Preparo e esterilização de meio de cultivo: ágar sangue

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Preparo e Esterilização de Meio de Cultivo:
ÁGAR SANGUE
contém
quantidades
17,86 ml - sangue desfibrinado de 
carneiro 
357,2 ml - meio base (ágar) 
igual a: 
7,144g de ágar em 357,2 ml de água 
destilada (2% p/v)
TOTAL: 375,05 ml 
usado para
Verificação de hemólise em 
microrganismos não fastidiosos
Sangue desfibrinado de carneiro 
(5%)
meio base (ágar)
contendo hemácias íntegras para
produção em laboratório usando
- EPIs
- Ágar em pó
- Sangue desfibrinado de carneiro
- Placas de petri 90 mm
- Papel alumínio
- Balança
- Béquer
- Água destilada
- Tampão de algodão
- Papel craft
- Cabine de fluxo laminar
- Bico de bunsen
- Tela de amianto
- Autoclave
- Caneta para identificação
- Papel filme PVC
de
Esfriar a base em banho maria a 
45ºC +/- 2ºC
Adicionar 17,86 ml de sangue 
desfibrinado de carneiro e 
homogeneizar
Checar o pH (deve ser 6,8 +/- 
0,2)
Distribuir em 15 placas de Petri 
esterilizadas de 90 mm de 
diâmetro
Deixar semi aberta na cabine 
para evitar condensação
Deixar solidificar em temperatura 
ambiente
Identificar o tipo de meio e data 
na placa
Embalar em papel filme para 
evitar perda de umidade
Conservar virado para baixo de 
4 a 10ºC por 4 meses
cabine de fluxo 
laminar
INOCULAÇÃO
Incubação de uma parcela por 24 
horas (não deve haver alteração) 
Inoculação de uma parcela com 
organismos que fazem hemólise 
alfa, beta e gama
Profundidade: picar o meio 
com a alça de platina
INTERPRETAÇÃO
classificação
Sólido
Composição química complexa
Função diferencial
de
1º - ágar base
como
2º - ágar sangue
como
como
como
Superfície: estrias 
simples ou compostas
Incubar com tampa para baixo 
a 35ºC por 24h
como
para
realizar
CONTROLE DE 
QUALIDADE
onde
Halo transparente ao 
redor das colônias 
(lise total dos 
eritrócitos)
Halo esverdeado ao 
redor das colônias 
(lise parcial dos 
eritrócitos)
Ausência de halos 
(eritrócitos não 
afetados)
Beta 
hemólise
Alfa 
hemólise
Gama 
hemólise
sesese
15 placas de Petri de 90mm 
(25 ml cada)
distribuído em
Pesar 7,144g de ágar em pó em 
um papel alumínio
Em um becker, hidratar o ágar 
adicionando lentamente 357,2 
ml de água destilada
Agitar o frasco devagar e 
aquecer no bico de bunsen 
sobre uma tela de amianto até 
homogeneizar (não deixar 
ferver)
Tampar o frasco com tampão de 
algodão e papel craft em volta
Esterilizar o meio em autoclave 
(15min, 121ºC)
onde
TAUANNE GONÇALVES FERREIRA - 98958 - P5
	ágar sangue - ES98958 - P5
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