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BRENDA RODRIGUES MICROBIOLOGIA 3° SEMESTRE • A Microbiologia estuda os organismos microscópicos e suas atividades biológicas, verificando as diversas formas, estruturas, reprodução, aspectos bioquímico- fisiológicos e o seu relacionamento com o hospedeiro, podendo ser benéficas ou prejudiciais • Todas as células vivas são, basicamente, compostas de protoplasma, complexo orgânico coloidal constituído principalmente por proteínas, lipídeos e ácidos nucleicos, membranas ou paredes celulares, e um núcleo ou substância nuclear equivalente, e todos os sistemas biológicos possuem a habilidade de reprodução, ingestão, excreção. reagir ou se adaptar às alterações do meio ambiente, além de ser susceptível a mutações O que são os microrganismos? • São um conjunto de seres vivos que, em geral, são individualmente pequenos para serem visualizados a olho nu, capazes de existirem como uma célula única ou em agrupamentos, onde cada célula representa um único indivíduo por serem independentes em seus processos vitais • Os principais grupos de microrganismos estão distribuídos no Reino Protista, Reino Fungi e Reino Monera, além dos vírus que, apesar de não serem considerados organismos vivos e não possuírem partículas, são considerados o ‘’limite entre o vivo e o não vivo’’ • Alguns agentes infecciosos que, a depender do ponto de vista, não são considerados seres vivos, como os vírus, viróides, virusóides e príons são estudados na Microbiologia História da Microbiologia Os ancestrais bacterianos foram as primeiras células vivas a aparecem na Terra Ano Descobertas e observações Sem data especifica Egípcios: Protegiam tumbas com esporos de Aspergillus. (1000 a.C. – 600 a.C.) Bíblia: Descrição da lepra, proibição do consumo de certas carnes (~400aC) Grécia: Tucídides verificou que os pacientes que sobreviviam à praga ficavam protegidos e podiam cuidar dos doentes. (50 a.C.) China: uso de sandálias mofadas para o controle de infecções bacterianas nos pés. 100 d.C Roma: Marcus Varro alertava que diminutas criaturas de certos ambientes entravam no corpo e causavam doenças. 1665 Roobert Hooke observou uma fatia de cortiça em um microscópio rudimentar, e declarou que as menores unidades estruturais da vida eram pequenas caixas ou ‘’células’’ Início da teoria celular (todas as coisas vivas são compostas de células) após Hooke ter observado células individuais em um microscópio aprimorado 1673 Anton van Leeuwenhoek foi o primeiro a observar microrganismos vivos (‘’animalículos’’) através de lentes de aumento; identificou como bactérias e protozoários Confeccionou o primeiro microscópio 1668 Franscesco Redi demonstrou que as larvas não eram geradas espontaneamente através de um experimento utilizando jarras com carne em decomposição – refutou a abiogênese 1° jarra: aberta, permitindo que as moscas postassem ovos que, posteriormente, desenvolveram—se em larvas 2° jarra: fechada; as moscas não atingem o interior do frasco, consequentemente não surgem larvas Mikros (‘’pequeno’’); bios (‘’vida’’), logos (‘’ciência’’) introdução, história, importância e nomenclatura BRENDA RODRIGUES MICROBIOLOGIA 3° SEMESTRE Antagonistas de Redi argumentavam que o ar fresco era necessário para que ocorresse a geração espontânea (organismos vivos poderiam surgir de matéria inanimada) Redi realiza um 2° experimento utilizando uma jarra coberta com uma fina rede; nenhuma larva apareceu na jarra embora o ar estivesse presente 1745 John Needham descobre que mesmo após ter aquecido caldos antes de armazená-los em frascos abertos, as soluções resfriadas em pouco tempo ficaram repletas de microrganismos; assim, Needham considerou que os micróbios se desenvolviam espontaneamente a partir de caldos Lazzaro Spallanzani sugeriu que os microrganismos no ar entraram nas soluções de Needham após a fervura, assim, os caldos aquecidos após serem lacrados em um frasco não apresentavam desenvolvimento microbiano X Needham respondeu que a força vital necessária para a geração espontânea tinha sido destruída pelo calor e mantida fora dos frascos As observações de Spallanzani foram criticadas com o argumento de que