Espectrofotometria: Análise de Absorção de Luz

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Espectrofotometria 
 
- Método de análise 
- Absorção de luz que vai desde a luz Ultra 
Violeta até a luz visível, também conhecida 
como UV vis. 
- Método mais utilizado nas análises biológicas 
ou físico-químicas; 
- Praticamente todo laboratório de análise tem 
espectrofotômetro pela grande abrangência e 
pelo baixo custo da análise; 
- Composto por uma luz que vai incidir em um 
prisma, e o prisma divide a luz em diferentes 
comprimentos de ondas, gerando diferentes 
cores, que vão desde o ultravioleta, passando 
por todas as cores do espectro visível, que são 
violeta, anis, azul, verde, amarelo, laranja e 
vermelho; 
- Quanto mais perto do vermelho menor a 
frequência e maior o comprimento de onda; 
- Depois de passar pelo prisma, o comprimento 
de onda é selecionado no equipamento que vai 
passar por um monocromador, que vai 
transformar essa luz em um só comprimento de 
onda específico, então a luz monocromática, vai 
passar por uma cubeta que contém uma solução 
alvo, que tem a substância que você quer fazer 
a análise, o analito. 
- Essa cubeta pode ser desde plástico, que o 
material mais barato, vidro ou quartzo que é o 
material mais caro, podendo chegar a 200, 
300 R$ cada uma. 
- Então, a luz vai chegar até o detector, que vai 
passar as informações de absorbância e de 
transmitância, que são medidas fotométricas, 
pro software do aparelho. 
- Quando a luz passa pela cubeta contendo a 
solução, parte da radiação é absorvida pelas 
moléculas dessa solução e o que não é 
absorvido, segue em direção ao detector; 
 
- Então quanto mais concentrada a amostra, 
mais ela absorve dessa radiação, e maior é a 
absorbância que é o resultado final; 
- Quanto menos concentrada for a amostra, 
menor é o sinal de absorbância, pois ela vai 
absorver menor radiação. 
- Vale lembrar também que não é qualquer 
espectro de luz pra qualquer substância, tudo 
depende da sua afinidade por determinado 
comprimento de onda, porque cada molécula 
tem um espectro de absorção de luz 
característico. 
- Então, se a luz passa através de 
uma solução sem absorção nenhuma, a 
absorbância é zero, e a 
transmitância percentual é100%. No caso em 
que toda a luz é absorvida, 
a transmitância percentual é zero e 
a absorbância é infinita.