Prática do Antibiograma: Sensibilidade aos Antibióticos

Prévia do material em texto

ANTIBIOGRAMA
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• É um exame que tem como objetivo verificar a
sensibilidade ou resistência de determinado
microrganismo a vários antibióticos;
• A informação obtida é usada para determinar qual o
antimicrobiano e a quantidade necessária a ser
usada na quimioterapia.
Antibiograma
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• Basicamente existem dois métodos para determinar a sensibilidade de uma
bactéria aos agentes antimicrobianos:
• Diluição seriada em tubos
• Difusão em disco – método mais comum – A
maioria dos laboratórios usa o Método de Kirby-
Bauer que emprega discos de alta potência (discos
de papel com a droga incorporada) em Ágar
Mueller-Hinton.
Ágar Mueller-Hinton
Vantagens:
• Fácil de ser realizado
• Baixo custo 
• Alta confiabilidade dos 
resultados
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• Existem também testes com o objetivo de medir a atividade antimicrobiana
de um antibiótico. Utiliza métodos de diluição:
• Concentração inibitória mínima (CIM) – menor quantidade NECESSÁRIA do antibiótico
para inibir o crescimento de determinado microrganismo;
• Concentração bactericida mínima (CBM) – concentração mínima necessária do
antibiótico capaz de eliminar 99,9% das bactérias.
CBM/CIM = 1 >>>>>> BACTERICIDA - são substâncias que matam de forma direta os 
microrganismos
CBM/CIM > 1 >>>>>> BACTERIOSTÁTICO – são substancias que impede a multiplicação das 
bactérias, mas não as matam
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• Método difusão em disco - Método de Kirby-Bauer
• Nesta prática usaremos o método de Kirby-Bauer, amplamente empregado como
padrão para a realização dos antibiogramas.
• É um método qualitativo que usa concentrações preestabelecidas dos
antimicrobianos.
• Limitações do Método de Kirby-Bauer
• As técnicas de difusão não são aplicáveis a microrganismos de crescimento lento.
• Se for necessária uma incubação prolongada para a obtenção de um crescimento
satisfatório e, assim, constatar-se um halo de inibição detectável, o antibiótico
pode deteriorar-se a ponto de gerar leituras imprecisas.
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA 
• Materiais necessários 
• Placa de Petri contendo Ágar Mueller-Hinton 
• 140 x 15 mm – testar até 12 antibióticos 
• 90 x 15 mm – testar até 6 antibióticos
• Antibióticos impregnados em discos de papel-filtro
• Estufa a 37°C
• Escala Mac Farland 0,5 - equivale a uma concentração de aproximadamente 108 células/mℓ
• Bico de Bunsen
• Pinças estéreis 
• Réguas
• Swabs estéreis 
• Solução salina ou soro fisiológico 0,85% estéreis 
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• Escala McFarland
1,5 x 108 = 150.000.000 
UFC/mL 
É uma suspensão de Sulfato de Bário que tem por finalidade 
padronizar a concentração bacteriana do inóculo a ser utilizado 
durante um processo
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA 
• Preparação do inóculo 
Obter uma turvação correspondente a 0,5 da escala de
McFarland. Isto significa que há aproximadamente 1,5 x
108 unidades formadoras de colônias (UFC)/mL.
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA 
• Procedimentos
• Umedecer, em condições assépticas, um
swab no tubo com o inóculo padronizado
e semear por toda a superfície da placa de
Petri, visando obter um crescimento em
toda a superfície do meio.
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• Procedimentos
• Após a semeadura, os discos são colocados sobre
a superfície do ágar inoculado e levemente
pressionados com auxílio de uma pinça ou bastão
estéril de modo que fiquem equidistantes na
superfície do meio;
• Os discos de antibióticos usados para este teste
também são padronizados para conter uma
quantidade específica de antibióticos, que, na
maioria das vezes, está marcada na superfície
deles, conforme especificações do fabricante.
• Incubar as placas a 37°C, pelo mínimo de 18 horas
e máximo de 48 horas.
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• Interpretação dos resultados
• Observar a placa do antibiograma,
verificando a presença ou a ausência de
halos de inibição do crescimento em
torno dos discos de antibióticos.
• A zona clara de inibição (raio do halo de
inibição) ao redor de cada disco é medida
em milímetros, com o auxílio de régua, e
a medida é comparada com uma tabela-
padrão de interpretação.
PRÁTICA DO ANTIBIOGRAMA
• ANTIBIOGRAMA
• Interpretação dos resultados
Enterobactérias
Responda
• Com relação aos testes de sensibilidade aos antibióticos, julgue as
afirmações abaixo com verdadeiro (V) e falso (F):
• ( ) - O antibiograma por métodos de diluição tem como objetivo determinar a
concentração do antimicrobiano que inibe visivelmente o crescimento bacteriano.
• ( ) - Antibiograma pelo método da difusão, segundo Kirby-Bauer, tem como objetivo
avaliar quantitativamente a concentração bactericida de um antimicrobiano.
• ( ) - Os objetivos são detectar possível resistência ao medicamento em patógenos
comuns e assegurar a suscetibilidade a drogas de escolha para infecções específicas.
• ( ) - No método da difusão do disco, os discos especiais de papel-filtro impregnados
com concentração padronizada de antibiótico são colocados sobre uma placa de ágar
MacConkey contendo o inóculo.
FIM