Aula Controle Microbiano 2020 PDF

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Lembre-se: crescimento é definido como um 
aumento no número de células em uma população.
Mas, em que situações 
precisamos controlar esse 
crescimento ?
E, como controlar ou 
inibir o crescimento 
microbiano ?
• Ação que impede a multiplicação dos 
microrganismos mas não os mata
Histórico: trabalhos de Louis Pasteur e Joseph Lister sobre fervura de
caldos, lavagem das mãos, etc... já evidenciavam preocupação com o
controle de populações de microorganismos
Importância: medicina e saúde, conservação de alimentos, limpeza de 
materiais, agricultura, nas indústrias, etc.
AÇÃO MICROBIOSTÁTICA
AÇÃO
MICROBIOCIDA
Ações CIDA e STÁTICA:
• Eliminação PARCIAL, que apenas REDUZ 
o número de microrganismos
• Eliminação TOTAL, que MATA todos os microrganismos 
Descontaminação: o tratamento de um objeto ou uma superfície, de modo a 
torná-los seguros a manipulação (com menor a carga microbiana e de 
sujeiras). Exemplo: Limpeza com água, sabão, escovas...
Desinfecção: uso de substâncias que matam microrganismos ou 
severamente
inibem seu crescimento em superfícies, alimentos, água. Exemplo: 
hipoclorito de sódio é um desinfetante eficaz para uma ampla variedade de 
aplicações.
Anti-sepsia: tipo particular de desinfecção que utilizam substâncias 
químicas em tecidos vivos. Exemplo: álcool ou iodo na pele antes de 
vacinas ou injetáveis
Esterilização: destruição de todas as formas de vida microbiana, 
incluindo endósporos
 Material crítico
 entra em contato com 
vasos sanguíneos ou tecidos 
livres de microorganismos
 Ex: instrumental cirúrgico
 Material semi-crítico
 entra em contato 
com mucosa ou pele 
não íntegra. 
 Ex: inaladores
 Material não crítico
 entra em contato com
 pele íntegra. 
 Ex: estetoscópio
Esterilização
Desinfecção
Limpeza
As exigências de se exercer uma Esterilização ou Desinfecção ou 
Limpeza são específicas e dependem do agente infeccioso e do 
local/material a ser controlado
• O mecanismo de ação depende do agente utilizado. Tem agentes 
que desnaturam proteínas, outros que oxidam biomoléculas, 
desintegram a célula, alteram a permeabilidade da membrana
plasmática, inibem síntese protéica, impedem formação estruturas 
celulares, inibem ação de enzimas, modificam o DNA e RNA, etc...
1.2 Filtração
1.3 Baixas
Temperaturas
1.6 Radiação
Ionizante
Não - Ionizante
1.1Calor
Úmido
Seco
Fervura
Autoclave
Pasteurização
Chama direta
Ar quente
1.4 Dessecação Eliminação de água Ex. Liofilização
1.5 Pressão Osmótica Ex. Salgamento
Calor Úmido: Fervura, pasteurização e autoclave. Mata por 
desnaturação
• Fervura: temperaturas acima 100°C matam células vegetativas. Mas 
algumas formas são resistentes (endósporos).
• Pasteurização: técnica utilizada para reduzir microrganismos em 
alimentos. Elevação da temperatura e resfriamento. Elimina
microrganismos patogênicos, diminui microrganismos em geral, 
prolongando a qualidade do produto refrigerado.
-Temperatura alta, tempo curto 70oC/20 seg.
-Temperatura baixa, tempo longo -4oC.
Pasteurização simples mata bactérias patogênicas e conserva o leite por 7 dias.
Já o processo UHT (ultra high temperature), típico do leite de caixinha, é mais 
radical: o leite é aquecido a 140 °C por até 8 segundos
1.1. Calor Úmido: Autoclave (121°C, 15 min): eliminação de todos os 
microrganismos, até de endósporos. Esterilização total.
Resistência elétrica
Fonte de Energia
Reservatório para Água
Reservatório para 
Materiais a serem 
esterilizados
Parafusos para 
fechamento da 
tampa
Válvula de segurança e ajuste de 
pressão
Manômetro
Controle da 
saída de ar
Autoclave vertical (laboratórios)
Autoclave horizontal (clínicas)
• Ação: oxidação e desnaturação de biomoléculas. 
• Menos eficiente que calor úmido, portanto exige maior tempo e temperatura.
Principais métodos de controle por calor seco:
 Esterilização em ar quente (Forno ou Estufa)
 Controle de microrganismos em materiais e instrumentos que deterioram 
na presença de calor e umidade. Desta forma utiliza-se Fornos ou 
Estufas em temperatura e tempos variados de acordo com o material. 
Exemplos: 121ºC/16 horas; 160ºC/02 horas; 170ºC/01 hora
 Incineração – queima total de 
produtos - processo drástico de 
eliminação de microrganismos que 
destrói inclusive o produto (material
hospitalar,carcaça de animais, etc)
 Chama direta - material que 
contém o micróbio é submetido
diretamente ao fogo. Também 
conhecido por FLAMBAGEM
Incineração
Esterilização em ar quente (Forno ou Estufa)
Flambagem
• Utilizadoparaesterilizarmateriaissensíveisao
calor (vitaminas, hormônios,..)
• Separa os microrganismos do líquidode
suspensão
•Filtros: apresentam diferentes tamanhos 
nos poros
•Filtros com poros menores - 0,01 m retém 
vírus eaté proteínas (grandes)
•FiltrosHEPA (High EfficiencyParticuleAir)
REFRIGERAÇÃO ATÉ 7ºC (GELADEIRAS): 
• induz a diminuição do metabolismo e possui efeito bacteriostático. Utilizado
na conservaçãode alimentos, drogas e culturas.
