Fosfatase Alcalina Sérica

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1.Introdução 
A fosfatase alcali na uma enZima presente nas membranas de 
revestimento dos canaliculos biliares (canalicular). Tem como uma de suas 
funções remover grupos fosfato de um grande numero de moléculas diferentes, 
incluindo prote inas, nucleo tideos e alcalóides; como o próprio nome sugere,
essa enima é mais ativa em soluções alcali nas. O processo de remoção 
desses grupos fosfatos é conhecido como desfosforilação. 
A fosfatase alcalina (E.C. 3.1.3.1) é uma fosfomonoes terase não- 
especíica, que possui os ions mag nésio e/ou zinco como cofatores e é 
usualmente ligada a superficie externa da membrana celular. Em humanos há 
quatro genes para esta enzima: intestinal, placentária, células germinati vas e 
tecido não-espec fica (Whyte, 1994). Esta ültima foma é alterada por 
modificações pós-traducionais para diferenciar-se nas isofomas óssea, 
hepática e renal.Portanto,a fosfatase alcali na encontrada no soro é resultado 
da presença de diferentes isoenzimas originadas em diferentes órg�os, com 
predom inio das frações ósseas e hepáticas. 
As isoenzimas produzidas pelo figado e pelo osso podem ser separadas 
por eletroforese para me lhor perceber o motivo de um valor elevado nas 
análises.Contudo, se houver uma elevação simultânea da GGT (gama- 
glutamiltranspeptidase) sugere-se que o figado seja a causa da fosfatase 
alcalina ele vada. 
Os níveis de Fosfa tase Alcalina sérica são de grande significado na 
ivestigação das desordens hepatobiliares e ósseas. Niveis elevados ocorrem 
em casos de doenças ósseas raquitismo,hiperparatiroidismo, fraturas 
cicatizantes, tumores ósseos(como sarcoma osteogênico), carcinoma de 
prostata e mama com metástase óssea e outras enfemidades ósseas, 
especialmente naquelas que evoluem com quadro de osteólise. A doença de 
Paget tave z seja, a doença óssea que apresente as maiores atividades de 
fosfatase alcalina, com niveis 10 a 25 vezes acima dos limites supariores dos 
valores de referência. Recém-nasci dos e crianças, mas especialme nte 
adolescentes, apresentam valores significativamente mais elevados do que os 
adultos, devido ao crescimento ósseo. Durante a fase de crescimento rápido da 
adolescência (puberdade), são encontrados niveis extremamente elevados. 
NormaImente, os valores são discretamente mais elevados em homens do que 
em muheres, e essa diferença desaparece durante e apos a menopausa. 
Discreto ou moderados aumentos podem ser observados durante a gravidez, 
sendo essa fosfatase de origem placentária 
Outra grande utilidade na prátca clinica está na investigação de 
doenças hepatobiliares. Como é totalmente excretada pela bile, durante muito 
tempo acreditou-se que sua elevação nas patologias hepatobiliares resultava 
da falência de excreção da enzima. Hoje se sabe que a resposta hepática a 
qualquer tipo de agressão da árore biliar é sintetizar fosfatase alcalina 
principalmente nos canaliculos biliares. Isso explica sua marcada elevação nas 
patologias do trato biliar. Na obstrução do trato biiar, a atividade da fosfatase 
alcalina pode estar elevada até dez ve zes em relação aos mais altos valores de 
referência. Aumento dos niveis séricos também podem ser enco ntrados após 
uma refeição com alimentos ricos em gord ura. 
A diminuição do nível da enzima é observada em pacientes desnutridos, 
com carência de fósforo,de nominada hipofosfatasia.Em população idosa existe 
uma diminuição dos niveis séricos habitualmente enco ntrados, como 
consequéncia do aumento da incidéncia de osteoporose nessa faixa 
etária.Al�m disso, níveis diminuidos também podem ser encontrados no 
hipotireoidismo, na anemia perniciosa, na doença celiaca, na disfunção adrenal 
e no uso de drogas como contraceptivos orais. 
A deteminação da fosfatase alcalina via método cinético baseia-se no 
principio que a enzma catalisa transferência do grupo fosfato do p 
nitrofenilfosfato para o 2-amino-2-metil-1-propanol(AMP), formando p- 
nitrofenol. 
FALC 
p-Nitrofenilfosfato p-Nitrofenol +fosfato 
O substrato é incolor e o radical p-Nitrofenol liberado é amarelado. A 
intensidade de cor é proporcional à concentração da enzima no soro. A 
atividade enzimática é determinada pela velocidade de formação do p 
Nitrofe nol, medida em 405nm. 
2. Objetivos 
Determinar, através do método cinético, a concentração de fosfatase 
alcalina séica. 
3. Metodologia 
Primeiramente preparou-se o reagente de trabalho, onde 9 partes do 
reagente 1 (AMP: 2-amino-2-metil-1-propanol) foram misturadas com 1 parte 
do reagente 2 (PNFF: p-nitrofe nilfostato). 
Em seguida foi adicionado 1 mL do reagente de trabalho em 2 tubos de 
ensaio, que foram deixados em banho-maria durante 5 minutos. 
Posteriormente o reagente de trabalho contido em cada tubo foi trans ferido 
para 2 cubetas, onde 20 L das amostras (controle e Wesley) foram 
adicionados em cada tubo. As amostras foram homoge neizadas. 
Foi esperado 1 minuto para se iniciar a leitura a 405 nm, que foi repetida 
nos tempos de 2 e 3 minutos. Após a leitura foi possível calcular as diferenças 
das absorvâncias entre os tempos e, com isso, a concentração da fosfatase 
alcalina. 
4.Resultados e discussão 
No exame laboratorial realizado em nosso paciente o valor encontrado foi8,65UL/L, portanto,
normal se considerarmos o padente como crianga, assim,essa não deve se preocupar comos 
resultados. Já no caso do padente ser adulto, o referido resul tado está relativame nte abaixo 
do ideal.Esse valor para o paciente adulto pode indicar hipoti reoidismo, 
hipofosfatemia, de snutrição, doenças celiaca, defidência nas prote inas ou disfunção adrenal.o 
paciente deve procurar um médico, a fim de que possa fazer examescomplementares para 
descobrir a causa dessa baixa na sua fosfatase alcalina 
Bibliografia atualizada 
FOSFATASE ALCALINA DEA-PP, Instruções de Uso, Gold Analisa Diagnóstica 
http://boasaude.uol.com.br/lib/showdoc.cfm?libCat!D= 
1&Search=ictericia&.CurrentPage=0& LibDocI D=4320, ace sso em maio de2010.