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UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E AMBIENTAIS DISCIPLINA DE BIOLOGIA CELULAR BÁSICA- PRÁTICA BRENDA LEITE CAVLAK ESTUDO DO MICRÓSCOPIO ÓPTICO (Estudo do microscópio – Prática 1) DOURADOS – MATO GROSSO DO SUL 2020 Microscopia (Estudo do microscópio óptico) Introdução A citologia é uma área da biologia que busca estudar as estruturas e funções celulares minuciosamente, no entanto, os seres humanos não possuem a capacidade de observar a olho nu tais estruturas. Por necessidade de observação, foi criado o microscópio óptico, aparelho que possibilitou aumentar um objeto em centenas de vezes através da passagem de luz, contanto que o objeto a ser analisado seja translúcido. O microscópio óptico O microscópio óptico, também chamado de microscópio de luz, é um aparelho capaz de produzir imagens ampliadas de minúsculos objetos, permitindo assim um estudo minucioso do que se deseja analisar. O primeiro microscópio foi desenvolvido pelo holandês Hans Jansen e seu filho Zacharias, com uma lente que permitia um aumento de 300x. Ao longo dos anos, o microscópio óptico foi sendo modificado por cientistas, até ter a estrutura que conhecemos hoje. Atualmente, os aparelhos utilizados apresentam um aumento de 100, 1000, 5000, 10000 vezes (como é o caso dos microscópios eletrônicos) e uma qualidade em alta resolução. O microscópio de luz é divido em duas partes. A parte mecânica é responsável pela sustentação e estabilidade ao aparelho, sendo constituída por: 1. Pé ou base – Sustenta o microscópio, garantindo a sua estabilidade. 2. Braço, corpo ou estativo – Fixo à base, é aqui que estão todas as partes do microscópio. 3. Platina ou mesa – É o local em que a lâmina é posicionada, em sua região central um orifício circular por onde ocorre a passagem dos raios luminosos. 4. Charriot – Permite movimentar a lâmina sobre a platina por meio de presilhas. 5. Tubo ou canhão – Partes superiores do microscópio em que estão localizadas as oculares na extremidade superior e, na extremidade inferior, estão o revolver e as objetivas. 6. Revolver – Localizada abaixo do canhão, é onde as lentes estão inseridas. 7. Diafragma – Controla a passagem de luz que atinge a platina. 8. Diafragma de campo – Controla a intensidade da luz e pode ser aberto ou fechado por meio do anel de controle. 9. Regulador de luminosidade – Regula a entrada de luz da fonte luminosa que incidirá sobre a amostra. 10. Interruptor – Serve para ligar a fonte luminosa. 11. Parafuso macrométrico – Permite os movimentos da platina, mas especificamente, és responsável por regular a altura da platina. 12. Parafuso micrométrico – Também é responsável pelos movimentos da platina. Já a parte óptica é formada por: 1. Condensadora – Localizadas abaixo da platina, esse conjunto de lentes são as responsáveis pela quantidade de feixes luminosos que serão necessários para a obtenção de uma iluminação uniforme sobre o que deseja ser estudado. 2. Oculares – Composto por duas ou uma lente ocular, é a parte em que se olha o objeto ampliado pelas objetivas, inclusive fazem a correção de problemas ópticos do observador, não sendo preciso usar óculos durante as analises no microscópio. 3. Objetivas – São as lentes de maior importância na microscopia e comumente são quatro. Sendo as objetivas de 4x e 10x de pequeno aumento, a de 40x de grande aumento a seco e a de 100x é conhecida como de imersão, pois é utilizada com o óleo de imersão. Objetivos O objetivo desta aula prática foi reconhecer as principais partes constituintes do microscópio óptico e como manuseá-lo de forma correta. Materiais · Microscópio óptico; · Letra de jornal recortada; · Papel higiênico; · Lâmina e lamínula; · Pinça; · Tesoura; · Contra-gotas; · Água destilada; · Óleo de imersão; Procedimentos Após explicação do seria feito, os procedimentos seguiram essa ordem: 1. Peguei uma letra de jornal previamente cortada; 2. Pinguei uma gota de água destilada na lâmina com o auxilio de um contra-gotas; 3. Em seguida, posicionei a letra sobre a gota d’água, na lâmina, para que ficasse na posição correta para observá-la; 4. Coloquei a lamínula por cima da lâmina bem devagar até que estivesse fixa; 5. Retirei o excesso de água com o papel absorvente; 6. Após isso, a lâmina foi levada ao microscópio para observação; 7. A primeira objetiva utilizada foi a de 4x 8. Desenhei o que foi observado nessa objetiva; 9. Troquei a objetiva para um aumento de 10x; 10. Focalizei e desenhei a imagem observada; 11. Troquei a objetiva novamente, dessa vez para um aumento de 40x 12. Focalizei e desenhei novamente; 13. Após chegar na objetiva de 100x, foi necessário a utilização do óleo de imersão; 14. Desci totalmente p braço do microscópio; 15. Pinguei uma gota do óleo de imersão sobre a lamínula; 16. Levantei o braço do microscópio até a lâmina estar em contato com a lente; 17. Focalizei e desenhei a imagem novamente; 18. Em seguida, dei inicio ao processo de término do experimento; 19. Abaixei o braço microscópio; 20. Limpei o óleo de imersão da lente; 21. Retirei a lâmina da lente; 22. Coloquei a intensidade da luz no mínimo 23. Voltei a objetiva para o aumento de 4x; 24. Desliguei o microscópio no botão “liga/desliga”, 25. Retirei o microscópio da tomada; 26. Cobri o microscópio com a capa protetora. 