Portifolio - Imunologia clinica e Hematogia clinica

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Graduação em Biomedicina 
Inaê F. de Luccas M. Lima 
RA 8064525 
 
 
 
Portifólio Imunofenotipagem 
 Atividade referente à disciplina de Hematologia Clínica 
 
 
 
 
 
 
Rio Claro 
2020 
Introdução 
 
O primeiro relato de leucemia foi registrado em 1845, desde então é possível notar um 
grande avanço em relação ao entendimento biológico das leucemias. Durantes esse período foi 
possível aprimorar os conceitos imunológicos principalmente nas áreas da diferenciação 
genética molecular e linfocitária. O desenvolvimento dessa área juntamente com os avanços 
relacionados a imunologia, permitiram um maior entendimento das leucemias. As leucemias 
simbolizam um grupo heterogêneo de doenças clonais de precursores hematopoiéticos, são 
caracterizadas por anomalias qualitativa e quantitativa. 
 Métodos de diagnóstico mais sofisticados recentemente, redefiniram a classificação das 
leucemias de acordo com a origem celular, linfoide B ou T, mieloide, e o tipo de anormalidade 
genética relacionada. A partir da determinação da origem celular é possível determinar qual 
conduta clínica será adotada, outro ponto importante é o reconhecimento do estágio de 
maturação, existem duas formas aguda ou crônica, é um fator importante para o prognóstico do 
paciente. 
 Através de uma combinação de análise citomorfológica e histológica é possível ter o 
diagnóstico hematopatológico. Contudo, técnicas de imunofenotipagem mostram informações 
importantes ao diagnostico, como por exemplo a citometria de fluxo e a imuno-histoquímica, que 
revelam o grau de maturação das células, células com fenótipo anormal, e avalia presença de 
marcadores associados ao prognóstico. Para avaliações preliminares usa-se o hemograma, que 
mostra dados como a contagem global, diferencial, comprometimento da hematopoese e a 
morfologia dos leucócitos. Para que haja confirmação de uma leucemia se faz necessário a 
avaliação morfológica do aspirado da medula óssea. 
 A identificação de microcomponentes biológicos desafia os cientistas desde que Robert 
Hooke introduziu o conceito de células Século XVII. A melhoria do microscópio pode levantar o 
véu, intérprete Aldous Huxley como "um admirável mundo novo". No entanto, apenas A 
introdução de técnicas de detecção microscópica usando anticorpos permite identificar 
componentes celulares, como proteínas. O desenvolvimento de novas tecnologias, como a 
citometria de fluxo, permite que as pessoas identifiquem e caracterizem as propriedades físico-
químicas de células individuais em populações de partículas homogêneas ou heterogêneas 
presentes em seres humanos. Essa tecnologia ainda está viva e, devido às suas contribuições 
relacionadas à pesquisa científica, despertou grande interesse na imunologia molecular e nos 
campos clínicos, fornecendo suporte para o diagnóstico e prognóstico da doença. 
 A citometria de fluxo é uma tecnologia madura que utiliza laser óptico, cuja função é 
separar, contar e detectar biomarcadores em células e proteínas. A técnica que utiliza o raio laser 
incidente pode medir a dispersão e a fluorescência do raio laser refletido a partir da amostra de 
célula. É utilizado na pesquisa de citometria de fluxo e possui uma ampla gama de aplicações, 
denominada citometria de fluxo multiparamétrica. 
 A versão mais recente da citometria de fluxo, denominada FACS (Separador de Células 
Ativadas por Fluorescência), é o resultado de avanços tecnológicos, que utilizam a automação 
da análise e diferenciam células com anticorpos fluorescentes usados anteriormente. Portanto, 
fornece informações rápidas e precisas ao ler a intensidade da fluorescência refletida nas células 
previamente marcadas com anticorpos monoclonais fluorescentes, são identificadas numerosas 
características intrínsecas ou extrínsecas contidas nas células, e o tamanho e tamanho das 
partículas são identificados com precisão. 
 A Organização Mundial de Saúde classifica os tumores dos tecidos hematopoiético e 
linfoide através de uma abordagem diagnostica nos seguintes parâmetros: genotípico, 
morfológico e fenotípico. No entanto visando o custo-benefício é desnecessário fazer vários 
testes nas amostras, claro que para toda regra existem exceções, por isso em 2006 foi 
desenvolvido um formulário de recomendações para análise imunofenotípica de neoplasias 
hematológicas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Leucemias 
 A medula óssea consiste em tecido composto principalmente de células-tronco 
do sangue, células adiposas e tecidos cuja função é desenvolvimento e maturação das 
células sanguíneas e é encontrado em ossos específicos, dependendo da idade. Em 
crianças é encontrado em praticamente todos os ossos, enquanto em adultos localizado 
nos ossos da costela, esterno, vértebras, crânio e pelve partes ósseas distais desde o 
fêmur e úmero e têm como principal produção de todas as células sanguíneas (células 
sanguíneas brancas, vermelhas e plaquetas). 
 Nos casos de leucemias crônicas o infiltrado medular consiste em sua maioria 
de células diferenciadas e de uma determinada linhagem que em seu início conseguem 
desenvolver suas funções normalmente e o diagnóstico da doença ocorre normalmente 
em exames de rotina ou após um agravo da doença onde acontece o aumento 
considerável das células leucêmicas maduras causando inchaço nos linfonodos ou 
infecções. 
Nos casos de leucemia crônica, a infiltração medular consiste principalmente em 
células diferenciadas e uma certa linhagem que no início eles conseguem desenvolver 
suas funções e diagnosticar a doença normalmente geralmente ocorre em exames de 
rotina ou quando a doença piora há um aumento significativo no número de células 
maduras de leucemia linfonodos inchados ou infecções. A leucemia crônica afeta outra 
população de acordo com linhagem, na linhagem mieloide, ocorre principalmente em 
adultos e doença linfoide, a maioria dos pacientes tem mais de 55 anos e, em casos 
raros, é afetada crianças. 
 Na leucemia aguda, a infiltração espinhal consiste em explosões ou células que 
não se desenvolvem no início de sua maturação funções normais e, nesses casos, as 
células de leucemia crescem rapidamente exacerbação adicional da doença. A maioria 
dos casos de leucemia aguda é mais agressiva e nas linhas mieloide e linfoide 
envolvimento de adultos e crianças, no entanto, na linha linfoide a vantagem está em 
crianças entre 3 e 5 anos. Existem vários outros subconjuntos de leucemia mielóide 
aguda, como: leucemia mieloblástica sem maturação, leucemia mieloblástica, 
promielocítica, monocítica, eritroleucemia e megacarioblástica. 
A leucemia linfocítica aguda são divididas em LLA L1, LLA L2 e LLA L3, a 
classificação resulta da morfologia celular. O principal teste usado para diferenciar tipos 
de leucemia é imunofenotipagem usando um citômetro de fluxo ou imuno-histoquímica 
para distinguir marcadores de superfície e assim, diferencia a linhagem, maturação e 
identificação marcadores de valor prognóstico. 
 
