CULTURAS DE TECIDOS

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BIOTECNOLOGIA: CULTURA DE 
TECIDOS EM FITOPATOLOGIA 
Tipos de culturas de 
tecidos 
Culturas de tecidos
A cultura de tecidos tem demonstrado grande
importância prática e potencial nas áreas
agrícolas, florestal, na horticultura, floricultura e
fruticultura, bem como na pesquisa básica.
➢ Culturas de calos;
➢ Suspensão celular; 
➢ Cultura de órgãos;
➢ Culturas de anteras; 
➢ Cultura de protoplastos;
➢ Culturas de meristemas.
Tipos de culturas de tecidos 
Culturas de calos
➢ Obtenção através de um explante de tecidos,
➢ Transferido para meio semi-sólido sintético ou
não,
➢ Formação do calo,
➢ Composto de fitohormônios e fatores de
crescimento.
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0100-204X2010000500001&script=sci_arttext
Suspensão celular 
➢ É cultura de explantes ou calos em um meio 
liquido;
➢ O crescimento é mais intenso que no meio 
semi- sólido;
Figura 1. a - Calos de limão 'Cravo' após 5 meses de cultivo. b- Suspensão celular de tangerina 
'Cleópatra' após 3 meses de cultivo. c- Primeira divisão celular de protoplastos de tangerina 
'Cleópatra' após 8 dias de cultivo. d- Microcolônias de limão 'Cravo' após 45 dias de cultivo. e-
Placa de Petri contendo embriões somáticos de tangerina 'Cleópatra' em fase de germinação. f-
Planta de tangerina 'Cleópatra' regenerada a partir de protoplastos, já aclimatada em vaso.
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0103-90161999000200023&script=sci_arttext
Cultura de órgãos
➢ Utiliza embriões de sementes que não 
germinam em condições normais;
➢ Levando ao aborto do eixo embrionário.
Culturas de anteras 
➢ Anteras em estagio de micrósporo uninucleados;
➢ Estas são separadas dos estames de botões
florais, esterilizadas e inoculadas em meio de cultivo
sólido ou liquido;
➢ As plantas jovens mantidas previamente em
condições ideais são as melhores fontes de anteras.
Cultura de protoplastos 
➢ Utiliza células de vegetais nuas, desprovidas de
membrana celulósica (protoplastos);
➢ Melhores fontes são os tecidos vegetais jovens e
calos.
Podem ser cultivados em: 
➢ Meio liquido ou semi-sólido;
➢ Semelhantes aos que são utilizados para cultivar
células;
➢ Meio sólido sendo os protoplastos plaqueados
ou embebidos em ágar;
➢ Aceticamente protoplastos isolados.
Os protoplastos podem fundir-se com o de
outras espécies, que pode vir a regenerar
híbridos interespecíficos.
➢ Podem ser cultivados in vitro e regenerar plantas completas;
➢ São utilizados na transformação genética de plantas, uma vez
que a ausência de parede celular torna mais fácil a introdução
de DNA estranho;
➢ São utilizados na obtenção de plantas híbridas, por fusão em
cultura;
➢ São usados em estudos de biologia celular, particularmente de
organelos celulares e de biossíntese da parede celular
Os protoplastos têm as seguintes aplicações:
http://ruisoares65.pbworks.com/w/page/24326349/Protoplastos
Culturas de meristemas
➢ Utilizam células meristemáticas e as cultiva in
vitro;
➢ Permite a obtenção de plantas livres de
patógenos, plantas “true to type”.
http://cienciasdavidaedaterra25.blogspot.com.br/2011_10_16_archive.html
http://www.lfdgv.ufsc.br/Apostila.htm
MICROPROPAGAÇÃO
É a aplicação de técnicas de cultura de
tecidos para a multiplicação de plantas realizadas
com pequenas partes do vegetal.
http://http://ruisoares65.pbworks.com/w/page/24326057/Tecido%20Caloso
TÉCNICA DE MICROPROPAGAÇÃO EM CULTURA IN-VITRO
VANTAGENS DESVANTAGENS
Utilização de apenas um indivíduo 
para originar vários, que é 
selecionado pelos seus caracteres
Requer técnicas especializadas
A rápida formação de indivíduos Requer equipamentos sofisticados 
São originadas plantas saldáveis e 
robustas 
Requer pessoas qualificadas
Recuperação de espécies em via de 
extinção 
Devido a não existência de 
variabilidade genética, um grande 
número de plantas poderá ser 
dizimado pela presença de outros 
indivíduos ou mesmo pela 
mudança repentina do clima
Plantas geneticamente iguais ao 
longo do tempo
A multiplicação de espécies vegetais in
vitro utiliza fenômenos de embriogênese
somática ou organogênese adventícia.
