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• Fita dupla; • Orientação antiparalela; • Conformação em alfa-hélice; • Polímero constituído por nucleotídeos (grupo fosfato + desoxirribose + bases nitrogenadas); • Pares púricas: Guanina e Adenina (2 anéis); • Bases pirimidínicas: Timina e Citosina (1 anel); Obs.: a diferença entre as bases está relacionada ao radical que os anéis estão ligados. Obs. 2: a numeração dos carbonos da base é seguida pelo apóstrofo (‘). • Direção de síntese de DNA: 5’-3’ - Começa no carbono 5’ da pentose e termina no carbono 3’. - O fosfato está ligado no carbono 5’. - Um nucleotídeo só pode ser adicionado no carbono 3’ e esse deve ter um grupo hidroxila. • Regra de Chargaff da composição de bases: - A quantidade total de nucleotídeos pirimídicos (T+C) é igual a de purínicos (A+G). • Ligação N- Glicosídica: entre o açúcar e a base. • Ligação fosfodiéster: entre um nucleotídeo e outro da mesma linha. Conecta o carbono 5’ de uma desoxirribose ao carbono 3’ da desoxirribose adjacente. • Ligações de hidrogênio: une as bases nitrogenadas de cada filamento. • Molécula estável: o empilhamento das bases exclui moléculas de água dos espaços entre as bases. • Semiconservativa: deselicoidização dos filamentos da dupla-hélice e construção de um novo filamento complementar. • Forquilha: local no qual a dupla-hélice é desenrolada para produzir dois filamentos únicos que atuam como moldes para acópia. • Helicases rompem as ligações de hidrogênio. Topoisomerases evitam a helicoidização excessiva. • O DNA desenrolado é estabilizado por meio de proteínas de ligação a filamento simples (SSB) que se ligam ao DNA unifilamentar evitando a reestruturação do dupléx. • DNA polimerase III sempre adiciona nucleotídeos na extremidade 3’ em direção à 5’. A nova fita cresce no sentido 5’ para 3’. Sentido da vida: 5’-3’. • Filamento contínuo (leading): síntese de modo contínuo e suave na direção da forquilha. • Filamento descontínuo (lagging): esse filamento tem sentido 5’ para 3’, impedindo a atuação direta da DNA polimerase. A síntese de cada fragmento de Okazaki é iniciada por um primer (sintetizado por primases – um tipo de RNA polimerase). A DNA polimerase (po I) remove os primers e DNA ligase une a extremidade 3’ à 5’, formando uma ligação fosfodiéster. • A DNA polimerase também tem a função de remover pareamentos incorretos entre as bases nitrogenadas. Telômeros: • Na replicação descontínua há necessidade de primers, os quais são removidos no final do processo, porém quando o último é removido faltam sequências no final daquele filamento, permanecendo uma ponta unifilamentar em uma das moléculas-filhas de DNA. Portanto, a cada replicação, o telômero continuaria se encurtando até que o DNA perdesse as informações codificantes. • As células adicionam múltiplas cópias de uma sequência não codificadora simples ao DNA nas pontas do cromossomo. Apenas as sequências repetidas e sem Fragmentos de Okazaki: Pedaços de DNA montados na fita filha descontínua informações que são perdidas nas replicações. Telomerase: enzima que adiciona repetições curtas às extremidades 3’ das moléculas de DNA, essa proteína carrega uma molécula de RNA que atua como molde para a síntese da unidade de repetição telomérica (TTA GGG). • Alças T: estruturas existentes nos telômeros de todos os cromossomos lineares, constituídas pela extremidade 3’ unifilamentar da fita de DNA. • Ponto positivo das telomerases: prevenção da erosão do material genético a cada replicação e associação com proteínas para formar capuzes protetores (eles isolam os prolongamentos unifilamentares 3’, os quais são confundidos pelas células como quebras filamentares, desencadeando instabilidades que levam ao câncer). • Células somáticas produzem pouca telomerase: telômeros progressivamente mais curtos. (Ligação com o envelhecimento). • Funções dos telômeros: - Previnem fusões e recombinações; - Auxiliam no término da replicação de cromossomos lineares; - Ancoram cromossomos dentro do núcleo; - Influenciam na expressão gênica (reduzem-se); - Indicam a idade celular. • Fita simples; • Polímero constituído por nucleotídeos (grupo fosfato + pentose + base); • Bases nitrogenadas: Adenina, Uracila, Citosina e Guanina; • RNAs estruturais: - RNA transportador: conduz o aminoácido referente a um códon