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Universidade Federal Fluminense Departamento de Neurobiologia – GNE Biofísica Celular 2016.1 Prof.: Alexandre Rodrigues - email: alexandre_rodrigues@id.uff.br ESTUDO DIRIGIDO - MEMBRANAS E SINALIZAÇÃO QUÍMICA 1) Explique o modelo do mosaico fluido. Fale sobre os principais constituintes e características da membrana plasmática. R: O modelo mosaico fluido da membrana tem esse nome pois: a palavra mosaico faz menção ao fato de a membrana ser constituída por diversos componentes, como proteínas e fosfolipídeos. O termo fluído refere-se ao fato da membrana não ser estática e estar sempre realizando algum movimento, como por exemplo, o movimento de flip-flop dos fosfolipídeos. Os principais constituintes são: Fosfolipídeos, proteínas, colesterol e glicoproteínas. 2) Que fatores podem influenciar na fluidez de membrana? R: Os principais fatores que podem influenciar na fluidez, ou rigidez, da membrana são: temperatura, quantidade de proteínas, de colesterol e de cadeias insaturadas na membrana, sendo o colesterol responsável pela estabilidade da membrana. O que também influencia na fluidez da membrana é a presença de cadeias insaturadas ( o fosfolipídeo possui duas caudas de ácido graxo. uma cauda possui uma ou mais ligações dupla CIS (insaturada), enquanto a outra não possui (saturada). Cada ligação CIS cria uma pequena dobra na cauda e esse fator influencia na fluidez da membrana, por isso considera-se a presença de cadeias insaturadas. A presença de cadeias insaturadas (as pontes duplas CIS produzem torções nas cadeias de hidrocarbonetos, tornando-as mais difíceis de se agruparem, de modo que a membrana torna-se mais fluida a baixas temperaturas). ; Presença de colesterol (impede que as cadeias de hidrocarbonetos se cristalizem e agrupem-se. Os anéis de colesterol não fazem movimento rotacional. ; Calor. 3) Por que a membrana possui assimetria? O que confere esta característica à membrana plasmática? R: A membrana possui assimetria para que possam ser seletivas as moléculas que entram ou saem da célula, ou seja, a assimetria confere uma maior permeabilidade da membrana. A membrana possui essa assimetria porque os fosfolipídeos possuem a cauda apolar (ou hidrofóbica) e a cabeça polar (ou hidrofílica). A região hidrofóbica dos fosfolipídeos interagem umas com as outras, enquanto as hidrofílicas interagem com a água do meio extracelular e do meio intracelular. 4) Fale sobre os tipos de proteínas encontradas a membrana e dê exemplos de suas funções. R: Os tipos de proteínas que se encontram na membrana são as chamadas integrais e as periféricas. As proteínas integrais são as que atravessam a membrana por completo, ou seja, tem contato com o meio extra e intracelular, como por exemplo as proteínas carreadoras. Já as proteínas periféricas tem contato com apenas um dos meios, ou contato mailto:alexandre_rodrigues@id.uff.br com o meio extracelular ou com o meio intracelular, como por exemplo proteínas receptoras.. 5) O que você entende sobre balsas lipídicas? Exemplifique uma função biológica para este domínio. R: Elas têm a função de organização das proteínas da membrana em microdomínios, transdução de sinais e transporte via cavéolas. O domínio de membrana é composto por: esfingolipídios, colesterol e proteínas, enquanto que as cavéolas são responsáveis por interligar as balsas lipídicas para sinalização e endocitose. 6) O que é difusão? Comente sobre os vários tipos de difusão. Que tipos de moléculas fariam este transporte? R: Difusão é a passagem de íons do meio mais concentrado para o menos concentrado, evitando assim o gasto de energia. Ela pode ser simples, onde a passagem ocorre diretamente através da membrana (moléculas anfipáticas, pequenas e sem carga, como moléculas de água, por exemplo), ou facilitada, onde existe a abertura de canais iônicos para que a passagem de íons ocorra. 