EMBRIOGÊNESE SOMÁTICA
As células somáticas formam embriões
somáticos que possuem morfologia idêntica ao
de um embrião zigóticos, esses embriões
germinam in vitro e produzem plantas.
ORGANOGÊNESE ADVENTÍCIA
Utiliza tecidos de lugares da planta que 
não são usados normalmente para a formação 
de tubérculos, rizomas, bulbos.
A produção de órgãos adventícios passa 
pelo estado de calo, mas não são raras as vezes 
que surge uma planta direta do explante. Para 
regenerar plantas “true to type” deve-se evitar o 
estádio de calo.
Aplicações da micropropagação
➢ Recuperação de plantas livres de doenças
através de cultura de ápices caulinares;
➢ Multiplicação em larga escala;
➢ Apoio aos programas de melhoramento
Genético;
➢ Conservação de germoplasma.
APLICAÇÃO NO MELHORAMENTO DE 
PLANTAS SUPERIORES
A cultura de tecidos proporciona:
➢ Variação genética;
➢ Condições para a seleção de genótipos superiores;
➢ Aplica o conhecimento para a compreensão dos
fenômenos bioquímicos que são responsáveis pelo
crescimento e desenvolvimento das células, tecidos e
órgãos.
Interação Planta-microrganismo in 
vitro
➢ Utilização de técnica de cultura de células em 
suspensão;
➢ A partir de protoplastos
➢ A cultura de tecidos vegetais in vitro é uma
ferramenta muito utilizada no estudo da biologia
dos vírus,
➢ Embora não esteja sendo muito eficiente no
entendimento dos eventos da infecção viral e de
sua multiplicação.
➢ Temos como exemplo o vírus mosaico do fumo 
(TMV – tabacco mosaic vírus) 
➢ Também tem permitido o crescimento de
bactérias fixadoras de nitrogênio in vitro.
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Vantagem:
➢ Possibilidade de controlar o ambiente na qual a
interação acontece sem a interferência de fatores
estranhos.
Controle de:
➢ Temperatura,
➢ Dos nutrientes e
➢ Do patógeno.
➢ Opiniões divididas:
Há diferença em culturas in vivo X in vitro
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Crescimento de vírus em cultura de 
tecidos
➢ Para a propagação de vírus in vitro
A dificuldade 
➢ Está relacionada ao tipo de tecido
meristemático.
➢ Devido à síntese de nucleoproteínas durante a
divisão celular;
➢ Compete com a síntese do DNA.
Formas de contornar a dificuldade de trabalhar 
com vírus
➢ Colocando protoplastos;
➢ Cultivo de células isoladas pelo método
enzimático.
➢ Produção de muitas plantas a partir do
meristema apical;
➢ Como por exemplo:
• Clones de Narcissus e Cimbidium foram
obtidos a partir de culturas de meristemas;
• Culturas como:
• Morango, batata, cravo, crisântemo e outras.
CRESCIMENTO DE FUNGOS EM 
CULTURAS DE TECIDOS
Os esporos dos fungos são esterilizados
superficialmente com hipoclorito e inoculados
assepticamente em tecidos ou órgão crescendo
em cultura.
FONTE: sbmicrobiologia.org.br
Problemas no estabelecimento e
manutenção de associações estáveis entre
fungos obrigatórios e tecidos em culturas.
➢ Pureza do inoculo;
➢ O sucesso na inoculação do tecido
hospedeiro.
Nas associações entre fungos e o tecido do
hospedeiro pode ocorrer excessivo crescimento
do fungo no meio de cultura, eliminando a
planta hospedeira, ou, ao contrario, pode
ocorrer o desaparecimento do fungo.
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=s0044-59672004000200006&script=sci_arttext
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=s0365-05962005000700004&script=sci_arttext
Cultura de raízes transformadas de
cenoura, crescendo em placas de Petri com 
meio “M”
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-54052007000100019
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1806-37132009000900013
OBRIGADO!