Anticorpos monoclonais

Prévia do material em texto

Universidade Federal do Piauí - UFPI
Centro de Ciências da Saúde - CCS
Coordenação do Curso de Farmácia
Disciplina: Imunologia Clínica
Ministrante: Drº Evaldo Hipólito
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
Isabella Custódio, Lucas Mendes e
 Maria Clara Machado
Teresina-PI
2021
Introdução
Um anticorpo monoclonal é uma coleção pura de moléculas de anticorpo idênticas e com a mesma especificidade;
Um tumor de plasmócitos (mieloma ou plasmocitoma) é monoclonal -, produz anticorpos de uma única especificidade;
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
2
Possibilidade de produzir anticorpos monoclonais similares de qualquer especificidade desejada?
Pela imortalização de células secretoras de anticorpo individuais de um animal imunizado com um antígeno conhecido;
Ag monoclonal sáo proteínas que reconhecem antígenos de maneira específica e com um alto grau de afinidade. São advindos de um único linfócito B q é selecionado artificialmente e replicado inúmeras vezes como um clone, o mesmo só se liga a um epitopo de uma única forma, fato este que promove tal especificidade. 
Introdução
Anticorpos monoclonais e suas aplicações 
3
O método se baseia na fusão das células B de um animal imunizado (tipicamente um camundongo) com uma linhagem celular imortalizada de mieloma, seguido pelo crescimento dessas células sob condições nas quais as células normais e as células tumorais que não se fundiram não possam sobreviver;
As células fundidas resultantes que crescem são chamadas hibridomas, porque são híbridas de células B normais e de um mieloma. 
Cada hibridoma produz somente uma Ig, derivada de uma célula B do animal imunizado.;
Os produtos desses clones individuais são anticorpos monoclonais e cada anticorpo é específico para um único epítopo no antígeno usado para imunizar o animal;
Os anticorpos secretados por vários clones de hibridomas são triados para ligação a um antígeno de interesse e o clone com a especificidade desejada é selecionado e expandido.
hibridomas, da fusão de
duas células com características genéticas distintas células não tumorais não são capazes de
proliferar continuamente in vitro Esses anticorpos são direcionados a um epítopo
específico do antígeno por serem produzidos por um único clone de célula B fusionado
a uma linhagem de mieloma, que são células neoplásicas (tumorais), onde estas
apresentam competência de reprodução indefinida, podendo assim, serem cultivadas in
vitro por prolongados períodos de tempo
Introdução
Anticorpos monoclonais e suas aplicações 
4
O meio de seleção inclui hipoxantina, aminopterina e timidina, sendo por isso chamado meio HAT
Fonte: ABBAS, 2019
Introdução
Anticorpos monoclonais e suas aplicações 
5
Identificação de marcadores fenotípicos únicos a tipos celulares particulares
Definir os marcadores dos grupamentos de diferenciação (CD) para vários tipos celulares. 
Aplicações
6
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
Reconhecimento de populações celulares individuais - Ac específicos;
Há inúmeras aplicações dos anticorpos monoclonais na pesquisa, no diagnóstico médico e na terapia.
A base para a classificação moderna dos linfócitos e outros leucócitos é o reconhecimento de populações celulares individuais por meio de anticorpos monoclonais específicos. Esses anticorpos têm sido usados para definir os marcadores dos grupamentos de diferenciação (CD, do inglês clusters of differentiation) para vários tipos celulares.
Moléculas CD Moléculas da superfície celular expressas em vários tipos celulares no sistema imune, designadas pelo número do cluster of differentiation (grupamento de diferenciação) ou número do CD.
‹#›
Imunodiagnóstico 
Detecção de antígenos ou anticorpos particulares no sangue, urina ou tecidos, pelo uso de anticorpos monoclonais em imunoensaios;
Aplicações
7
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
Diagnóstico de muitas doenças infecciosas e sistêmicas;
Imunodosagem de hormônios, marcadores tumorais e de outras proteínas séricas - utiliza-se Ac monoclonais.
Imunodiagnóstico. O diagnóstico de muitas doenças infecciosas e sistêmicas se baseia na detecção de antígenos ou anticorpos particulares no sangue, urina ou tecidos, pelo uso de anticorpos monoclonais em imunoensaios (Apêndice III).