7) Fale sobre o transporte ativo (primário e secundário) e comente sobre os fatores que limitariam esse processo. R: Tipo de transporte que ocorre apenas por meio de proteínas transportadoras e sempre contra o gradiente de concentração, podendo ou não apresentar gasto de energia. Divide-se em primário (onde o transporte vai depender da hidrólise de ATP, como as bombas de Na+ e K+) e secundário (onde não ocorre a hidrólise de ATP, pois o soluto vai contra o gradiente eletroquímico sendo transportado passivamente, como as células epiteliais, por exemplo). Os fatores que podem limitar esse processo são a ausência de carga (...). 8) Diferencie os seguintes tipos de sinalização quanto ao alvo e a distância percorrida pela molécula sinalizadora: autócrina, endócrina e sináptica. Cite alguns exemplos de cada tipo. R: Autócrina: Produzem sinais aos quais elas mesmas serão capazes de responder (ex: ?) ; Endócrina: Depende das células endócrinas que secretam hormônios na corrente sanguínea, onde são distribuídos por todo o corpo (ex: hipófise); Sináptica: Rápida e precisa, é realizada por neurônios que transmitem sinais elétricos ao longo de seus axônios e liberam neurotransmissores nas sinapses que frequentemente estão localizados longe do corpo celular neuronal (ex: ?). 9) Associe a natureza da molécula sinalizadora (hidrofílica ou hidrofóbica) à localização do receptor. Justifique sua resposta. R: Quando a molécula for hidrofílica o receptor dela pode estar no interior da célula, pois ela terá a capacidade de atravessar a membrana plasmática, enquanto que a molécula hidrofóbica, por não conseguir atravessar a membrana, vai precisar que o seu receptor esteja na própria membrana para poder enviar o sinal ao interior da célula. 10) Compare a rapidez e a duração da resposta dos receptores ionotrópicos e dos receptores metabotrópicos, explicando os seus mecanismos celulares. R: Por ser uma via direta, o receptor ionotrópico é mais rápido quando comparado ao receptor metabotrópico, que necessita de segundos mensageiros para enviar o sinal. 11) Descreva resumidamente o mecanismo de transdução de sinal dos receptores acoplados à proteína G (metabotrópicos). R: O sinal vai se ligar ao receptor. Este vai ativar a proteína G, que vai fosforilar e deslocar a sua subunidade alfa para ativar a adenilato ciclase. A adenilato ciclase vai perder duas moléculas de fosfato, transformando-se em AMPc. Este vai ativar as cinases. 12) Como é a dinâmica do funcionamento da proteína trimérica ligadora de GTP? R: 13) Explique o mecanismo de ativação da PKA. R: O sinal vai se ligar ao receptor. Este vai ativar a proteína G, que vai fosforilar e deslocar a sua subunidade alfa para ativar a adenilato ciclase. A adenilato ciclase vai perder duas moléculas de fosfato, transformando-se em AMPc. Este vai ativar a PKA. 14) Os receptores acoplados a proteína G podem levar à ativação diferentes vias intracelulares. Uma das principais é a da fosfolipase C e PKC. Descreva esta via de sinalização e discuta possíveis efeitos biológicos resultantes. R: 15) Por que a mesma molécula sinalizadora (por. ex. a acetilcolina) pode ter diferentes efeitos biológicos nos seus vários alvos? Exemplifique. R: Por conta da especificidade do tecido (cada tecido vai desempenhar uma função específica na presença da molécula sinal). Por exemplo: a acetilcolina ao chegar no pulmão causa broncoconstricção enquanto que no tecido vascular causa vasodilatação. 16) Descreva os mecanismos que levam a ativação de receptores tirosina cinases. R: A molécula sinal vai se ligar ao receptor catalítico, provocando sua dimerização e autofosforilação, que perpassa os domínios do SH2. 17) Quais foram os segundos mensageiros estudados em sala de aula? R: AMPc, IP3, Ca+, DAG (diacil glicerol), RAS e PIP3.
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