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Estudo Dirigido Imunologia Clínica Nome: ELIZABETE REGINA NUNES PEDRO Matrícula: 201908237678 Questão 1: Em uma transfusão de sangue total, é necessário verificar a compatibilidade sanguínea entre doador e receptor, pois, se não houver compatibilidade, as hemácias do receptor são destruídas, causando diversas complicações. a) Qual seria a maneira mais prática e rápida de verificar se o sangue do doador é compatível com o sangue do receptor? A tipagem ABO e Rh(D). b) Se você trabalhasse em um laboratório de análises clínicas, que tipo de reação imunológica realizaria para verificar o tipo sanguíneo do doador e do receptor? Reação antígeno - anticorpo c) Observe a figura o esquema da tipagem sanguínea. Em cada lâmina é colocada uma amostra de sangue de determinado tipo do sistema ABO. Em cada cavidade da lâmina foi acrescentada uma porção de soro contendo anticorpo anti-A ou anti-B. Após um tempo de reação, a aglutinação foi percebida em alguns casos, indicados pelo sinal (+). Com base nisso, indique o provável tipo sanguíneo presente em cada uma das lâminas Na lâmina A o provável tipo sanguíneo é tipo B. Na lâmina B o provável tipo sanguíneo é tipo A. Na lâmina C o provável tipo sanguíneo é tipo AB. Na lâmina D o provável tipo sanguíneo é tipo O (ou zero). Questão 2: Os fluoróforos, como rodamina, fluoresceína, ficoeritrina, entre outros, são compostos essenciais para a realização de certos imunodiagnósticos. a) Quais imunodiagnósticos fazem uso de fluoróforos? Citometria de fluxo e separação celular, Imunocitoquímica e ELISA. b) É possível utilizar mais de um fluoróforo em um mesmo teste? Qual é o benefício dessa possibilidade? Sim, pois Fluoróforos com características diferentes torna possível marcar antígenos diferentes com cores diferentes em um mesmo tecido ou célula, permitindo a observação simultânea de dois ou mais componentes. Questão 3: O esquema a seguir mostra as principais etapas de um imunodiagnóstico frequentemente realizado em laboratório de análises clínicas. a) Qual imunodiagnóstico está representado nesse esquema? Método do ELISA sanduíche b) Descreva o procedimento que deve ser realizado em cada etapa desse teste. 1) Adição do anticorpo de captura na placa de poliestireno, 2) Adição da amostra, 3) Ligação de anticorpo secundário na amostra/sanduíche, 4) Complexo de amplificação contendo enzima e 5) Adição do substrato e formação de um composto colorido. Questão 4: Com base nos seus estudos sobre exames imunológicos, relacione os seguintes fatores: >> amplificação de material genético; >> termociclador; >> eletroforese. a) Que exame diagnóstico envolve esses fatores? Qual é sua importância? PCR, Reação em Cadeia da Polimerase. É importante pois permite realizar várias cópias de um segmento específico de DNA com rapidez e precisão em um tempo reduzido, tendo utilidade em diversos segmentos, inclusive no diagnóstico médico. b) Explique com suas palavras como esse imunodiagnóstico é realizado. Ele é realizado em 3 passos, primeiro, na desnaturação, o DNA com dupla fita que possui a sequência que precisa ser analisada é desnaturado por meio de aquecimento por um curto período de tempo, tornando – se em uma fita única. Em segundo, em temperatura inferior a desnaturação, com as fitas separadas, vem o anelamento, em que se utiliza primers para completar as fitas. Por último, em um temperatura superior o anelamento e inferior a desnaturação, na fase de extensão, a partir dos primers, A DNA polímerase adiciona bases complementares formando fitas duplas de novo, reiniciando todas as etapas novamente até que o nível de amplificação seja alcançada. Como cada etapa precisa de uma temperatura especifica para ocorrer o termociclador é usado para determinar a temperatura e tempo, assim como ó número de ciclos que serão repetidos. No fim, a detecção do produto de amplificação é feita por eletroforese em gel de agarose que é corado para possibilitar a visualização.
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