não tinha oxigênio suficiente nos frascos lacrados para o desenvolvimento da vida microbiana 1796 Edward Jenner elaborou a primeira vacina, a da varíola, causada pelo Orthopoxvirus variolae utilizando o Cowpow vírus inoculado; a proteção contra a doença fornecida pela vacinação é chamada de imunidade Pasteur define o termo ‘’vacina’’ (vacca significa vaca; o termo vacina é em homenagem ao trabalho de Jenner) – culturas de microrganismos avirulentos utilizados para inoculação preventiva 1858 Rudolf Virchow introduziu o conceito de biogênese (células vivas somente podem surgir a partir de células preexistentes) A idade de ouro da Microbiologia 1861 – 1864 Louis Pasteur derrubou a teoria da abiogênese (geração espontânea) Pasteur encheu frascos com abertura em forma de pescoço curto com caldo de carne e ferveu o conteúdo; Alguns esfriaram abertos e em poucos dias estavam contaminados com micróbios; outros frascos, lacrados após a fervura, estavam livres de microrganismos; esse experimento permitiu que Pasteur fundamentasse que os micróbios do ar eram os agentes responsáveis pela contaminação da matéria não viva; Em seguida, Pasteur colocou caldo em frascos de pescoço longo e abertura terminal, dobrou os pescoços formando curvas no formato de um S e, posteriormente, foram fervidos e resfriados O meio de cultura não apodreceu e não apresentou sinais de vida – o pescoço curvado capturou todos os microrganismos para que pudessem contaminar o meio de cultura. Pasteur mostrou que os microrganismos podem estar presentes na matéria não viva, e demonstrou que a vida microbiana pode ser destruída pelo calor, assim, o surgimento da vida ‘’espontânea’’ em soluções não vivas pode ser atribuída aos microrganismos que já estavam presentes no ar e nos próprios fluidos Estabeleceu os ‘’Fundamentos da teoria Microbiológica da doença’’ (toda doença infecciosa era causada por um microrganismo que pode ser isolado e cultivado, em cultura pura, no laboratório, podendo produzir uma doença quando inoculada em animal sensível e, posteriormente, sendo possível a recuperação dos animais experimentalmente infectados) Descobriu a vacina antirrábica (raiva) Introduziu medidas de assepsia em práticas médicas hospitalares Desenvolveu a pasteurização (processo de aquecimento usado para matar bactérias em algumas bebidas alcóolicas e no leite) a partir do questionamento sobre o por que o vinho e a cerveja azedavam; as leveduras fermentam açúcares a etanol na ausência de ar e que as bactérias podem oxidar o álcool a ácido acético (vinagre) na presença de ar. 1867 Joseph Lister introduziu a cirurgia asséptica – utilizou uma solução de fenol como agente antisséptico; isso reduziu o número de mortes por infecções pós-operatórias 1876 - 1882 Robert Koch apresentou a Teoria do germe da doença (Postulados de Koch) onde estabeleceu 4 critérios para associar um determinado agente etiológico a causa de uma doença Koch descobriu bactérias em forma de bacilos (Bacillus anthracis) BRENDA RODRIGUES MICROBIOLOGIA 3° SEMESTRE 1 – Associação constante patógeno- hospedeiro O microrganismo deve estar associado com a doença em todas as plantas sintomáticas 2 – Isolamento / cultivo O microrganismo deve ser isolado da planta doente e cultivado em cultura pura 3 – Inoculação do organismo em plantas sadias O microrganismo em cultura pura deve ser inoculado sobre plantas sadias (mesma espécie ou variedade) e produzir a mesma doença nas plantas inoculadas 4 – Reisolamento do patógeno O microrganismo deve ser reisolado da planta inoculadaartificialmente e corresponder, em todas as suas características, com o isolado das lesões Limitações atuais dos postulados de Koch Algumas bactérias especificas não podem ser ‘’cultivadas em cultura pura’’ O agente etiológico aparece tanto em pessoas saudáveis quanto em pessoas doentes – invalida o 1° postulado, por exemplo, ainda não haviam sido descobertas doenças víricas, pois nem todos os vírus provocavam doenças em todos os indivíduos infectados Não há modelo animal da infecção por algumas bactérias em particular Descobriu o agente etiológico da tuberculose, o Bacilo de Koch (Mycobacterium tuberculosis) Denominou e