Imunofenotipagem 
 A imunofenotipagem envolve a análise da expressão antigênica das células 
ligação do antígeno ao anticorpo e fluorocromo. Anticorpos monoclonais as células se 
ligam a epítopos na membrana, citoplasma e intranuclearmente. 
 O teste utiliza citometria de fluxo ou imuno-histoquímica lendo a reação de 
anticorpo monoclonal associado ao fluorocromo que após ligação por ligação antígeno-
anticorpo a superfície liberando fluorescência. Existe um painel de marcadores 
específicas que definem cada linha e podem ser definidas a partir de sua identificação 
o melhor tratamento, o medicamento mais específico e é usado para avaliar o grau de 
maturação das células cancerígenas e possíveis recaídas. Os marcadores mielóide 
mais usados são: CD13, CD33, CD65, MPO, CD11c, CD14, CD15, CD36, CD235a, 
CD41, CD61, CD42, CD34, H-antígeno, CD117, HLA-DR e TdT. 
 Para leucemia linfoide, são utilizados os seguintes marcadores:HLA-DR, TdT, 
CD19, CD22(c), CD10, CD20, cµ, SmIg, CD7, CD2, CD3(c), CD1a, CD3, CD4 E CD8. 
 A técnica de imunofenotipagem da citometria fornece alta sensibilidade, 
objetividade, velocidade e precisão na análise de recursos e conteúdos celulares DNA 
/ RNA, analisando a quantidade de antígeno celular, resistência a drogas celulares e 
análise citoplasmática. 
 Outros testes podem estar associados à imunofenotipagem, como cariótipo, mas 
diferente como citogenética convencional e molecular, Southern blotting, amplificação 
de DNA ou RNA por PCR, PCR em hibridização em tempo real in situ, entre outras 
técnicas, pode ser realizada melhor entendimento das patologias e causas genéticas 
associadas à algumas linhagens de leucemia. 
 
