Cromossomo e cromatina

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Cromossomo e cromatina
cromatina
Eucromatina: DNA funcional. Dinâmica (sofre o processo de condensação e
descondensação), representa a maior parte do material cromossômico. Núcleo claro –
muito metabolismo, alta atividade biológica. Muita eucromatina.
Heterocromatina: sem alterações durante a intérfase e a fase M, encontrada nos telômeros,
centrômeros, cromatina sexual e no cromossomo Y. Encontrada associada a membrana
nuclear interna e envoltório do nucléolo.
Complexo de DNA e proteínas que se encontram dentro no núcleo nas células eucarióticas.
Parte que cora. 
*gene SRY – determinante da masculinidade.
histonas
por uma interação positivo-negativo o DNA se enrola no octâmero, dando quase 2
voltas completas ao redor. Para poder estabilizar-se, temos ao redor do octâmero uma
histona H1. O H1 também força o material a outra compactação, em solenoides,
dobramentos secundários. Quase todo o DNA se compacta na cromatina.
Nucleossomo - “colar de pérolas” - DNA, histona, DNA, histona.
São pequenas e de carga positiva. Principais proteínas da cromatina. Estruturação
do octâmero da cromatina (oito moléculas de proteínas (histonas)): 
Com a formação do solenoide, outras proteínas (não-histonas) formam alças ou domínios.
As alças formam espessamentos parecidos com nós, chamados de cromômeros.
cromossomos
 Longa sequência de DNA, que contém vários genes e outras seq. de nucleotídeos com
funções especificas. Durante o ciclo celular, os cromossomos passam por estágios de
condensação e descondensação. 
 Quando as celular completam mitose ou meiose os cromossomos se descondensam e
retornam ao seu estado relaxado como cromatina e retornam ao seu estado relaxado, prontos
para recomeçar o ciclo.
 À medida que os cromossomos se condensam mais, os cromômeros adjacentes fundem-se
em estruturas maiores e tornam-se depois as bandas cromossômicas. Cada cromossomo tem seu
padrão específico de banda.
Centrômero - é a constrição primária que divide o cromossomo em braço P e Q (para cima
do centrômero - P, curto / abaixo do centrômero - Q, longo), faz a estabilização do
cromossomo;
Satélite ou zona SAT - porção terminal do cromossomo, separada por constrição secundária
(opcional); região organizadora de nucléolo.
Telômero - parte final dos braços dos cromossomos, mantém a estabilidade e integralidade
do cromossomo, via telomerase fornece meio de replicações do DNA nas extremidades,
ancora o cromossomo no envoltório nuclear, inicia o pareamento dos cromossomos
homólogos, controla a divisão celular.
 Os cromossomos são formados por espiralização ou condensação máxima dos cromossomos.
*** Cinetócoro = disco de proteína.
organização dos cromossomos
Metacêntrico - centrômero bem no meio;
Submetacêntrico – centrômero um pouco mais pra cima;
Acrocêntrica – centrômero quase na ponta;
Telocêntrico – centrômero na ponta.
classificação dos cromossomos 
(quando há divergência de tamanho, o braço P sempre maior que o braço Q).
Cada núcleo tem dois conjuntos de cromossomos, que formam pares de
homólogos, Esses organismos são diploides (2n) e formam células reprodutoras ou gametas
haploides (n) com apenas um conjunto de cromossomos.
Genoma é o conjunto haploide de cromossomos
NÍVEIS DE CONDENSAÇÃO DO DNA
DNA –> nucleossomo –> cromatina –> cromossomos (compactação)
A partir da cromatina o DNA já cabe na célula.
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recebem pré-tratamento alcalino e com calor;
padrão de coloração das bandas é o inverso
do encontrado no bandeamento pelo Giemsa;
bandas escuras são ricas em CG.
utiliza cromossomos em  estágios iniciais da
mitose (prófase ou prometáfase) ;
menor condensação -> mais  bandas são visíveis ->
microdeleções .
Banda R
alta resolução
bandeamentos seletivos
cora a heterocromatina centromérica;
tratamento do centrômero com ácido, seguido de uma
solução alcalina e coloração pelo Giemsa
uso de AgNO3 (nitrato de prata);
marcam as regiões organizadoras nucléolo - braços p
dos cromossomos acrocêntricos 
uso de sondas de DNA ligadas ao fluorocromos;
desnaturação e renaturação do DNA -> HIBRIDIZAÇÃO;
sondas de DNA: sequências curtas de DNA complementares
ao filamento/região a ser estudada;
 sondas de painting: para aneuploidias, deleções,
translocações e identificar cromoss. marcadores. Ligam-
se a todas as posições;
sondas centroméricas: alterações a nível do centrômero;
sondas de sequência única - gênicas, proto-oncogenes; 
micro-deleções e alterações envolvendo genes especí-
ficos e oncogenes;
sondas subteloméricas. translocações atípicas que
envolvem essas regiões.
Banda C
NOR
FISH
obtenção do cariótipo
sangue periférico;
vilosidades crônicas (rápido ou cultivo) - 10 a 12 semanas;
líquido amniótico – 14 a 20 semanas;
medula óssea - biópsia de pele;
biópsia testicular;
tumores.
células em divisão ativa ;
tratamento com a colchicina - destrói os microtubúlos que
não possuem MAPS (fuso centríolo-centrômero) 
cromossomo não entra em anáfase 
fixação na lâmina 
aplicação do corante (e.g.: Giemsa) 
análise por microscopia – a imagem na lâmina é fotografada e
os cromossomos são dispostos automaticamente, com seus
respectivos homólogos, por um computador.
O material genético é extraído de:
Como se extrai e analisa:
técnicas de bandeamento por
citogenética convencional
o padrão das bandas reflete a organização funcional do
genoma;
cada banda contém cerca de 1250kB de DNA -> cluster;
os clusters se replicam em momentos distintos do ciclo
celular ;
o princípio da técnica molecular baseia-se na composição de
bases nitrogenadas do DNA, de histonas;
objetivo: detecção de alterações cromossômicas ;
tem-se que marcar os cromossomos de uma forma
particular - permitir diferenciação entre os 23 pares
 2 tipos: 
 Bandeamento diferencial: o cromossomo é corado
como um todo;
 Bandeamento seletivo: apenas regiões específicas se
coram com a técnica.
bandeamentos diferenciais
cromossomos são tratados com quinacrina mostarda
e visualizados sob luz ultravioleta; 
diferença no brilho das bandas se dá devido à diferença
relativa nas quantidades dos pb AT e CG ;
se coram em bandas brilhantes e opacas.
tratamento com enzimas de ação proteolítica, seguida
de coloração pelo Giemsa; 
bandas escuras: ricas em pb AT, replicam mais tardiamente,
DNA não-codificante;
bandas claras: ricas em pb CG, de replicação mais precoce na
fase S, abundantes em genes .
Banda Q
Banda g E gtg
nomenclatura ISCN
A numeração das bandas e regiões é realizada de forma crescente
do centrômero para as extremidades. O centrômero é designado
como 10, a região em direção ao braço curto é designada como
p10 e a região voltada para o braço longo q10
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