Apresentação "Astrócitos Hipotalâmicos, diferenças entre machos e fêmeas"

Prévia do material em texto

Astrócitos Hipotalâmicos
Diferenças entre machos e fêmeas
Pumed
“hypothalamic astrocyte”
● 1126 itens
● Resultados por ano:
- 1989: 5
- 1990: 20
- 1995: 37
- 2000: 38
- 2010: 39
- 2015: 62
- 2018: 20
Resposta astrocitária ao ganho de peso
Analisar a relação entre alterações nos níveis de:
● lipídios na circulação 
● marcadores inflamatórios 
em resposta à supernutrição de ♂ e ♀ neonatos 
em:
● 10, 50 e 150 dias
Para entender melhor a resposta hipotalâmica 
diferencial de ♂ e ♀ a sinais metabólicos:
● cultura primária de astrócitos 
- para analisar sua resposta a ác. graxos
- para determinar se o estradiol poderia estar 
envolvido na modulação dessa resposta
Objetivos do artigo
Modelo de Supernutrição em Neonatos 
Ninhadas de 8 ou 12
Dia 0: separação das ninhadas
Nascidos em um intervalo máximo de 12h
Cada ninhada final era proveniente de pelo menos 3 ninhadas iniciais diferentes
Dia 21: filhotes separados das mães
2 animais por caixa de acordo com o sexo e com o tamanho da ninhada final
Pesados semanalmente
Eutanasiados nos dias 10, 50 e 150
Resultados
♂ e ♀ de 10 dias das ninhadas de 4 animais: 
● Pesavam + 
● + tecido adiposo
● + leptina sérica
● Maiores níveis de glicose e de insulina
● Menos TNF-α na circulação
♂ e ♀ de 50 dias: 
● Sem diferença entre os parâmetros
♂ e ♀ de 150 dias das ninhadas de 4 animais: 
● ♂ voltam a ter um peso maior
● ♀ não são afetadas
Níveis de triacilglicerol 
na circulação:
- ↑ em ♂ da 
ninhada menor
♂ e ♀ de 10 dias da ninhada 
menor pesavam +:
- + leptina hipotalâmica
Interação entre sexo e tamanho 
da ninhada nos níveis 
hipotalâmicos de IL-6:
- ↑ em ♂ da ninhada 
menor
- ↓ em ♀ da ninhada 
menor
♂ de 150 dias tem + leptina 
hipotalâmica do que ♀
Efeito do sexo nos níveis de TNF-α:
- níveis hipotalâmicos ↑ em ♂ da ninhada menor
Efeito do sexo nos níveis de TNF-α:
- níveis hipotalâmicos ↑ em ♂ da ninhada menor 
● Como os níveis de TNF-α estavam ↑ em ♂ de 
150 dias, estariam as vias de sinalização 
inflamatórias alteradas?
● Inflamação hipotalâmica está associada a 
alterações na sensibilidade à leptina e insulina, 
portanto essas vias também foram analisadas
● JNK hipotalâmica: 
- ativada em resposta a sinais inflamatórios ou ác. 
graxos
- ↑ em diferentes tecidos em obesos
- isoformas p46 e p54
- ♂ da ninhada menor com maior ativação
● STAT3 hipotalâmica ↑ na ninhada menor em 
ambos os sexos
● SOCS3 hipotalâmica ↑ com relação ao tamanho da 
ninhada e ao sexo
● GFAP hipotalâmica não alterada pelo sexo nem 
pelo tamanho da ninhada em animais de 10 dias
● GFAP hipotalâmica alterada em animais de 150 
dias com relação ao tamanho da ninhada:
- ♂ da ninhada menor com mais GFAP
● ♀ com maior número de projeções 
● Extensão das projeções alteradas tanto pelo sexo 
quanto pelo tamanho da ninhada
- ♀ com projeções maiores que ♂
- ♂ da ninhada menor com projeções menores
● Marcadores microgliais inalterados na idade de 10 
e 50 dias
● 150 dias: 
- menos marcadores nas ninhadas menores de 
ambos os sexos
- ramificação maior em ♀, independente do 
tamanho da ninhada
- consequentemente, uma maior área ocupada pela 
microglia em ♀
Tratamentos com ácidos graxos em culturas de astrócitos
● Palmitato (ác. graxo saturado)
● Sem efeito no nº de células
● Níveis de GFAP ↓ tanto em ♂ quanto em ♀
● Níveis de IL-6 ↑ tanto em ♂ quanto em ♀
● Astrócitos respondem aos ác. graxos liberando 
radicais livres? 
