5) Hotpotatoes sobre RT-PCR e qPCR

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5) Hotpotatoes sobre RT-PCR e qPCR
Quiz
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Qual das características, listadas abaixo, que representa um primer com maior especificidade?
A. Não foi dessa vez, tente novamente.   Ser formado por uma pequena sequência nucleotídeos (até 6 nucleotídeos).
B. Não foi dessa vez, tente novamente.   Anelar em mais de um organismo.
C. Não foi dessa vez, tente novamente.   Não ser uma sequência complementar ao DNA da PCR
D. ?   Anelar em apenas um organismo e em apenas um local do genoma deste organismo.
Em relação ao RT-PCR, marque a alternativa correta.
A. Não foi dessa vez, tente novamente.   É uma reação de PCR em tempo real.
B. Muito bem, você acertou!!!   É a análise que ocorre baseada em uma transcrição reversa seguida de uma reação de PCR.
C. ?   É uma amplificação onde se utiliza como molde uma molécula de DNA.
D. Não foi dessa vez, tente novamente.   É necessário transformar o RNA em cDNA, através da ação da enzima taq
polimerase.
Na reação de RT-PCR, o RNA é copiado em uma molécula de DNA complementar (cDNA) pela enzima:
A. ?   Taq DNA-polimerase
B. Não foi dessa vez, tente novamente.   RNA polimerase II
C. Muito bem, você acertou!!!   Transcriptase reversa
D. ?   Uracil-N-glicosilase
Em relação as análises de PCR em tempo real, marque a alternativa FALSA.
A. ?   Podem utilizar corantes fluorescentes que se intercalam na dupla de DNA.
B. ?   Podem utilizar sondas que quando hidrolisadas emitem fluorescência.
C. Muito bem, você acertou!!!   É realizada com equipamentos simples, utilizados na PCR convencional, e sem a necessidade
de ciclagem de diferentes temperaturas.
D. ?   Os resultados podem ser obtidos como positivo ou negativo ou como um resultado quantitativo.
A RT-PCR pode ser utilizada para a elucidação de diversas situações moleculares, analisando as afirmações abaixo, assinale a
alternativa que NÃO corresponde a uma das aplicações da RT-PCR.
A. Não foi dessa vez, tente novamente.   Detecção e quantificação da expressão de mRNA de um certo gene em diferentes
tecidos.
B. Não foi dessa vez, tente novamente.   Detecção de um vírus com genoma de RNA em uma amostra biológica do
hospedeiro.
C. ?   Avaliação da presença de variantes genéticas presentes no genoma humano.
D. Não foi dessa vez, tente novamente.   Comparação da expressão do mRNA de um gene em amostras contendo tecido
alterado e tecido normal.
Em relação ao diagnóstico da COVID-19 por RT-qPCR (rRT-PCR), assinale a alternativa falsa:
A. ?   O diagnóstico molecular da COVID-19 envolve a utilização de duas variações da PCR: transcrição reversa seguida de
PCR e a utilização da PCR em tempo real.
B. ?   O manual do CDC para diagnóstico da COVID-19 recomenda a utilização de três pares de primers e suas,
respectivas, sonda para sequências
do genoma viral. Além de um primer e sua sonda para o gene da RNAse P humana, utilizado como controle.
C. ?   Se não houver amplificação de nenhum fragmento, investigado para vírus, e também não houver amplificação do
controle interno. O resultado é considerado inválido, sendo necessário repetir o teste.
D. ?   Pela recomendação do CDC, para cada paciente todos os 4 pares de primers e suas, respectivas, sondas, devem ser
adicionados em um único poço da placa de amostras.
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PCR no diagnóstico da COVID-19
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