EXERCICIO 2- UREIA E CREATININA

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BIOQUIMICA CLÍNICA 
a) Um paciente ao realizar exame para depuração da creatinina endógena (DCE), apresentou os seguintes valores: 
- creatinina no soro: 2,3 mg/dL 
- creatinina na urina: 57 mg/dL 
- volume 24 horas: 1,25 litros 
- Peso = 60 Kg e Altura = 165 cm:
 Superfície corporal = 1,66 m2 
Qual o valor do DCE desse paciente?
Na dosagem de creatinina no soro (técnica com acidificante), por que na segunda etapa do procedimento não é utilizado um tubo com padrão e acidificante? 
Pois no tubo do padrão é utilizado apenas a creatinina e, se adicionado o acidificante, quebra-se a ligação entre o picrato e a creatinina, não há mais formação de cor pois não há outros componentes que reagem com o picrato na amostra. Diferentemente do tubo em que se utiliza a amostra do paciente, pois nele a creatinina e outros componentes reagem com o picrato e, ao adicionar o acidificante, promove-se a decomposição do picrato de creatinina, porém mantém-se a cor derivada dos cromogênios.
b) Na técnica de uréia CE, demonstra como você prepararia 20 mL de urease tamponada e 20 mL de oxidante de uso.
Oxidante de uso
Adicionar o conteúdo do frasco no 3 (25 mL) a 475 mL
de água destilada ou deionizada e misturar. 
Então para 20 mL
25mL _________ 475 mL
X_____________ 20mL
X= 1,05 de oxidante, completando pra 20mL com água destilada, ou seja, 18,95 de água destilada.
Urease Tamponada
Primeiro deve-se preparar o tampão de uso: adicionar o conteúdo do frasco no 2 (100 mL) a 400 mL de água destilada ou deionizada e misturar. Com isso, prepara-se a Urease tamponada: Adicionar 1,0 mL de Urease (no 1) a 20 mL do Tampão de Uso.
Comparando as duas técnicas para dosagem de uréia, qual você implementaria no laboratório de rotina? explicando a escolha. 
No método por UV A ureia é hidrolisada pela urease produzindo amônia e
dióxido de carbono. A amônia reage com o 2-cetoglutarato e NADH em uma reação catalisada pela glutamato desidrogenase (GLDH), promovendo a oxidação do NADH
a NAD. A consequente redução da absorbância medida em 340 nm é
proporcional à concentração de ureia na amostra.
Existem vários métodos para determinação da ureia, mas os que utilizam acoplamento de enzimas são mais convenientes e extensivamente usados nos laboratórios clínicos.
O sistema apresenta uma linearidade até 300 mg/dL reduzindo-se acentuadamente a repetição de testes em valores elevados. Não sofre interferências provocadas por valores medianamente elevados de bilirrubina, hemoglobina e triglicérides.
As substâncias utilizadas na reação se encontram distribuídas adequadamente em dois reagentes, para conferir maior estabilidade na forma líquida original e manutenção das condições ótimas da reação, permitindo a utilização direta dos reagentes em sistemas automáticos.
A metodologia monorreagente pode ser aplicada utilizando um Reagente de Trabalho estável 28 dias sob refrigeração, obtendo-se desempenho adequado mesmo em situações de baixas demandas do teste. O sistema permite, ainda, preparar o volume de Reagente de Trabalho necessário para apenas uma medição da concentração da ureia.
Em duas amostras com concentrações de ureia iguais a 37 mg/dL foram adicionadas quantidades diferentes do analito obtendo-se recuperações entre 95 e 98%.
Menos etapas, mais rápido, 
Por que deve-se diluir a urina antes dosar a ureia e creatinina?
Por conta da alta concentração dos analitos (ureia e creatinina), se dosado direto, passa a linearidade.