descreveu as células Desenvolveu o primeiro microscópio composto (múltiplas lentes) Crescimento de bactérias em meios sólidos (meios de cultura) Robert Koch anunciou o uso de ágar sólido como meio de cultura 1879 – 1982 Neisser descreveu o organismo e Leistikow e Loeffler o cultivaram em 1982, quando recebeu a denominação de Neisseria gonorrhoea 1880 Martinus Beijerinck e Sergei Winogradsky demonstram como as bactérias ajudam a reciclar os elementos vitais do solo e da atmosfera Dá origem ao termo ‘’ecologia microbiana’’ – estudos das relacões entre microrganismos e seu ambiente Apresenta vários ramos, incluindo os estudos de como as populações microbianas interagem com plantas e animais nos diferentes ambientes, a preocupação com a poluição das águas e a presença dos compostos tóxicos no ambiente Os microrganismos são os principais responsáveis pela conversão do carbono, nitrogênio, oxigênio, enxofre e fósforo em formas utilizáveis por plantas e animais, além de devolverem o dióxido de carbono para atmosfera através da decomposição, além de permitir o uso pelas algas, cianobactérias e plantas superiores na fotossíntese para produzir carboidratos; também são utilizados no tratamento de esgoto convertendo líquidos e materiais orgânicos em produtos secundários 1881 Juan Carlos Finlay descobriu que o mosquito Aedes aegypti era o hospedeiro intermediário do parasito da febre amarela 1883 – 1884 Robert Koch descobriu o Vibrio cholerae, agente etiológico da cólera 1884 Desenvolvimento do método de Coloração de Gram por Christian Gram Macrófago como modelo para o ensino da fagocitose descrito por Metchnikoff Escherichia coli descoberta por Theodor Escherich ao investigar microrganismos intestinais de bebês e crianças 1887 Placa de Petri (peça de vidro/plástico utilizada em laboratórios para desenvolver meios de cultura e realizar reações em escala reduzida) 1889 Kitasato Shibasaburo o Clostridium tetani de um paciente com tétano 1890 Emil Adolf von Behring descobriu que a imunidade à difteria poderia ser produzida injetando-se em animais a toxina da difteria neutralizada por antitoxinas Paul Ehrlich fomentou a Teoria da Imunidade a partir da investigação sobre a formação de anticorpos no organismo levando a descoberta da imunidade de cadeia lateral, baseada na idéia de que as células sanguíneas possuem cadeias laterais (grupos ’Balas mágicas’’ – substâncias que se ligassem a "receptores específicos" na superfície de germes importantes e que, ao serem administradas, matariam apenas os germes aos quais se ligam, BRENDA RODRIGUES MICROBIOLOGIA 3° SEMESTRE químicos) que se unem a certos grupos químicos dos agentes malignos deixando intactas as células do organismo hospedeiro. 1892 Sergei Winogradsky isolou e estudou as bactérias do ciclo do enxofre 1898 O género Shigella foi descoberto como sendo o responsável pela disenteria bacilar por Kiyoshi Shiga 1910 Descoberta do salvarsan, agente quimioterápico derivado de arsênico, efetivo contra a sífilis Antes da descoberta do salvarsan o único químico conhecido era o quinino, usado no tratamento da malária 1928 Descoberta da Penicilina por Alexander Fleming, o primeiro antibiótico usado em humanos produzido pelo fungo Penicillium chrysogenum 1944 Avery, MacLeod e McCarty: identificaram o princípio transformante de Griffith; o DNA é o material genético 1950 (década) Estreptomicina Etapas químicas do ciclo de Krebs Cultivo de poliovírus em culturas celulares Controle genético de reacões bioquímicas 1953 Descoberta da estrutura do DNA (dupla-hélice) por Francis Crick, James Watson e Maurice Wilkins 1960 (década) Tolerância imune adquirida 1962 Edelman e seus colegas e Rodney Robert Porter produziram avanços fundamentais na compreensão da estrutura química do anticorpo 1980 (década) Técnica para a producão de anticorpos monoclonais (único puro) Genética da producão de anticorpos Genes causadores de câncer (oncogenes) 1981 Teoria endossimbiótica foi proposta por Lynn Margulis e admite que algumas organelas (mitocôndrias e cloroplastos) existentes nas células eucarióticas surgiram graças a uma associação simbiótica (interação entre duas espécies que vivem juntas) 1982 