Citometria de Fluxo 
 A citometria de fluxo (FC) foi desenvolvida por Andrew Moldavan em 1934, ele 
desenvolveu um sistema no qual as células são coradas em tubos que passavam pelo 
fotodetector sob a luz do microscópio óptico e contava as células de acordo com a luz 
incidente. Em 1947, o cenário marcado pelo período pós-Segunda Guerra Mundial, 
Gucker JR desenvolveu um filtro de ar projetado para identificar partículas únicas e 
testar esporos usados em armas biológicas ou bactérias. Gucker JR inventou um 
dispositivo foto-eletrônico em 1948, que continha partículas de DOP- dioctil ftalato, um 
polímero com um diâmetro de 0,6 µm, e podia ser usado para outros substâncias ou 
microrganismos, como bactérias. Este método baseia-se na ação de partículas 
suspensas no ar através de um tubo capilar que detecta partículas fotossensíveis pela 
luz dispersa. 
 Em 1949, Wallace Coulter criou um contador com base na diferença das células 
na solução salina, para que o tamanho das células sanguíneas possa ser avaliado; o 
dispositivo foi patenteado como contador Coulter. Em 1953, Crosland e Taylor, com 
base no princípio de Gucker Jr., desenvolveram uma câmara na qual as amostras foram 
colocadas no meio do fluxo de revestimento, através das quais um capilar de maior 
diâmetro fluía no meio deste sistema, o que evitava o entupimento dos capilares e 
permitia melhor amostras de foco da fonte luz. Esta câmera se tornou uma referência 
para a câmera usada atualmente. Em 1965, Katmentsky criou o RCS (Rapid Cell 
Spectrophotometer), que usava a espectrofotometria para medir o tamanho da célula e 
quantifica o DNA, inseriu análise multiparâmetros da luz dispersa e usa histogramas 
inovadores de dois parâmetros. Usando substâncias fluorescentes, conseguiu menos 
sinal que corante e absorção. 
 Desde 1975, o uso da citometria de fluxo na biomedicina tem sido gradualmente 
desenvolvido. Em 1975, Reinherz usou anticorpos monoclonais para reconhecer 
subconjuntos de células como a função de antígenos de superfície. Usando a tecnologia 
de nucleosídeo bromodeoxiuracil (BrdU) para observar os vários estágios do ciclo 
celular, Gratzner testou o anticorpo em 1975. 
 A tecnologia laser é uma ferramenta de pesquisa e diagnóstico que pode ser 
usada em vários campos de interesse da ciência. Atualmente, a citometria de fluxo é o 
modelo de análise celular mais utilizado, por exemplo, em estudos clínicos de 
laboratório, controlando células CD4 em pacientes com HIV, em investigações de 
doenças Características hematológicas com características malignas e 
desenvolvimento de. 
A citometria de fluxo é uma técnica baseada no uso de lasers ópticos, 
amplamente utilizados para a triagem de biomarcadores em proteínas, contagem e 
detecção de células únicas. A técnica que utiliza o raio laser incidente pode medir a 
dispersão e a fluorescência do raio laser refletido a partir da amostra de célula. É usado 
na pesquisa de citometria de fluxo e, por ter uma ampla gama de aplicações, é chamado 
de citometria de fluxo multiparamétrica. A citometria de fluxo multiparâmetros pode 
identificar rapidamente as células quando elas passam pelo equipamento de detecção 
eletrônica na forma de fluxo líquido. Após a separação das células, as partículas que 
fluem no meio líquido são analisadas, contadas e identificadas. Dessa maneira, ele pode 
identificar rapidamente muitas características biológicas contidas na célula, como: 
ácidos nucleicos, receptores de superfície, epítopos de proteínas, síntese de proteínas, 
citocinas e concentrações de íons, tudo dentro de uma única célula. A vantagem dessa 
técnica é a capacidade de medir vários parâmetros simultaneamente. Por meio dessas 
informações múltiplas, eles podem entender completamente a linhagem, o status de 
ativação ou a citopatologia. 
Desempenho da citometria de fluxo usando modelos aprimorados FACS 
(separador de célula ativado por fluorescência) (Figura 1) têm sido usadas por muitos 
pesquisadores como o instrumento automatizado mais comumente usados para 
pesquisa e seleção de células. Amostras de células previamente coradas com 
anticorpos fluorescentes. 
 
