Aula 4 - Espectroscopia de Absorção no Uv-Vis

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Espectrofotometria de 
Absorção no Uv-Vis
Disciplina: Análise Instrumental
Professor: Carlos Eduardo Bonancêa
Espectrofotometria de 
Absorção no Uv-Vis
Para caracterizar as absorções temos a lei de 
Lambert-Beer:
Transmitância = (I / I0) 
% Transmitância = (I / I0)  100% 
I = intensidade de luz transmitida 
I0 = intensidade de luz incidente 
Lei de Beer:
A intensidade de luz absorvida mede-se pelo porcentagem da luz
incidente que atravessa a amostra
Para líquidos ou sólidos transparentes 
O espectro de absorção: é obtido através do monitoramento da intensidade da radiação
incidente (I0) e transmitida (I).
Teoria da Espectrofotometria
Teoria da Espectrofotometria
A absorção é função do número de moléculas que absorvem (concentração).
Absorbância = -log(Transmitância) =  . b . c
A =  . b . c
Esta relação se conhece como Lei de Beer-Lambert e permite corrigir a
dependência da concentração e outros fatores operacionais ao comparar
distintos compostos:
Onde:
 = absortividade molar (característica da molécula)
c = concentração molar da espécie que absorve 
b = espessura da amostra atravessada pelo feixe de luz (habitualmente 1 cm) 
Para líquidos ou sólidos transparentes 
Calcule a absorbância sabendo-se que a transmitância é:
a) 0,0290
b) 3,15%
c) 5,34%
d) 0,065 
Calcule a transmitância (%) partindo-se dos seguintes 
valores de absorbância:
a) 0,912
b) 0,027
c) 1,230
Exercícios
A absorbância é muito importante porque ela é diretamente proporcional à 
concentração, c, de espécies absorventes de luz na amostra
A =  . b . c
Desvios da Lei de Beer-Lambert
LIMITAÇÃO REAL
• A Lei é válida somente para baixas 
concentrações
• Altas concentrações = Interação entre as 
moléculas afeta a distribuição de carga, 
alterando o coeficiente de absortividade 
molar.
AA
C
Faixa ótima
de trabalho
DESVIO QUÍMICO
Surgem quando um analito se dissocia, se associa ou reage com um 
solvente para dar um produto que tem um espectro de absorção 
diferente
Desvios da Lei de Beer
• DESVIO INSTRUMENTAL
• A lei só é válida para radiação monocromática, ou seja, para um único 
comprimento de onda ()
Como minimizar o desvio?
• Escolher a região onde o  é constante na região selecionada
Análises Quantitativas
Calibração
C
A
2,5 5 10
0.200
0.400
0.800
0
6,25
0.500
Amostra
A = 0,50
CALIBRAÇÃO DE MÉTODOS INSTRUMENTAIS
1- Introdução da Análise Instrumental
C
A
X1 X2
Y1
Y2
m =
X2 – X1
Equação de uma reta: Y = mx + b
Coeficiente
angular
Coeficiente
linear 
Coeficiente
angular
Coeficiente
linear 
m
Y2 – Y1
Introdução à Análise Instrumental
• Adição de Padrão
Am
Pd Am
Sinal Analítico
Amostra
Sinal Analítico
Amostra + Padrão 
+
Introdução à Análise Instrumental
• Padrão Interno
Sinal Analítico
Sinal Analítico
Sinal Analítico
Pd
Bco
Pds
Am
Absorbância 0,10 0,20 0,50 0,80 1,00
Concentração
(mg/mL)
10,0 20,0 50,0 80,0 100,0
1 - O Químico responsável pelo laboratório de controle de qualidade de 
uma indústria de tintas preparou soluções de concentração conhecida 
de um corante com o objetivo de determinar a concentração do mesmo 
em lotes preparados pela indústria. A técnica escolhida foi a 
espectrofotometria de absorção e o comprimento de onda utilizado foi 
de 565,0 nm.
a) Considerando os dados, abaixo, obtidos pelo analista, construa a 
curva de calibração.
b) Utilizando a curva de calibração construída calcule a concentração de 
uma amostra cujo valor de absorbância medido nas mesmas condições 
foi 0,45. (indique, graficamente, na curva de calibração, não basta fazer 
o cálculo).
2 - Uma solução de uma dada amostra apresenta absortividade de 200 Foi
analisada por espectroscopia na região do UV/Vis em um comprimento de
onda na qual se obedece à lei Lambert Beer na concentração empregada
nesse experimento. Considere que o caminho óptico é de 1 mm, e a
absorbância observada é 0,4. Empregando esse resultado na equação de
Lambert-Beer, conclui-se que a concentração da amostra é,
aproximadamente.
a) 0,01 mol. L-1
b) 0,02 mol. L-1
c) 0,002 mol. L-1
d) 8,0 mol. L-1
e) 80 mol. L-1
3 - Um estudante dissolveu devidamente, 0,519 g de amostra e diluiu para 50,0 mL.
Em seguida, tratou uma alíquota de 25 mL para eliminar possíveis interferentes na
análise e adicionou 2,3-quinoxalineditiol. Após ajustar o volume para 50,0 mL, ele
obteve as seguintes absorvâncias e absortividades, utilizando cubetas de 1,00 cm em
656 nm. Calcule a concentração de cobalto e níquel na mistura. DADOS: MMCo = 58,9
g/mol e MMNi = 58,7 g/mol.