‹#›
Identificação tumoral
São usados para determinar a fonte tecidual dos tumores por meio da coloração de seções histológicas de tumores.
Aplicações
8
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
Ac monoclonais marcados e específicos;
AC monoclonais específicos para tumores são usados para a detecção de tumores por técnicas de imagens e para a imunoterapia.
‹#›
9
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
 Terapia. Avanços na pesquisa médica levaram à identificação de células e moléculas que estão envolvidas na patogênese de muitas doenças. Em razão de sua extraordinária especificidade, os anticorpos monoclonais fornecem os meios para detecção dessas células e moléculas. Muitos anticorpos monoclonais são utilizados terapeuticamente, hoje em dia (Tabela 5.3). Alguns exemplos incluem anticorpos contra a citocina fator de necrose tumoral (TNF, do inglês tumor necrosis factor), usados para o tratamento da artrite reumatoide e outras doenças inflamatórias;
anticorpos contra CD20, para o tratamento de leucemias derivadas de célula B e para a depleção das células B em certos distúrbios autoimunes; anticorpos contra receptores do fator de crescimento epidermal, como alvo de células cancerígenas; anticorpos contra o fator de crescimento endotelial vascular (uma citocina que promove angiogênese) em pacientes com degeneração macular; e assim por diante.
‹#›
Aplicações
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
10
É importante lembrar que os anticorpos monoclonais produzidos em camundongos devem ser humanizados;
Indivíduos que podem produzir anticorpos anti-camundongo e desencadear reações de hipersensibilidade por imunocomplexos;
HAMA
Sintomas não são claros;
Kits comerciais para determinação de HAMA (ETI - HAMAK);
Interfere nos testes imunológicos, principalmente na captura de antígenos como nos conjugados;
A utilização desses anticorpos resulta de três características: especificidade da ligação, homogeneidade, habilidade para ser produzido em larga escala;
Hama: Anticorpos anti-camundongo
ETI-HAMAK - dosagem de anticorpos humanos antiimunoglobulinas de origem murina
Aplicações
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
11
Uso de agentes bloqueadores: Nos diluentes são adicionados fragmentados de Ig, ou IgG policlonal ou soro animal não imune;
Retirada dos HAMAs da amostra por precipitação em polietilenoglicol ou proteína G-Sepharose;
Redesenho dos testes: Os anticorpos de animais usados nos testes podem ter quimerizados com Fc de IgG humana.
Estratégias para minimizar ou eliminar a interferência dos HAMAs;
Para reduzir esse problema do HAMA, anticorpos quiméricos tem sido utilizados
Regiões da molécula do anticorpo do camundongo, contendo o sítio de combinação com o antígeno, são fundidos com a região constante da molécula do anticorpo humano por engenharia genética
Aplicações
Anticorpos monoclonais e suas aplicações 
12
Fonte: EPIMED, visitado em Maio de 2021;
Só um exemplo de teste rápido para covid-19, elaborado pela epimed, em que emprega-se um anticorpos monoclonais anti proteína N do novo coronavírus (IgM e IgG) e anticorpos monoclonais de camundongo IgG
Outra aplicação são os testes de gravidez em que é empregado o anticorpo monoclonal anti-hcg, que gera reação química ao entrar em contato com o hcg (hormônio específico da gravidez) - MARCADOS COM OURO COLOIDAL
13
Anticorpos monoclonais e suas aplicações
‹#›
Referências:
Anticorpos monoclonais e suas aplicações 
14
ABBAS, A.K; LICHTMAN, A.H; PILLAI, S. Imunologia celular e molecular. 9. ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2019.
CORDEIRO, M.L.S; SILVA, N.L.F; VAZ, M.R.F; NÓBREGA, F.F.F. Anticorpos monoclonais: implicações terapêuticas no câncer. Revista Saúde e Ciência, v.3, n.3. p. 252-262, 2014.
SANTOS, R.V; LIMA, P.M.G; NITCHE, A; HARTH,F.M; MELO, F.Y; AKAMATSU, H.T; LIMA, H.C. Aplicações terapêuticas dos anticorpos monoclonais. Rev. bras. alerg. imunopatol, v. 29, n. 2, p. 77-85, 2006.