- quantidades de NO2 e NO3 extracelulares 
analisadas
- ↑ dose dependente
Tratamentos com ácidos graxos em culturas de astrócitos
● Palmitato e oleato (ác. graxo insaturado)
● Oleato não alterou a GFAP mas palmitato ↓ 
● Oleato bloqueou o efeito do palmitato quando em 
conjunto
● Ác. graxos são transportados para a mitocôndria 
pela carnitina palmitoil transferase 
- Níveis ↑ desta enzima pelo oleato 
- Palmitato não alterou a expressão da enzima, 
podendo causar efeitos citotóxicos pelo seu 
acúmulo na célula
Tratamentos com ácidos graxos em culturas de astrócitos
● Palmitato ↑ os níveis de IL-6 tanto em ♂ quanto 
em ♀ 
- Este efeito foi reduzido pelo oleato
● Oleato e palmitato ↓ níveis de TNF-α em ♀ (em 
conjunto ↓ mais)
● Palmitato estimulou a liberação de NO2 e NO3 tanto 
em ♂ quanto em ♀ (em conjunto com o oleato ↑ 
mais)
Resposta das culturas de astrócitos ao estrogênio
● Palmitato ↑ níveis de CHOP e o estrogênio (em 
conjunto com o palmitato) ↓, protegendo as células 
do estresse do RE 
● Palmitato ↑ níveis de IL6 e o estrogênio (em 
conjunto com o palmitato) ↓
● Palmitato ↓ IL10 e o estrogênio não teve efeito
● Complicações associadas à obesidade diferem entre os sexos
● Glia hipotalâmica também difere entre os sexos, sugerindo o papel da glia na resposta dimórfica à obesidade
● Não só o sexo, mas a idade também determina a susceptibilidade à inflamação hipotalâmica
● Animais de 10 dias, apesar do sobrepeso (em comparação com controles) não tinham mais GFAP ou marcadores 
microgliais 
● Em ambos os sexos, animais de 10 dias de ninhadas menores eram + pesados e tinham + leptina sérica, mas não 
tinham mais triglicerídeos ou NEFAs na circulação
● Níveis hipotalâmicos de leptina também estavam elevados em animais de 10 dias, podendo participar de alterações 
nos circuitos neurais que regulam apetite e podem resultar em alterações do metabolismo a longo prazo
● ♂ de 150 dias da ninhada menor tinham níveis mais elevados de TNF-alfa e JNK ativada
● Estrogênio é conhecido por proteger contra o aumento de peso (ao contrário da testosterona)
● Falta de inflamação hipotalâmica em animais de 10 dias da ninhada menor sugerem que, pelo menos com a dieta 
normal, pode haver necessidade de exposição mais extensa
● Níveis elevados de triglicerídeos em ♂ de 150 dias da ninhada menor pode ser um gatilho para o processo de 
inflamação hipotalâmica
- já que foram vistos: maior ativação da JNK, maiores níveis de TNF-alfa e, também, a correlação entre os níveis de 
triglicerídeos da circulação com os níveis de TNF-alfa
● Níveis hipotalâmicos de TNF-alfa eram maiores em ♂, independente do tamanho da ninhada
- isto pode estar envolvido com a maior susceptibilidade de ♂ à inflamação hipotalâmica
● Fêmeas de 150 dias não apresentaram aumento de peso, nem de triglicerídeos e nem inflamação hipotalâmica 
- Possível papel do estrogênio 
● A inflamação hipotalâmica por ác. graxos depende do tipo (insaturado ou saturado)
- Oleato (insaturado): reduziu a inflamação e o estresse do RE induzido pelo palmitato (saturado) in vitro