Figura 1- citômetro de fluxo BD FACSVerse ™ 
 
Fonte – Equipal – equipamentos laboratoriais 
Disponível em: http://equipal.com.br/produto/facsverse/ > Acesso em abril. 2020 
http://equipal.com.br/produto/facsverse/
O princípio de funcionamento do separador de células ativadas por fluorescência 
usa um feixe de laser e um identificador de luz para a contagem individual de células 
intactas que estão em suspensão. As possíveis medições das propriedades físicas e/ou 
químicas da célula são feitas usando um subsistema fotoelétrico que indica como as 
células ou partículas dispersam a luz refletida do laser e emitem fluorescência. Assim, 
as propriedades mais celulares analisados no sistema FACS compreendem o 
mecanismo complexo micropartículas, o tamanho, granularidade e intensidade da 
fluorescência (Fig. 2). 
 Embora a FC seja rotineiramente usada por sua versatilidade na determinação 
dos parâmetros e da sensibilidade das células, novas técnicas foram usadas para 
melhorar esse método. O mais importante é a espectrometria de massa, onde as células 
também são marcadas com anticorpos conjugados. Contudo, diferentemente da FC, 
onde os anticorpos são conjugados com os fluorocromos na citometria de massa são 
conjugados com isótopos de metais raros, que são posteriormente detectados por um 
espectrômetro de massa conjugado ao citômetro. 
 
Figura 2. Sistema ótico-eletrônico de dispersão de luz do laser refletido, do citômetro de fluxo 
BD FACSVerse 
 
Fonte: Laboratório Multiusuário de Cultivo Celular do Programa de Pós-Graduação em Ciência 
Animal da Universidade Federal de Goiás, que irradia a fluorescência. 
Disponível em: http://www.conhecer.org.br/enciclop/2016a/agrarias/citometria.pdf > Acesso em 
abril. 2020 
 
