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Introdução à Bioquímica Clínica UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPÍRITO SANTO Departamento de Ciências Farmacêuticas Disciplina Bioquímica II O Laboratório de Bioquímica Clínica • Métodos: químicos e bioquímicos • ~ 1/3 das análises laboratoriais Testes Bioquímicos Tratamento Diagnóstico Prognóstico Prevenção + 400 testes diferentes Avaliação laboratorial bioquímica Hipótese diagnóstica Técnicas Laboratoriais Amostra biológica Análises/ Interpretação Laudo Resultados Controle de Qualidade Resposta Bioquímica PACIENTE Pedido médico Coleta de amostra Transporte F as e Pr é -A na lí ti ca Fase Analítica Análise Diagnóstico/Tratamento Liberação do laudo Interpretação dos resultados F ase Pós-A nalítica Execução dos Exames Bioquímicos Soro Reagente Solução colorida Leitura no espectrofotômetro Concentração Análise Bioquímica • Glicose • Creatinina, uréia e ácido úrico • Cálcio, fósforo e cloretos • Proteínas • Fosfatase alcalina , TGP e bilirrubina • Amilase • Fosfatase ácida Análise Bioquímica • Marcadores cardíacos • Colesterol total, HDL e triglicérides • Gasometria Análise Bioquímica Horário da coleta • A concentração de analitos varia em função do horário da coleta sanguínea, devendo-se atentar para as orientações especificadas em cada exame. • A meia-vida das drogas e o horário de sua administração devem ser considerados na determinação de níveis terapêuticos. • Da mesma forma, na exposição a elementos tóxicos devemos considerar o tempo decorrido para sua absorção e eliminação. Atividade física Imediatamente após exercício extenuante ocorre: lactato, amônia, creatinoquinase, aldolase, ALT, AST, fósforo, fosfatase ácida, creatinina, ácido úrico, haptoglobina, transferrina, catecolaminas e contagem de leucócitos. albumina, ferro e sódio. Jejum • Quando o jejum específico para cada exame não é respeitado, pode haver interferência em muitos analitos, como: bilirrubina, proteína total, ácido úrico, uréia, potássio, triglicérides, fosfatase alcalina, fósforo. • Alguns parâmetros permitem coleta em pacientes recém- alimentados. • Contudo, em exames como perfil lipídico, recomenda-se jejum de 12 horas no mínimo e 14 horas, no máximo. • Jejum prolongado pode elevar o catabolismo proteico promovendo aumento do ácido acetoacético. Dieta • As alterações nas concentrações dos analitos, dependem da qualidade e quantidade do alimento e do tempo em relação à coleta. • Dieta hiperprotéica uréia, amônia, e ácido úrico, sem alterar a creatinina. • A cafeína pode promover glicólise. • Dieta rica em purinas aumenta ácido úrico. Consumo de álcool Ações imediatas: glicose acetaldeído, acetato, ácido úrico, lactato, triglicérides. Uso contínuo: ácido úrico, ALT, AST, GGT HDL, triglicerídeos. É recomendável abstinência de álcool, por no mínimo 3 dias, antes da coleta da amostra quando o consumo é social. Tabagismo Eleva os níveis de hemoglobina, leucócitos e hemácias no sangue periférico, VCM, epinefrina, aldosterona, cortisol e CEA. Reduz os níveis de colesterol-HDL sérico e da atividade da Enzima Conversora da Angiotensina (ECA). Postura • A mudança da posição deitada para de pé provoca saída de água e substâncias filtráveis do espaço intra- vascular para o intersticial. • Proteínas, elementos celulares, e compostos associados às proteínas e células se elevam: albumina, cálcio, proteína total, bilirrubina, colesterol, triglicérides, várias enzimas, hemoglobina. Garroteamento • O torniquete deve ser usado por no máximo um minuto, mas mesmo dentro deste pequeno tempo, a composição do sangue pode se alterar de forma discreta. • Após 3 minutos de garroteamento: proteínas totais (5%), ferro (6%), colesterol (5%), AST (10%), bilirrubina (8%) e potássio (6%). • Exceder a 3 minutos provoca hemoconcentração e a estase venosa que se estabelece promove glicólise anaeróbica: lactato e pH. Garroteamento • Pode-se observar elevação de 10 a 15% no nível de colesterol com garroteamento superior a 5 minutos. • O ato de abrir e fechar a mão na hora da coleta deve ser evitado por causar aumento de potássio, fosfato, lactato, amônia e cálcio ionizado. Coleta do Sangue Espaço intravascular Estase venosa Espaço intersticial fluidos Tempo de torniquete 1 min (Hemoconcentração) RBAC, VOL 43, 2:85-88, 2011 Estase venosa RBAC, VOL 43, 2:85-88, 2011 Estase venosa RBAC, VOL 43, 2:85-88, 2011 Lima-Oliveira, G.S. et al, Phlebotomists performance during blood sample collection in public and private clinical laboratories in São Paulo city, Brazil. Clim. Chem. 53(S6): 205, 2007. Anticoagulante correto • A proporção do anticoagulante em relação ao volume a ser colhido também é muito importante. • Quando vários tubos são usados durante uma