Meios de cultura e metabolismo microbiano

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1 @nutristudies.loren 
→ Pode ser líquido ou sólido 
 
→ Ágar, quando adicionado no meio de cultura, torna 
o meio sólido 
- É um polímero extraído de algas 
- É inerte e não é consumido 
 
→ BHI (Brain Heart Infusion) – é um macerado de 
matéria orgânica, rico em nutrientes que sustenta 
uma grande variedade de microrganismo 
- Placa de petri da direita 
 
→ Ágar vermelho – contém 5% sangue, além do BHI 
- Meio enriquecido 
- Serve para cultivo de bactérias mais exigentes 
 
CULTURAS BACTERIANAS 
→ No meio líquido – é observado pela turbidez 
- Não é possível saber se estar contaminada 
 
- Usado quando se tem certeza que a amostra está 
pura e conhecida 
 
→ No meio sólido – colônia ou UFC 
- É possível visualizar diferentes tipos de bactérias e 
isolar a colônia 
 
→ Processo de identificação 
- Retira uma amostra e realiza a técnica de 
coloração de Gram 
- Inocular as bactérias em meios seletivos 
 
MEIOS SELETIVOS E DIFERENCIAIS 
ÁGAR MACCONKEY 
→ Seletivo: sais biliares e cristal violeta que seleciona 
bactérias entérica Gram-negativos 
- Não crescem Gram-positivos 
→ Diferencial: diferencia os fermentadores de lactose 
dos não fermentadores 
- Pode incluir açúcares diferentes da lactose para 
diferenciação adicional 
 
- Ex.: diferenciar E. coli enterohemorrágica que não 
fermenta o sorbitol, de outros tipos de E. coli que o 
fazem 
 
→ Seleciona Gram-negativos não fastidiosos 
 
→ Colônias vermelhas = fermentação de lactose 
 
→ Colônias incolores = não há fermentação de lactose 
 
ÁGAR MANITOL 
→ Favorece o crescimento de Gram-positivo e inibe o 
de Gram-negativo 
 
→ É um meio hipertônico 
 
→ Seletivo – a concentração de 7,5% de cloreto de 
sódio resulta na inibição parcial ou completa de 
organismos bacterianos diferentes dos estafilococos 
 
→ Diferencial – a fermentação do manitol indicada pela 
mudança no indicador vermelho de fenol, auxilia na 
diferenciação das espécies estafilocócicas 
 
 
2 @nutristudies.loren 
MEIOS INDICADORES 
 
→ Indicam determinada atividade metabólica 
 
→ TSI (Triple sugar iron) – contém: 
✓ 0,1% glicose – é o primeiro a ser fermentado 
 
✓ 1,0% lactose 
 
✓ 1,0% sacarose 
 
✓ Vermelho de fenol – detecção da fermentação 
de carboidratos 
 
✓ Sulfato de ferro – detecção da produção de 
sulfato de hidrogênio 
- Indicado pela cor preta na base do tubo 
 
✓ Fermentação – mudança da cor do indicador de 
pH de vermelho para amarelo 
 
✓ Porção inclinada ou bico exposta em toda sua 
superfície ao oxigênio atmosférico – aeróbia 
 
✓ Porção inferior, profundidade ou fundo – está 
protegida do ar e é relativamente anaeróbia 
 
→ Tubo 5 - E. coli – fermentação forte com mudança de 
cor e formação de gás 
 
→ Shigella – não fermenta lactose e sacarose, continua 
crescendo a partir da degradação de proteínas 
- Degradação de proteínas gera produz base 
aminadas, aumentando o pH e o que era amarelo 
volta a ficar rosa 
 
→ Salmonela – inclinação rosa = não fermenta lactose e 
sacarose 
- Fundo preto – sulfato de ferro 
 
 
 
 
CATABOLISMO DE CARBOIDRATOS 
→ Fonte primária de energia 
→ Glicose – mais comum 
→ Energia obtida a partir da glicose 
• Respiração 
• Fermentação 
 
 
RESPIRAÇÃO CELULAR AERÓBICA 
→ 1 – Glicólise 
- Glicose (4C) é quebrada gerando 2 ácidos pirúvicos 
 
→ 2 – Reação de transição 
- Ácidos pirúvicos são convertidos em acetil CoA 
 
→ 3 – Ciclo de Krebs 
- Acetil CoA entra no ciclo 
- NAD e FAD reduzidos 
 
→ 4 – Sistema de transporte de elétrons 
- Recebem e transportam os elétrons adiante até da 
ATPase, que converterá o ADP em ATP 
 
→ Como as bactérias não possuem mitocôndrias, este 
processo ocorre associado a membrana 
citoplasmática 
 
→ Saldo de ATP 
- 3 ATP de cada NADH2 
- 2 ATP de cada FADH2 
 
 
3 @nutristudies.loren 
→ Produção total de ATP a partir da oxidação 
completa de 1 molécula de glicose na respiração 
aeróbica 
 
 
RESPIRAÇÃO ANAERÓBICA 
→ Elétrons liberados pela oxidação são passados pelo 
sistema de transporte de elétrons, mas o oxigênio não 
é o aceptor final de elétrons 
 
→ Aceptor de elétrons 
 
→ Respiração anaeróbica em Escherichia coli 
 
→ Acúmulo de H+ no espaço periplasmático, passam 
pela ATPsintase, formando uma força próton motiva, 
gerando o ATP 
 
→ Gera um saldo menor de ATP 
 
 
FERMENTAÇÃO 
 
→ Início da glicólise 
 
→ 2 moléculas de ácido pirúvico – pode virar ácido 
lático ou álcool 
 
→ Depende do microrganismo 
 
PRODUTOS FINAIS DA FERMENTAÇÃO 
→ NADH é oxidado a NAD+ e dependendo do substrato 
presente no meio, dará origem a: 
 
 
 
 
 
4 @nutristudies.loren 
BIOQUÍMICA DA SACAROSE 
 
→ Agente cariogênico 
 
→ Pode ser convertida em frutose e glicose 
 
→ A glicose pode ser levada para a fermentação, 
formando ácido 
- Destrói a dentina 
- Pode ser armazenada como glicogênio 
 
→ Sacarose pode ser transformada em glucanos 
- Polímeros extracelulares 
 
- Destranos e mutanos – extremamente insolúveis que 
formam placa 
 
- Bactérias se agregam a esses polímeros = placa 
bacteriana 
 
→ A fermentação pode ser usada como método de 
identificação de microrganismos em laboratório 
 
→ Frasco menor dentro invertido serve para mostra a 
produção de gases – bolha 
 
→ Testes bioquímicos – usado para identificação de 
bactérias