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BMF II – BCM Módulo 3 - Aula 5 Cecilia Antonieta 82 A 1 A combinação de nucleotídeos forma trincas que especi- ficam aminoácidos. Há 64 combinações de nucleotídeos, sendo 3 delas (UAA, UAG, UGA) códons de parada e uma delas o códon iniciador (AUG- metionina em eucariotos e formil- metionina em procariotos). CÓDIGO GENÉTICO UNIVERSAL em todos os sistemas biológicos os códons especificam os mesmos amino- ácidos. DEGENERADO diferentes códons podem especificar o mesmo aminoácido. EXPERIMENTO DE TRADUÇÃO IN VITRO Síntese de uma molécula de RNAm. Molécula colocada em meio com solução tampão, aminoácidos e ribos- somo, RNAt, fontes de energia (GTP). Posteriormente foi identificada a composição dos aminoácidos na pro- teína formada. 1/3 de proteínas em relação ao número de nucleotídeos. PRINCIPAIS ELEMENTO ENVOLVIDOS RNA DE TRANSFERÊNCIA Aproxima o aminoácido ao seu respectivo códon. Atra- vés de pontes de H, estabelecidas entre 3 nucleotídeos nessa molécula, e são complementares ao códon. Pequeno (somente 80 nucleotídeos), apresenta núcleo- tídeos não convencionais (nucleotídeo convencional que sofreu uma modificação química) a cada nucleotí- deo. Os nucleotídeos não convencionais estão em posi- ções específicas, fazendo com que os RNAs resultem em uma mesma estrutura secundária e final. ESTRUTURA SECUNDÁRIA último nucleotídeo (extremi- dade 3’) adenina (CCA) e o aminoácido é ligado covalen- temente a ela. CONFORMAÇÃO FINAL em forma de L. Aminoacil tRNA-sintetase liga o aminoácido ao RNAt específico. *Aminoacil é o aminoácido. Quem fornece energia é o APT, ela é usada para a forma- ção da ligação peptídica. RNA RIBOSSÔMICO Ribossomos que estão sintetizando proteína que possui sinal de endereçamento para o RE são aderidos à mem- brana da organela. RIBOSSOMOS partícula riboproteíca, formada por RNA e/ou proteínas. Fornece ambiente para que o RNAt se li- gue de maneira específica ao RNAm. SUBUNIDADES Maior formada por RNAr 40S, apresen- ta sítios funcionais (A: entrada do RNAt trazendo seu aa específico; P: RNAt já está ligado à cadeia polipeptídica nascente que está sendo produzida; e E: exit) que são de ligação ao RNAt. Menor formada por RNAr 18S, sítios de ligação para o RNAm. REGIÃO CODIFICADORA MADURA, constituída somente por éxons. AMINOÁCIDOS ligados por ligação peptídica. ETAPAS INICIAÇÃO Incorporação dos primeiros aminoácidos. RNAt se liga à subunidade menor do ribossomo, esse complexo se liga ao início do RNAm. O primeiro RNA transportador tem afinidade pelo início do RNA. Varredura no RNAm do Cap até encontrar a região codi- ficadora do RNAm (a partir do AUG). Assim que encon- tra, a subunidade maior é atraída e se liga na sub- unidade menor, os três sítios são constituídos e o RNAt vai direto para o sítio P. Endo RNAases retiram nucleotídeos, contidas no li- sossoma. ExoRNAses remove nucleotídeos das extremidades. Não estão combinadas nos lisossomos. Capeamento do DNA ligação do cap (proteína) à ex- tremidade 5’ do RNA, durante o amadurecimento. Impede que nucleotídeos sejam retirados pelas exo- nucleases e é importante para o início da tradução. BMF II – BCM Módulo 3 - Aula 5 Cecilia Antonieta 82 A 2 EXTENSÃO Ocorre da chegada do segundo aminoácido até a chega- da do último aminoácido. Formação de ligação peptídica nos ribossomos. RNA transportador já está ligado à cadeia polipeptídica nascente que está sendo produzida; RNA de transferência entra no ribossomo pelo sítio A, mas só fica no sitio A se seu anticódon for complemen- tar ao códon do RNAm. Quando o anticódon é comple- mentar, pareia com o códon. A reação ocorre entre a extremidade carboxiterminal da cadeia polipeptídica nascente e a amino terminal do aminoácido ligado ao RNAt que acabou de entrar. O RNAt que não está mais ligado ao aminoácido vai para o sítio E, o RNAt que agora contém a cadeia polipeptí- dica nascente vai para o sitio P, deixando o sítio A livre para a entrada de outro. O RNAr é um exemplo de ribosima. A energia para a transferência do RNAt vem de fatores de extensão ligados ao GTP. FINALIZAÇÃO Códon de parada fica exposto no sítio A. Sítio é ocupado por fator de liberação (proteína), que tem estrutura se- melhante à proteína e Hidrólise e desacoplação das subunidades. POLIRIBOSSOMOS mesmo RNAm é traduzido por mais de um ribossomo. CAUDA DE POLI AMINOÁCIDOS várias adeninas na ex- tremidade 3’. Atende uma demanda da célula por uma proteína em um intervalo de tempo curto. RNAm adota configuração anelar porque as proteínas do CAP interagem com a proteína da cauda de poli A, es- sa estrutura possibilita que uma nova tradução se inicie rapidamente. Antibióticos agem na síntese de proteínas.
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