única punção, tubos sem aditivos devem ser utilizados primeiro, para que se evite contaminação. •Ordem de coleta: soro, citrato, heparina, EDTA e fluoreto Cor da Tampa Anticoagulante Exemplos de Uso Vermelha Nenhum Exames que requerem soro. Bioquímica e sorologia. Amarela Nenhum Exames que requerem soro. Contém gel separador Roxo EDTA Análise de sangue total e hematologia. Azul Claro Citrato de Sódio Exames de coagulação (TAP, TTPa, Fibrinogênio) Cinza Fluoreto de Sódio Glicose (impede a glicólise) Verde Heparina Alguns exames especiais. ANTICOAGULANTES Coleta da amostra •Ordem de coleta: soro, citrato, heparina, EDTA e fluoreto Hemólise • Hemólise leve tem pouco efeito sobre a maioria dos exames. • Hemólise significativa causa aumento na atividade plasmática da aldolase, AST, fosfatase alcalina, desidrogenase láctica e nas dosagens de potássio, magnésio e fosfato. • A hemólise diminui a concentração de insulina. Hemólise Lipemia Icterícia Soro ictérico Idade • A atividade da fase osteogênica: fosfatase alcalina • idade a massa muscular Clearence da Creatinina. • idade: colesterol-LDL. • Em torno dos 80 anos pode surgir elevação do TSH. • Fenômeno oposto ocorre com o T3, com diminuição em torno de 11% com aumento da idade. Sexo • As diferenças ocorrem, sobretudo, em função da massa muscular e diferenças endócrinas. • CK e CK-MB mais alto em pacientes do sexo masculino. Gravidez • O efeito dilucional promove alteração das proteínas plasmáticas. • Com o aumento da filtração glomerular na gravidez, em torno de 25% ocorre do Clearence da creatinina. • Mudanças na produção e concentração dos hormônios fertilizantes, que ocorrem na gravidez, é acompanhada por mudanças em vários analitos (proteínas, principalmente as de fase aguda, enzimas, elevação do VHS, diminuição do ferro sérico e ferritina). Raça • Negros americanos de ambos os sexos têm significante redução dos leucócitos, quando comparados a indivíduos da raça branca. • Significativa diferença observa-se na atividade de CK em ambos os sexos entre brancos e negros. • Observa-se também alterações na concentração de Vit. B12 entre as duas raças. •Identificação •Quantidade •Aspecto Amostra Biológica ADEQUADA INADEQUADA Realizar os exames Solicitar nova amostra Critérios de rejeição de amostras • Presença de hemólise, lipemia, icterícia. • Falta de informações importantes para execução do exame. • Inadequação de tubos, volumes, aditivos e conservantes. • Centrifugação inadequada. • Conservação inadequada da amostra. • Tempo inadequado entre a coleta e o processo. • Transporte inadequado. • Identificação incompleta ou incorreta da amostra. • Acidentes.Critérios de rejeição de amostras Futuro do Laboratorio https://futurumresearch.com/front-line-digital-health-doctors-think-technology-patient-care/ AUTOMAÇÃO LABORATORIAL Teste Laboratorial Remoto (TLR) • É um teste realizado por meio de um equipamento laboratorial, também conhecido como TLP – teste laboratorial portátil – ou POCT (do inglês point-of-care-testing) Utilização de testes remotos para Troponina em Unidades de Pronto Atendimento (UPAs) Ex.: testes de coagulação, gravidez, hematológico, de urina, toxicológico, gasometria, glicêmico, dentre outros inúmeros Testes laboratoriais remotos na Farmácia • Hilab /railébi/ é um laboratório com sede em Curitiba, Paraná, que oferece serviços de exames laboratoriais remotos 24 horas para farmácias, clínicas e consultórios médicos e outros estabelecimentos de saúde em todo o Brasil. • Com apenas algumas gotas de sangue da ponta do dedo, o dispositivo Hilab realiza exames utilizando as metodologias de Imunocromatografia e Colorimetria. E graças às tecnologias como a Internet das Coisas (IoT), Inteligência Artificial (I.A) e a parceria com a Microsoft e Intel, o Hilab consegue fazer exames em poucos minutos, a qualquer hora e em qualquer lugar. • Após a coleta, feita com algumas gotas de sangue do dedo, o sangue é inserido no dispositivo Hilab, onde o resultado é digitalizado e transmitido instantaneamente via internet para a equipe do Laboratório Central. Lá os Biomédicos realizam a análise do resultado, emitem e assinam o laudo, tudo isso em 15 minutos. Logo em seguida, o laudo é enviado ao e-mail do paciente, mas também pode ser impresso no local onde foi feito o exame, ou neste portal. https://hilab.com.br/o-que-e-hilab/ Digital health debate 2015 https://www.cellohealthinsight.com/wp-content/uploads/2015/11/Digital_Health_Debate_2015.pdf http://hotsoft.com.br/sensor-de-monitoramento-de-glicose-no-apple-watch/ http://hotsoft.com.br/digital-health-evolucao-para-continuar-no- mercado/?utm_campaign=labnews__24012018_- _demais_listas&utm_medium=email&utm_source=RD+Station
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