 A FC mede os parâmetros nas células que fluem pelo sistema análise. O 
processo começa com a seleção de anticorpos marcados fluorocromos e específicos 
para o antígeno celular que permite caracterizar população de células de interesse. 
Após o processamento, foram obtidas amostras do tratamento de fluidos ou tecidos, a 
suspensão celular é inserida no dispositivo, fluindo em direção ao laser colocado no 
caminho celular. Como o fluxo celular é laminar e o diâmetro do tubo diminui, portanto, 
as células são forçadas a passar seguidas pela luz emitida pelo laser o fluorocromo 
ligado ao anticorpo absorve a energia do laser e emite rapidamente esta energia na 
http://www.conhecer.org.br/enciclop/2016a/agrarias/citometria.pdf
forma de luz de comprimentos de onda específicos de acordo com fluorocromo usados. 
A luz emitida é capturada por um sistema óptico que é sensível a diferentes 
comprimentos de onda, permitindo um ou mais marcadores leia ao mesmo tempo 
transferindo essas informações para um computador anexado ao sistema. Os 
programas especializados podem exibir graficamente, em formatos uni, bi ou 
tridimensionais, a distribuição da população celulares marcados. 
 A dinâmica funcional dos citômetros de fluxo é essencialmente complexa através 
de cinco sistemas. O primeiro éum sistema de fluido, um tipo de câmara através da qual 
as células são introduzidas e alinhadas uma a uma de acordo com a diferença de 
pressão, onde afetará a luz do laser. O sistema óptico é a parte que contém a fonte 
emissor de luz laser, lâmpadas de xenônio ou mercúrio, laser poderoso Lasers de 
argônio ou de baixa potência, além de lasers de diodo azuis, verdes, vermelho e roxo. 
(Fig. 3) Os detectores são ativados localmente pelo local do fluxo cai através do raio 
laser. A luz está espalhada ao longo da linha reta do feixe chamado dobragem direta 
(FSC) equivalente ao volume celular, bem como através de vigas perpendiculares ou 
espalhamento lateral (espalhamento lateral - SSC) sujeito à complexidade interna da 
partícula como exemplo de formato nuclear, quantidade e tipo de grânulos 
citoplasmáticos e deformação da membrana, além entre eles um ou mais detectores de 
fluorescência. 
 O sistema eletrônico recebe sinais ópticos e os converte em sinais eletrônica, do 
sistema analógico ao digital, da reprodução de sinais FSC, SSC e fluorescentes. Uma 
vez que uma célula ou partícula passa através de luz laser, luz dispersa lateral e sinais 
fluorescentes são direcionados a fotomultiplicadores (fotomultiplicadores - PMT), 
enquanto o fotodiodo de silício coleta sinais dispersos pela frente. o sistema de 
amplificação é responsável pela codificação e processamento dos dados recebidos no 
formato de escala logarítmica ou linear. Um sistema de computador usando software 
realiza análises, processa sinais e emite resultados obtidos. 
Dois tipos de citômetros estão disponíveis para venda, citômetro de laboratório 
(citômetros de fluxo de Back-up) e separador de células (classificadores de células). Um 
citômetro de mesa geralmente é equipado com um laser de argônio é por isso que o 
laser de baixa intensidade ou He-Ne, resfriado a ar, é usado com mais frequência, até 
quatro cores. O classificador de células é uma versão mais completa e complexa, 
consiste em vários componentes eletrônicos, é equipado com um laser de alta potência, 
então ele precisa de resfriamento a água e tem até 11 cores seguidas suspensão 
heterogênea (classificação) causa separação física das células. Por grau a 
complexidade do equipamento requer serviço especializado, eles são altos custos e são 
geralmente destinados a grandes centros de pesquisa porque são extensas 
possibilidades de aplicação. 
Basicamente, os citômetros de fluxo consistem em dois ou mais tipos lasers que 
aumentam a capacidade de medições multiparâmetros. luz monocromático, estável e 
de alta potência, é mais usado em citômetros de fluxo, lasers podem emitir feixes sólidos 
de luz ou podem ser ajustados porque são altos a energia é resfriada à água, enquanto 
a baixa energia é resfriada no ar. O laser mais usado em FC é o laser de íon argônio 
Emissão de 488 nm, o que permite maior excitação em fluorocromos como Anexina V, 
brometo de propídio, FITC, PE, PI, PerCP e -AAD, acridina laranja, entre outros. 
Figura 3 - Sistema óptico do Citômetro de Fluxo BD FACSVerse 
 
Fonte: Laboratório Multiusuário de Cultivo Celular do Programa de Pós-Graduação em 
Ciência Animal da Universidade Federal de Goiás, parte que abriga a fonte emissora do laser. 
Disponível em : http://www.conhecer.org.br/enciclop/2016a/agrarias/citometria.pdf > Acesso 
em : abril. 2020 
 