Dmitri Iwanowski relatou que o organismo que causava a doença do mosaico no tabaco era tão pequeno que podia atravessar filtros finos o bastante para reter todas as bactérias – descoberta da Virologia 1983 Criação da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR em tempo real ou Qpcr) por Kary Mullis 1988 Biorremedição – cientistas utilizam micróbios para limpar poluentes e resíduos tóxicos produzidos por processos industriais, podendo utilizar os poluentes como fontes de energia, na produção de enzimas que quebram toxinas em substancias menos nocivas Os micróbios mais utilizados são as espécies dos gêneros Pseudomonas e Bacillus (usados em detergentes domésticos para remoção de manchas) A bactéria Bacillus thuringiensis tem sido utilizada no controle de pragas sendo pulverizada sobre as plantações, consequentemente produzindo cristais proteicos tóxicos para o sistema digestório dos insetos 1909 Carlos Chagas descreveu o Trypanosoma Cruzi, protozoário causador da Doença de Chagas 1910 Anunciada a cura da Sífilis por Paul Ehrlich 1911 Peyton Rous induziu a geração de tumores sólidos em galinhas utilizando um extrato livre de células provenientes de um sarcoma dessas aves; descoberta do Vírus de Sarcoma de Rous (Prêmio Nobel 1966) 1933 Rebecca Lancefield propôs que os estreptococos fossem classificados de acordo com sorotipos (variantes dentro de uma espécie) com base em componentes presentes nas paredes celulares das bactérias 1935 Wendell Stanley demonstra que o vírus do mosaico do tabaco (TMV – tobacco mosaic vírus) era diferente dos outros micróbios, simples e homogêneo, e que poderia ser cristalizado como um composto químico – facilitou o estudo da estrutura e da química viral 1940 (década) George W. Beadle e Edward L. Tatum demonstraram a relacão entre genes e enzimas; DNA foi estabelecido como o material hereditário por Oswald Avery, Colin MacLeod e Maclyn McCarty BRENDA RODRIGUES MICROBIOLOGIA 3° SEMESTRE Joshua Lederberg e Edward L. Tatum descobriram que o material genético pode ser transferido de uma bactéria a outra por meio de um processo chamado de conjugação 1950 James Watson e Francis Crick propuseram um modelo para a estrutura e replicacão do DNA 1960 Descoberta dos interferons, substâncias geradas pelo sistema imune do próprio corpo e que inibem a replicação viral Paul Berg demonstrou que fragmentos do DNA (genes) que codificam proteínas podem ser ligados ao DNA bacteriano; o híbrido resultante foi o primeiro DNA recombinante (rDNA) A tecnologia do rDNA insere DNA recombinante em micróbios para a produção de grandes quantidades de uma proteína desejada Francois Jacob e Jacques Monod descobriram o RNA mensageiro e, posteriormente, fizeram as principais descobertas sobre a regulacão da funcão dos genes em bactérias. Desvendaram o código genético – possibilitou a compreensão de comoa informacão para a síntese proteica no RNA mensageiro era traduzida nas sequencias de aminoácidos para produzir as proteínas 1990 (década) Terapia gênica – inserção de um gene ausente ou substituição de um gene defeituoso em células humanas utilizando um vírus inofensivo para transportar o gene ausente ou um novo gene para o interior de certas células hospedeiras Tem sido usada para tratar pacientes com deficiência de adenosina desaminase (ASA), uma das causas da imunodeficiência combinada grave (SCID, severe combined immunodeficiency disease) em que as células do sistema imune são inativadas ou perdidas, além da distrofia muscular de Duchenne, fibrose cística e a deficiência do receptor LDL Também é utilizada na agricultura, para melhorar a aparência, o sabor e aumentar a durabilidade de frutos e vegetais, resistência a seca,ao ataque de insetos, a doenças microbianas e ao aumento da tolerância a altas temperaturas de plantas cultivadas Primeiros transplantes bem-sucedidos utilizando fármacos imunossupressores Enzimas que regulam o crescimento vegetal (proteínas-cinase) Separação de genes em diferentes segmentos de DNA Reacões em cadeia da polimerase que amplificam (produzem múltiplas cópias) o DNA Reconhecimento de células T citotóxicas de células infectadas por vírus antes de sua destruicão 