNA original. Semiconservativa- cada dupla hélice nova conserva metade da dupla hélice antiga (original). Origem de replicação- pontos específicos do DNA onde acontece a replicação. Forma a bolha de replicação. Procariotos- apenas um ponto de origem de replicação; Eucariotos- vários pontos de origem de replicação. Forquilha de replicação- local onde acontece abertura do DNA. Bidirecional- acontecem paralelamente nos dois lados em ambas as direções. Semi descontínua- a síntese de DNA acontece apenas no sentido 5’3’; Cadeia contínua ou líder- sintetizada continuamente; Cadeia descontínua ou retardatária- sintetizada descontinuamente pela formação de diversos fragmentos (okazaki) que posteriormente são unidos pela DNA ligase. Nessa cadeia a síntese é feita por partes. Primer- sinaliza o local onde irá iniciar a replicação. Após o final da replicação são retirados. Enzimas Helicase- quebra as pontes de hidrogênio, separando uma cadeia da outra; Proteínas de ligação ao DNA de fita simples- mantém as fitas abertas e evita que as pontes de hidrogênio sejam refeitas. Topoisomerase ou DNA girase- evita o super enrolamento. Vai afrouxando o DNA enquanto a helicase vai abrindo as fitas de DNA. Primase- tipo de RNA polimerase. Sintetiza o primer (fragmento de RNA que inicia uma cadeia de DNA). DNA polimerase- faz a síntese de DNA, adicionando nucleotídeos à cadeia de DNA que está sendo formada. Verificação- faz a correção de eventuais falhas que podem ocorrer na síntese. Polimerização- síntese de DNA; Exonuclease- retira a base errada e coloca a base correta. Quando não acontece a retirada de bases que foram colocadas de forma errada, ocorre mutação. DNA ligase- faz a ligação dos fragmentos de okazaki Transcrição Faz parte do processo de expressão gênica; Cópia da informação do DNA para o RNA; Sempre acontece em momentos específicos, sempre que determinadas proteínas são requisitadas pelo organismo; Necessidade de uma proteína. Em um gene do DNA a RNA polimerase atua. Abre o DNA e começa a transcrição. RNA leva a informação para o citoplasma para que ocorra a síntese protéica; Une bases nitrogenadas livres no núcleo, unindo-as a fita de RNAm. Gene- sequência específica de ácidos nucléicos; Unidade funcional do DNA que codifica proteínas; Único gene produz diferentes aminoácidos. Tipos de RNAs RNAm- RNA de informação. Final da transcrição. Tem o códon; RNAt- transporte de aminoácidos durante a tradução. Tem o anticódon; RNAr- síntese de ribossomos. Obs: RNAt e RNAr são funcionais Fita molde ou antissenso- filamento utilizado como molde 3’5’; RNA polimerase sempre começa a sintetizar no sentido 5’3’. A transcrição tem três fases: Iniciação- a RNA polimerase escaneia a dupla hélice e identifica a região promotora (local onde um gene está começando) formando um complexo. A enzima abre a fita de DNA formando um complexo aberto e inicia o processo de transcrição. Alongamento- várias moléculas de nucleotídeos são ligadas, formando assim uma longa cadeia. Finalização- sequência de bases (A-T) que são repetidas de 4 a 10 vezes. Processamento ou splicing Processo que ocorre no núcleo e consiste na remoção dos íntrons e união dos éxons. Ocorre a adição de cauda e capacete que tem como função proteger a RNAm contra ação de enzimas destrutivas. Qualquer base de um íntron que não seja retirada ou de um éxon que seja erradamente retirada altera a mensagem. 100% das sequência de bases dos íntrons, iniciam, em 5’ com GU e terminam em 3’ com AG. Éxons- segmentos que codificam aminoácidos; Íntrons- segmentos que não codificam aminoácidos; Tradução RNAm carrega a informação de um gene do DNA; Sai do núcleo e vai para o citoplasma. Código genético (códon)- formado por uma trinca de nucleotídeos que irão formar uma proteína. Anticódon- Trinca de nucleotídeos complementares às tríades de nucleotídeos encontrados no RNAm; Toda proteína tem como aminoácido primário a metionina (5’AUG3’); Código genético degenerativo (sinônimo)- diferentes códons podem codificar o mesmo aminoácido. A degenerescência do código só não ocorre para dois aminoácidos, metionina e triptofano, codificados por 5'AUG3' e 5’UGG3', respectivamente. Pareamento oscilante- a terceira base oscila, porém a oscilação resulta no mesmo aminoácido. Códons de terminação- são códons que sinalizam o final da tradução. Nenhuma RNAt reconhece esses códons (5’UAA3’, 5’UAG3’ ou 5’UGA3’); Estrutura do ribossomo Subunidade maior Sítio A- onde os RNAt entram com os aminoácidos nos ribssomos; Sítio P- onde os aminoácidos se ligam formando uma cadeia polipeptídica Sítio E- Sítio de saída do RNAt sem o aminoácido. Subunidade menor- local onde entra o RNAm. Etapas da síntese de proteínas Iniciação- RNAm se liga a subunidade menor. Posiciona o códon de iniciação do RNAm no sítio P do ribossomo; Apenas o RNAt que pareie com o anticódon pode estabelecer contato estabilizadores do o RNAr. O primeiro códon lido será sempre metionina (AUG); Translocação- movimento do ribossomo ao longo do mRNA no sentio 5’-3’, posiciona o ribossomo no códon seguinte. Alongamento- após a ligação peptídica o ribossomo se move na fita. O RNAt não carregado é liberado do sitio A; O peptidil-RNAt move-se para do sítio A para o P; Uma nova trinca é exposta no sítio A Terminação- É sinalizada pela presençade um dos códons de terminação no RNAm: UAA, UAG, UGA; Fatores de terminação (RF1, RF2 e RF3): -Hidrólise da ligação peptidil- RNAt-Terminal; Liberação do peptídeo e do RNAt; Dissociação das subunidades do ribossomo. Polirribossomos Estrutura resultante de um mRNA com vários ribossomos ligados e traduzindo; Vários ribossomos são percorridos por uma molécula de RNAm simultaneamente. Isto determina que diversas cadeias polipeptídicas, em diferentes fases de crescimento, possam ser encontradas ao longo de uma mesma molécula mensageira.