O FC é uma técnica muito versátil, importante durante pesquisas em biologia e 
medicina que pode ser aplicada em várias situações é necessária a caracterização da 
população celular. Estes podem ser exemplos pesquisa citada no campo da 
hematologia, oncologia, transplante de órgãos, alterações vacinais, alterações 
plaquetárias, análise de respostas microrganismos para infecções bacterianas ou 
fúngicas e no desenvolvimento de medicamentos do extrato da planta. Isso deve ser 
enfatizado em pesquisas destinadas a descobrir ou interferir nas vias de sinalização da 
resposta imune e / ou inflamatório, a única ferramenta que fornece a sensibilidade 
necessária e a especificidade do monitoramento da subpopulação de células é FC. 
A técnica FCM é amplamente utilizada para testes função plaquetária sugerindo 
o diagnóstico da síndrome de Bernard-Soulier ou Trombostenia de Glanzmann. É assim 
que o FCM determina a densidade correspondendo ao receptor da glicoproteína de 
membrana (GPIb-IX-V, aIIbb3), como examinar e confirmar esses diagnósticos. Você 
pode usar o FCM para por exemplo, na identificação de alterações quantitativas nos 
receptores de colágeno (GPVI, A2B1) ou trombina (PAR-1) e para medir as respostas 
induzidas por agonistas de plaquetas, incluindo exposição a fosfolipídios aniônicos 
Em estudos hematológicos recentes, a citometria de fluxo com amostra de 
sangue periférico para teste de células progenitoras hematopoiéticas e proangiogênico 
(PAC), porque são ingredientes população de células específicas da medula óssea. 
Houve estudos impulsionado por evidências emergentes de que essa subpopulação de 
células precursores hematopoiéticos desempenham um papel fundamental na saúde e 
na doença Vascular. A FC foi utilizada para caracterizar individualmente essas células 
com base em marcadores de superfície como CD34 e CD 133 para expressão de células 
progenitoras e VEGFR2 como marcador angiogênico. Dada a importância detecção e 
isolamento do CAP em várias áreas da pesquisa de doenças, no entanto, não há outra 
maneira de caracterizar essas células. Desta maneira A citometria de fluxo é uma 
http://www.conhecer.org.br/enciclop/2016a/agrarias/citometria.pdf
ferramenta indispensável na identificação e monitoramento dessas células na medula 
óssea e no sangue periférico. com protocolo apropriado, essas células podem ser 
identificadas e avaliadas expressão de marcadores específicos de doenças. FC 
desempenhou um papel importante uma função para entender a pesquisa biológica 
dessas células e deles papel na fisiopatologia das doenças do sangue humano. 
O FC é reconhecido como uma técnica de pesquisa reconhecida em 
transplantes, no reconhecimento de reações cruzadas antes e após o transplante 
monitorização da reconstituição imunológica após transplante de células-tronco 
hematopoiéticas. A FCM descreve em detalhes os elementos do sistema imunológico, 
suas funções e interação e reagentes recentemente desenvolvidos com base em 
análises multiparâmetros principalmente necessário no cenário pós-transplante. efeito 
Controle das respostas imunes, monitoramento de infecções oportunistas e rejeição de 
transplante, bem como na mensuração da imunossupressão no contexto transplantes 
de órgãos permanentes. Entretanto, a citometria de fluxo é uma técnica o significado 
mais importante que oferece informações valiosas sobre o status imunológico o receptor 
do transplante trabalha no monitoramento da função imunológica após transplante de 
órgão sólido na avaliação do estado de saúde do transplante e do receptor. 
Identificação de locais (antígenos) para o desenvolvimento de vacinas foi feito 
usando FC. Aplicação da técnica na quantificação Vírus para desenvolver vacinas 
contra influenza é um grande desafio o tamanho das partículas do vírus é difícil de 
detectar, proporcionalmente devido à identificação de um genoma viral que não é 
propício ao uso de corantes nucleicos fluorescente. Desenvolvimento de novos 
citômetros de fluxo equipados com Detectores FSC mais sensíveis permitiram uma 
identificação mais eficaz em moléculas menores, como o vírus influenza e nos casos de 
HIV 
Entre as alternativas desenvolvidas para melhorar a definição padrões de 
susceptibilidade a drogas e / ou automação, o FACS apareceu como principal recurso 
para testar a sensibilidade antimicrobiana de diferentes pessoas microrganismos, 
incluindo fungos. Esta é uma tecnologia importante para expansão e melhorar a 
capacidade de gerar laboratórios de microbiologia clínica resultados rápidos e 
confiáveis. Através do FC você podeentender mecanismos celulares e moleculares que 
controlam a diferenciação celular bactérias, reações fisiológicas pronunciadas nas 
bactérias e verificar respostas a antibióticos e outros produtos químicos citotóxicos. 
Através do processo A FC pode ser avaliada por alterações funcionais e metabólicas 
microrganismos bacterianos e identificar genes especificamente expressos sob certas 
condições em estruturas celulares. 
A análise citométrica do fluxo do ciclo celular das células tumorais também foi 
aplicado para examinar a agressividade dos meningiomas, pois esse método maior 
sensibilidade nas informações geradas e melhor precisão na taxa proliferação de células 
tumorais do que os dados fornecidos pela histologia tradicional. Meningiomas são o tipo 
mais comum de tumor do sistema nervoso central e responsável por até 30% de todos 
os tumores intracranianos primários. O desenvolvimento tumoral se origina nas 
meninges da medula espinhal e no cérebro. No entanto, esses tumores são 
classificados histologicamente como benignos e na maioria dos casos, a ressecção 
cirúrgica total do tumor pode ser realizada, no entanto, as recorrências tumorais variam 
entre 5 e 20%. Consequentemente, o citometria de fluxo através da identificação de 
marcadores biológicos, preferencialmente para a avaliação da atividade proliferativa do 
tumor é de grande relevância e tem implicações significativas para o prognóstico e 
tratamento de meningiomas cerebrais 
 
