Antibiograma | TSA

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Antibiograma | TSA
Realizado em uma placa de Ágar Mueller-Hinton, testa a sensibilidade das bactérias a
determinados antibióticos. Os antibióticos são inseridos nas placas em discos de papel.
METODOLOGIA: Kirby e Bauer
MATERIAIS: Estufa bacteriológica, Alça bacteriológica em
platina ou descartável, Ágar Mueller Hinton em placas
90x15 mm ou 140x15 mm, Escala Mac Farland 0,5,
Solução salina estéril ou soro fisiológico 0,85%, Swabs
estéreis para espalhamento da suspensão, Tabela com os
valores esperados de halos inibitórios, Bico de Bunsen.
TIPOS DE AMOSTRAS
Colônias puras de bactérias Gram negativas ou Gram
positivas, cultivo bacteriano recente de 18 a 24 horas, obter bactérias isoladas a partir de
meios de cultura não seletivos.
ARMAZENAMENTO
São viáveis para a realização do teste até cerca de 24 horas de cultivo; depois de 24
horas deve-se fazer novo repique da cepa.
REJEIÇÃO DA AMOSTRA
Amostras que ultrapassaram o tempo máximo de estabilidade, amostras que foram
cultivadas em meios que não são seletivos e amostras contaminadas.
PROCEDIMENTO
Embeber um swab estéril na suspensão bacteriana, pressioná-lo contra as paredes do
tubo para tirar o excesso da suspensão coletada, semear em todas as direções, de modo
a cobrir toda a placa e inserir os discos de papel contendo antibióticos.
ANTIBIÓTICOS
São medicamentos utilizados especificamente para a eliminação de bactérias sem
danificar as células do corpo.
MECANISMO DE AÇÃO
• Alcançar os alvos moleculares, que são intracelulares. Para isso, o antimicrobiano
precisa ultrapassar a membrana celular;
• Matar a bactéria;
• Evitar a ação das bombas de efluxo, impedindo que as mesmas despejem
antimicrobianos para fora da célula;
• Evitar a inativação por enzimas capazes de modificar o fármaco no ambiente
extracelular ou no interior da célula.
RESISTÊNCIA BACTERIANA
Natural: Ocorre independentemente de o indivíduo usar ou não o antibacteriano pela
introdução de DNA estranho contendo genes de resistência.
• Conjugação: transferência de material genético através do pili sexual.
• Transformação: ocorre pela absorção de fragmentos de DNA presentes no ambiente,
originados de outras bactérias mortas e decompostas.
• Transdução: troca de material genético entre bactérias com a participação de um
bacteriófago.
Adquirida: ocorre quando o tratamento é encerrado antecipadamente ou quando há uso
muito frequente.
MICROBIOTA
Presentes no intestino e atuam para a homeostasia intestinal
- MICROBIOTA PERMANENTE – microbiota normal do organismo;
- MICROBIOTA TRANSITÓRIA – presença de microrganismos que podem habitar a
pele e/ou membranas mucosas por horas, dias ou semanas;
A microbiota pode ser comprometida devido afecções e infecções, mas também existem
substâncias ingeridas que podem atuar na melhora do funcionamento da microbiota:
- COMENSALISMO: organismos que se beneficiam enquanto o outro não é afetado;
- MUTUALISMO: é um tipo de simbiose onde a interação é benéfica a ambos os
organismos;
- PARASITISMO: um organismo se beneficia com a extração de nutrientes do
hospedeiro, gerando prejuízo ao outro organismo;
- PROBIÓTICOS: são alimentos que contém bactérias vivas que atuam como
suplemento alimentar, auxiliando o equilíbrio da microbiota intestinal, trazendo
benefícios ao hospedeiro;
- PREBIÓTICO: são alimentos ingeridos não-digeríveis (indigestos) pelo ser
humano, mas promovem a seleção das espécies benéficas e limitam o número de
bactérias no intestino, beneficiando assim o hospedeiro;
- SIMBIÓTICOS: são alimentos que combinam os probióticos e prebióticos.
Sítios estéreis: sangue, líquido cefalorraquidiano, órgãos (coração, pâncreas, baço,
fígado). Os animais, incluindo os seres humanos, geralmente são livres de
microrganismos quando na vida intrauterina.
ENDOBACTÉRIAS
Bacilos gram negativos, a maioria habita o intestino.
COLIFORMES FECAIS OU TERMOTOLERANTES
Encontradas no intestino, como por exemplo a Escherichia coli e bactérias do gênero
Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter.
CARACTERÍSTICAS GERAIS
Bacilos Gram-negativos e Anaeróbios facultativos, não esporulados.
Não resistem a luz solar, dessecação, pasteurização e desinfecção comum.
Podem ser cultivadas em diversos meios de cultura, como o Ágar MacConkey e o Ágar
Sangue.
IDENTIFICAÇÃO DE BACILOS GRAM-NEGATIVOS
A identificação pode ser dada através do Enterokit B
• EPM: fermentação e produção de gás a partir da glicose (presença de bolhas ,
rachaduras ou deslocamento do meio no tubo), produção de H2S (enegrecimento do meio
em qualquer intensidade), hidrólise da ureia (aparecimento de cor azul na base do meio) e
desaminação do triptofano (aparecimento de cor verde na superfície do meio é positiva).
• Mili: contém os testes de Motilidade (quando a bactéria é móvel, nota-se crescimento
além da picada central turvando parcial ou totalmente o meio. Bactérias imóveis crescem
somente na linha da picada), Descarboxilação da lisina (quando a lisina é descaboxilada o
meio adquire cor púrpura arroxeada. Quando a lisina não é descarboxilada o meio adquire
cor amarela nos 2/3 inferiores do meio) e a Produção de Indol (após a leitura dos testes
de motilidade e lisina, são adicionadas 5 gotas do reativo de Kovacs no tubo. Quando a
bactéria produz indol o reativo adquire cor vermelha ou rosa. Quando negativa o reativo
continua amarelo).
• Citrato: determinar a capacidade do microrganismo de utilizar o citrato de sódio como
única fonte de energia para seu metabolismo e crescimento