CONGELAMENTO - 196ºCEM BOTIJÕES COM NITROGÊNIO LÍQUIDO:
• Faz-se um congelamento lento, passando por uma etapa de -70ºC e depois 
-196ºC. Mantêm as características dos microrganismos e estes vivem após 
o descongelamento
CONGELAMENTO -20ºC (FREEZER):
• induz a redução do metabolismo e a dormência do microrganismo. É um 
método utilizado para conservar microrganismos, mas pode ser nocivo, pois 
forma cristais de gelo que podem romper as estruturas celulares.
1.4 DESSECAÇÃO
• Ação: retirada da água dos produtos, gera um efeito bacteriostático e 
interrompe o metabolismo microbiano, induzindo sua dormência
• A resistência à dessecação varia com a espécie e a forma de vida
• Utilizado na conservaçãode Alimentos
• Também conhecido como LIOFILIZAÇÃO
Retirada da água dos produtos 
leite em pó
Meios de culturaFrutas
• Adição de muito sal 
• Ação: plasmólise e morte celular.
• Utilizado há muito tempo para conservar alimentos. Exemplo: Bacalhau
• Fungos são mais resistentes a altas pressões osmóticas que bactérias.
• Esterilização por meio de radiações ionizantes ou não ionizantes
• Danifica DNA e proteínas
• Os efeitos dependem da intensidade, duração e distância da fonte
1.6. RADIAÇÃO
RADIAÇÃOIONIZANTE: RAIOSGAMA E RAIOSX
• Alta penetrabilidade e altíssima energia
• Efeitos nas células: formação de radicais livres e danos às 
biomoléculas
• Utilização: na esterilização de produtos farmacêuticos, materiais
descartáveis médicos,dentários, Ionização da água, etc.
RADIAÇÃO NÃO-IONIZANTE: LUZ UV (265NM)
• Baixa penetrabilidade, não atravessa vidros
• Efeitos nas células: formação de dímeros de timidina
• Utilização: esterilização de materiais descartáveis, de ambientes 
como capela fluxo laminar, purificação da água, etc
• A maioria dos agentes químicos promove desinfecção e não 
esterilização e nenhum desinfetante isolado é adequado para todas 
as circunstâncias
• Fatores que influenciam a açãode um desinfetante: 
concentração 
presença de matéria orgânica
pH
tempo de exposição
Antissépticos ou germicidas, são agentes químicos que matam ou inibem o 
crescimento de microrganismos, sendo atóxicos o suficiente para serem utilizados 
em tecidos vivos.
Sanitizantes são produtos químicos menos agressivos que desinfetantes, que 
reduzem o numero de microrganismos, mas não necessariamente
esterilizam o objeto. 
• GLUTARALDEÍDO é um dos agentes químicos esterilizantes
• ÓXIDO DE ETILENO: é um gás esterilizante que mata todos os
microrganismos, inclusive endósporos, mas requer longo período de
exposição (4 a 18 horas). É altamente penetrante. Usado para
esterilização de equipamentos e suprimentos em hospitais.
Gases esterilizantes são cancerígenos.
Esterilização a frio, um 
processo pelo
qual gases, como óxido 
de etileno, formaldeido
e acido peroxiacético,
são usados no controle 
microbiano em um 
aparelho que se parece 
com uma autoclave
Fatores que interferem na efetividade do antimicrobiano:
• Quantidadede microrganismos
• Tipo de microrganismos: espécie, grupo microbiano
• Fase da vida do microrganismos: endósporos (resistência maior)
• Influências ambientais: biofilmes, matéria orgânica, pH, etc
• Tempo de exposição do microrganismo à droga
• Concentração do antimicrobiano
Antimicrobianos são substâncias produzidas por microrganismos 
como como bactérias e fungos que matam ou inibem o desenvolvimento 
de outros microrganismos, principalmente o das bactérias.
Como testar in vitro se uma 
substância química inibe o 
crescimento microbiano ?
(1) TESTES DE DILUIÇÃO
TESTE: Diluição de diferentes concentrações da 
substância em meios de cultura líquido 
contendo o microrganismo e a contagem do 
número de células em tempos, e determinação 
da Curva de Morte
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 C
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Crescimento 
Zero
Contagem do número de microrganismos 
para verificação da taxa de morte da 
população ao longo do tempo
Ex. Tempo 0: 109 bactérias + Amocilinina
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Streptomyces em presença de Cetoconazol
(2) MÉTODO DE DISCO-DIFUSÃO
TESTE: Realizar o Plaqueamento do microrganismo nas 3 placas de petri
e colocar discos de papel impregnados com diferentes concentrações da 
substância. Observar: maior HALO de inibição significa maior efeito 
inibitório do microrganismo. O halo significa ausência do crescimento.
Comparação com 
base em Tabela 
Internacional de 
medidas para 
antimicrobianos e 
microrganismos
Medida em mm
ou cm do raio 
de cada Halo
1. Indique se a contagem de microrganismos, por exemplo para construção de 
uma curva de morte, por meio da turbidimetria (espectrofotômetria), é 
uma medida direta ou indireta do crescimento. E explique o que se deve 
fazer antes desta medida para se relacionar os valores de turbidez com o 
número de células.
2. Conceitue esterilização e diferencie controle microbiano por autoclave e por 
pasteurização.
3. Indique as finalidades do uso de radiação não-ionizante, de radiação 
ionizante e seus respectivos efeitos danosos às células microbianas.
4. Os filtros removem microrganismos do ar ou de líquidos? Explique em que 
situação a filtração necessita ser utilizada.
5. Diferencie agentes químicos de ação –cida e de ação –stático e Diferencie 
agentes sanitizantes e antissépticos.