CONCLUSÃO 
A leucemia é um dos cânceres mais frequentes, com grandes chances de 
recuperação, graças aos avanços no tratamento e diagnóstico. A imunofenotipagem 
desempenha um papel importante no diagnóstico da detecção e identificação de 
leucemias e seus subtipos devido ao uso de anticorpos monoclonais que aumentam sua 
especificidade, o que é extremamente necessário no momento do diagnóstico e para 
determinar o protocolo de tratamento. Testes baseados na identificação de alterações 
genéticas eles também são considerados testes importantes porque foram identificados 
incidência significativa de alterações positivas associadas a alguns subtipos de 
leucemia 
A citometria de fluxo foi desenvolvida como instrumento poderoso para a 
descoberta de fenômenos celulares. Essa tecnologia, fornecendo quantificação precisa 
dos parâmetros celulares físicos (tamanho e granulometria) e produtos químicos 
(quantidade de proteína expressa, por exemplo), permite que as células de interesse 
são descobertas ou testadas em diferentes situações de pesquisa. Pode-se destacar, 
como ilustração de sua importância, a detecção de subpopulações de linfócitos em 
pacientes que sofrem de imunodeficiência adquirida (AIDS), um parâmetro essencial 
para acessar a condição e definir tratamentos mais específicos para cada paciente. Um 
dos dilemas mais importantes da pesquisa biológica é determinar mecanismos 
benéficos associados às respostas celulares a estímulos externos ou não se nos 
estágios iniciais os cientistas tentaram observar fenômenos, o grande desafio que 
enfrentamos hoje é explicar e interferir com eles fenômenos, principalmente para fins 
terapêuticos. Então técnicas de cultivo citometria de célula e fluxo são aliados poderosos 
para permitir ao pesquisador reproduzir o fenômeno observado em condições 
controladas e identificar maneiras envolveu transdução de sinal intracelular. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
REFERÊNCIAS 
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linfoide aguda. Candombá, 2009. 5. 
 
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Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, 
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M.; CAPUTO, L. F. G.; AMENDOEIRA, M. R. R. (Eds.) Conceitos e Métodos 
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Janeiro: Instituto Oswaldo Cruz, p.1-124, 2009.