1997 Heide Schulz descobre a bactéria Thiomargarita namibiensis no lodo, na costa africana, grade o bastante (0,2mm) para ser vista a olho nú 2000 (década) Canais de água e íons nas membranas plasmáticas Helicobacter pylori como a causa de úlceras pépticas Mecanismo do RNA de interferência (RNAi), ou silenciamento gênico pelo RNA Medicamentos sintéticos e modernidade ‘’Quimioterapia’’ – tratamento de uma doença através da utilização de substancias químicas produzidas naturalmente ‘’Antibióticos’’ – substâncias químicas produzidas naturalmente por bactérias e fungos para atuar contra outros organismos ‘’Medicamentos sintéticos’’ – agentes quimioterápicos preparados a partir de compostos químicos em laboratório Importância dos microrganismos, benefícios e malefícios • Os microrganismos desempenham diversos papéis importantes e estão presentes em diversos processos, como: • São componentes da microbiota presente em animais e plantas, auxiliando no equilíbrio do BRENDA RODRIGUES MICROBIOLOGIA 3° SEMESTRE funcionamento corpóreo, além de estar associado às funções cognitivas, sistema imunológico, etc. • Síntese de vitaminas, incluindo as do complexo B para o metabolismo e as do complexo K para a coagulação do sangue • Presentes em produtos microbiológicos ‘’naturais’’, como as bebidas alcoólicas, queijo, vinagre, pães, iogurte; além disso, as enzimas dos micróbios podem ser manipuladas de forma com que esses microrganismos produzam substâncias que normalmente não sintetizam, incluindo celulose, substancias que auxiliam a digestão e outras que favorecem a limpeza de drenos, além de produtos terapêuticos importantes • Manutenção do equilíbrio ambiental por estarem presentes em uma série de processos geoquímicos, como o ciclo do carbono e do nitrogênio através da realização da reciclagem de restos mortais através da decomposição; • Produção de oxigênio através dos organismos aquáticos fotossintetizantes, os fitoplânctons, que formam a base de toda a cadeia alimentar nos sistemas aquáticos; • Processos biotecnológicos, como a engenharia genética, a qual permite a ‘’criação’’ de novos microrganismos de variáveis capacidades metabólicas e auxiliar na pesquisa genética ou transgênica; • Além dos que naturalmente habitam o corpo, existem os que são manipulados para a produção de remédios e vacinas e que atuam na prevenção e tratamento de doenças. • Presentes em aplicações comerciais, como a síntese de produtos químicos como vitaminas, ácidos orgânicos, enzimas, álcoois e fármacos • Porém apesar de tantos benefícios, os microrganismos podem trazer prejuízos para o ser humano, como é o caso das doenças causadas bactérias, fungos e/ou por protozoários, além das pragas que podem atingir a pecuária e a agricultura, causando prejuízo econômico, e a resistência antimicrobiana, relacionada principalmente ao uso indevido de antibióticos, considerada uma preocupação crescente da saúde pública mundial. Nomenclatura • Foi estabelecido em 1735 por Carolus Linnaeus • Designa para cada organismo dois nomes, o gênero – primeiro nome, sempre iniciado com a letra maiúscula – e o epiteto especifico – segundo nome, designa o nome das espécies com letra minúscula – ambos escritos em itálico e sublinhados o Após um nome cientifico ter sido mencionado uma vez, ele pode ser abreviado com a inicial do gênero seguida pelo epiteto especifico o Além de designar o organismo, o nome científico pode descreve-lo, homenagear um pesquisador ou identificar o habitat de uma espécie Exemplo: Staphylococcus aureus; • Staphylo- descreve o arranjo em cacho das células destas bactérias; -coccus indica que as células tem a forma semelhante a esferas; aureus é o epiteto especifico, significa ouro, em latim, a cor de muitas colônias dessa bactéria Exemplo: Escherichia coli • O gênero dessa bactéria recebeu esse nome em homenagem ao cientista Theodor Escherich; seu epiteto específico, coli, está relacionado ao fato de a E. coli habitar o colo, ou o intestino grosso Exemplo: Streptococcus pyogenes • Strepto- descreve o arranjo das células em cadeias; pyo- é o epiteto especifico, significa que produz pus
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