EXTRAÇÃO DO DNA

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ- UFPI 
CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS- CCA 
DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA 
CURSO: ENGENHARIA AGRONÔMICA 
DISCIPLINA: GENÉTICA NA AGROPECUÁRIA 
PROFª. DRª. ÂNGELA CELIS DE ALMEIDA LOPES 
DISCENTE: MICHAEL SILVA DAMASCENO 
 
ROTEIRO DE AULA PRÁTICA: EXTRAÇÃO CASEIRA DE DNA 
 
 
 
1. INTRODUÇÃO 
 
 O DNA ou material genético contém a informação crucial para a 
hereditariedade, determinando o fenótipo dos indivíduos. A descoberta da 
sua estrutura representa um marco no desenvolvimento da biologia dos 
últimos dois séculos, contribuindo para avanços significativos no 
melhoramento de organismos vivos e no entendimento de processos 
biológicos 
 
 Existem diferentes protocolos de extração de DNA que variam em função da 
espécie e do tecido a ser utilizado. No entanto, a maioria dos protocolos 
avaliados concorda que, para a visualização dos aglomerados de DNA se faz 
necessária a realização das seguintes etapas: maceração, peneiramento, 
utilização da solução de lise (sal e detergente) e diminuição da diluição do 
DNA com álcool 
 
 Todavia, a despeito das várias metodologias de extração do DNA, foi 
utilizada esse procedimento para a extração do DNA, tanto do tomate como o 
da banana. No qual, o objetivo geral é testar diferente vegetais e frutas para 
a obtenção do DNA. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2. MATERIAIS 
 
 
 
1- SAL 
2- DETERGENTE 
3- SACO PLASTICO 
4- ÁGUA 
5- ALCOOL 
6- BANANA E TOMATE 
7- PENEIRA 
8- DOIS COPOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
3. RESULTADOS E DISCUSSÂO 
Foram testados banana e o tomate. 
 
 
Figura1. Etapas de experimentação da extração do DNA na banana e tomate. 
O resultado obtido com o tomate foi bastante semelhante ao da banana. O líquido após o 
processamento ficou heterogêneo, com a utilização dos reagentes químicos, o filamento de 
DNA subiu para a superfície, observando uma ¨nuvem branca¨ que são os aglomerados de 
DNA com um aspecto gelatinoso. 
 
Imagem 1 Imagem 2 
 
Figura 2. Resultado da experiencia, sendo a primeira imagem a da extração de DNA do tomate 
e a segunda a da banana 
 
 
 
 
4. CONCLUSÃO 
 
 
Concluiu-se que dentre o vegetal e a fruta testado, destacou-se o tomate e a 
banana como alternativas viáveis. O experimento se mostrou bastante eficiente 
para o vegetal e a fruta acima citados, em especial o tomate cuja variação de 
cores vermelho claro do sumo e vermelho escuro do DNA permitiu uma 
excelente visualização. 
 
 
5. QUESTIONARIO 
 
1- . Como se apresentou o DNA extraído? Descreva qual o seu aspecto e em 
que região da solução do tubo de ensaio ele foi visualizado. 
 O DNA observado foi que após colocar o álcool, uma massa na superfície 
se formou, com o aspecto de uma nuvem, em ambos os experimentos. 
 
2- . Qual a importância da etapa de maceramento? 
 
 A principal importância da maceração é que a partir dela que ocorre o 
primeiro rompimento(quebra) das células e logo por consequência um 
aumento da superfície solução “lise”, no qual sua função é quebrar as 
membranas celulares e as membranas nucleares que liberará as moléculas 
de DNA que estavam localizados no interior do núcleo. 
 
3- Qual o papel do álcool etílico na extração do DNA? 
 
 O principal papel do álcool é a desidratação do DNA, que não fica mais 
dissolvido no meio aquoso e por ele ter menor densidade que os outros 
materiais ele submerge. 
 
 
4- Qual o papel da solução de “lise”? Responda, especificando as funções do 
detergente e do sal (NaCl). 
 
 O principal papel da solução “lise” é romper as membranas celulares e 
nucleares. A função do sal nessa solução é que no início da experiencia o 
sal proporciona ao DNA um ambiente favorável. Já a importância do 
detergente é desestruturar as moléculas de lipídeos das membranas 
biológicas. Logo, as membranas sofrem quebra e todo o material celular 
incluindo o DNA fica disperso na solução. 
 
5- . Qual o papel do álcool etílico na extração do DNA? Considerando os 
procedimentos da extração do DNA genômico, você espera obtê-lo sem 
quebras mecânicas e/ou químicas? 
 O papel do álcool etílico é a desidratação do DNA. Assim, pode-se dizer 
que é praticamente impossível extrair o DNA sem que haja quebras 
mecânicas durante o processo de extração