até o ribossomo. - RNA ribossômico: une-se com proteínas pra formar ribossomos nos nucléolos durante a tradução. - RNA nuclear (snRNA); - Micro RNA (miRNA): regulam a expressão dos RNAm. - Pequenos RNAs de Interferência (siRNA): silencia o gene que o produz. • Direção da síntese de RNA: 5’->3’. • Timina do DNA é substituída pela Uracila no RNAm. • Promotores: sequências de DNA (TTG CAT e TAT AAT) que antecedem a primeira base a ser transcrita do gene e são localizadas na região 5’ do gene, onde se inicia a transcrição 1. Como ocorre a transcrição? • A transcrição depende do pareamente complementar de bases. • E qualquer gene, APENAS UM filamento de DNA é usado como molde. Sempre o filamento com início na extremidade 3’. • Crescimento do RNA no sentido 5’ para 3’, ou seja, os nucleotídeos são adicionados na ponta em crescimento 3’. • O filamento de DNA molde deve estar orientado de 3’ para 5’. • À media que a molécula de RNA polimerase se movimenta ao longo do gene, ela desenrola a dupla-hélice de DNA à sua frente e enrola novamente o DNA que já foi transcrito. • Fatores de capeamento adicionam o capacete (CAP) na região 5’ do RNAm para protege- lo da degradação. A Poli A polimerase adiciona a Cauda Poli A na região 3’ do RNAm para protege-lo da degradação de enzimas. • A sequência de nucleotídeos no RNA deve ser a mesma daquela no filamento não molde (filamento codificador) do DNA, exceto pela troca da T pela U. Por quê a transcrição em célula eucariota é mais complexa? • Presença de muitos genes a serem reconhecidos e transcritos. • Presença de núcleo. • DNA genômico organizado em cromatina, enquanto nos procariotas está “despido”. Splicing do RNA: • - Recomposição do RNA. • - Os íntrons são retirados para que os éxons se juntem. • - Íntrons: regiões que separam os éxons com função desconhecida; aproximadamente 2000 nucleotídeos. • - Éxons: regiões codificantes do RNA, com aproximadamente 200 nucleotídeos. • - snRNP: pequenos RNAs nucleares que associados a diversas proteínas constituem o Spliceossomo (proteína), o qual tem a função de retirar os íntrons e religar os éxons. • Atuação do Sliceossomo: 1- Une uma extremidade do íntron à adenina interna conservada, formando uma estrutura em alça, no formato de um laço de caubói. 2- Libera o laço e une os dois éxons adjacentes. Obs.: A remoção de íntrons é catalisada pelos snRNA e não pelo componente proteico do spliceossomo. Obs. 2: Alguns íntrons são autorremovíveis, em que o próprio íntron catalisa a sua remoção do pré-RNA. • Splicing alternativo: combinações de éxons para a formação de diferentes proteínas a partir de um único gene. • Decodificação do RNAm para usar sua informação para sintetizar proteínas. • Códon: trinca de bases do RNAm que codifica um aminoácido. • Código genético: relação entre as bases do gene, por intermédio do RNAm, traduzida em uma sequência de aminoácidos, na proteína. - Especificidade: cada códon codificará um aminoácido em específico. - Universalidade: a especificidade de um códon é a mesma para qualquer indivíduo. - Degenerado: mais de um códon corresponde ao mesmo aminoácido. • RNA transportador: pequenas moléculas de RNA responsáveis por trazer os aminoácidos ao local de síntese proteica. • RNA ribossômico: organela constituída de ribonucleoproteínas, dividida em duas subunidades e responsável pela síntese proteica. • RNA mensageiro: tem a função de orientar a síntese proteica.• Sítios ativos do ribossomo: • O RNAm é traduzido na direção 5’->3’. • Uma molécula de RNAm pode ser traduzida por vários ribossomos simultaneamente. • Síntese proteica: - Subunidade menor do ribossomo junta-se aparte inferior do RNAm e a subunidade maior fica sobre a parte superior do RNAm. - O RNAt localiza-se na subunidade maior do ribossomo e seu anticódon é complementar ao códon do RNAm, correspondendo a um aminoácido. - Códon iniciador: AUG (aminoácido: metionina). - Alongamento: crescimento do polipeptídio. Os aminoácidos realizam ligações peptídicas entre si. - Término: liberação do polipeptídio do ribossomo. Stop códon: UAA, UAG, UGA (não correspondem a nenhum aminoácido). - Após a tradução, as proteínas se dobram dentro das células pelas proteínas chaperonas, além disso, as cadeias laterais dos aminoácidos são modificadas.
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