27. Por fim, foi feito o descarte da lâmina e da lamínula. Resultados Discussão 1. Quais as etapas de focalização do microscópio óptico (fotônico de luz)? São quatro: Iniciando com a utilização da objetiva de 4x, feito isso, inicia-se a focalização com o uso, primeiramente, do parafuso macrométrico e depois do micrométrico até obter uma boa focalização. O mesmo acontece com as objetivas, de 10x e 40x, em relação à lente da objetiva de 100x, existe a necessidade do uso do óleo de imersão. 2. Quais as principais partes de um microscópio óptico? E qual a função de cada uma? O microscópio de luz é divido em duas partes. A parte mecânica é responsável pela sustentação e estabilidade ao aparelho, sendo constituída por: · Base – Sustenta o microscópio; · Braço, corpo ou estativo – Fixo à base, é aqui que estão todas as partes do microscópio. · Platina ou mesa – É o local em que a lâmina é posicionada, em sua região central um orifício circular por onde ocorre a passagem dos raios luminosos, suporta o material a ser estudado; · Charriot – Permite movimentar a lâmina nos sentidos esquerdo-direita, frente/trás; · Revolver – Localizada abaixo do canhão, é onde as lentes estão inseridas. · Diafragma – Controla a passagem de luz que atinge a platina. · Diafragma de campo – Controla a intensidade da luz e pode ser aberto ou fechado por meio do anel de controle. · Regulador de luminosidade – Regula a entrada de luz da fonte luminosa que incidirá sobre a amostra. · Interruptor – Serve para ligar a fonte luminosa. · Parafuso macrométrico – Permite os movimentos da platina, mas especificamente, és responsável por regular a altura da platina. · Parafuso micrométrico – Também é responsável pelos movimentos da platina. Já a parte óptica é formada por: · Condensadora – Localizadas abaixo da platina, esse conjunto de lentes são as responsáveis pela quantidade de feixes luminosos que serão necessários para a obtenção de uma iluminação uniforme sobre o que deseja ser estudado. · Oculares – Composto por duas ou uma lente ocular, é a parte em que se olha o objeto ampliado pelas objetivas, inclusive fazem a correção de problemas ópticos do observador, não sendo preciso usar óculos durante as analises no microscópio. · Objetivas – São as lentes de maior importância na microscopia e comumente são quatro. Sendo as objetivas de 4x e 10x de pequeno aumento, a de 40x de grande aumento a seco e a de 100x é conhecida como de imersão, pois é utilizada com o óleo de imersão. 3. Quais as diferenças no tamanho da imagem e da área do campo de visão em cada objetiva utilizada? Em relação ao tamanho da imagem observado, observa-se que quanto maior a objetiva utilizada,maior a proximidade da imagem e, consequentemente, menor era o campo de visão. 4. Quais as diferenças observadas, em relação à posição da letra, a olho nu e ao microscópio? No microscópio óptico a imagem estava invertida, ou seja, a imagem era o oposto da imagem observado a olho nu. 5. Por que é necessária a utilização do óleo de imersão com a lente objetiva de 100x? O uso do óleo de imersão na lente objetiva de 100x impede danos a lente, uma vez que esta é a única lente que entra em contato direto com a lente, alem de melhorar a qualidade da imagem. 6. Qual o aumento total da imagem ao se observar o objeto nas várias objetivas? O aumento total de um microscópio é dado pelo grau de aumento da imagem das lentes objetivas e pelo aumento dado pelas lentes da ocular, portanto, a objetiva de 4x no total aumenta 40x, a de 10x aumenta 100x, de 40x aumenta 400x e por fim, a de 100x aumenta 1000x. 7. Qual a diferença entre o aumento da imagem e a ampliação acompanhada do poder de resolução do microscópio? Aumento está relacionado a quanto uma imagem pode ser ampliada, sem considerar a resolução, ou seja, uma imagem pode ser ampliada e ficar completamente desfocada. O poder de resolução do microscópio Conclusão Durante a aula prática foi possível observar de perto a estrutura e o funcionamento do microscópio óptico, aparelho complexo formado por varias partes e que exige cuidado ao ser manuseado a fim de se obter uma boa imagem no fim do experimento. Pude observar também que a imagem observada sempre é invertida e quanto maior o aumento usado, mais difícil é focalizar a imagem. Fontes https://www.prolab.com.br/blog/equipamentos-aplicacoes/conheca-partes-microscopio-e-suas-funcoes/ https://www.portalsaofrancisco.com.br/biologia/microscopio
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