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Pseudomonas aeruginosa Profa Dra Denise von Dolinger de Brito UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA Instituto de Ciências Biomédicas Mais frequente bacilo Gram-negativo não fermentador Ubiquitário (solo, água, vegetais, animais, alimentos e ambientes hospitalares) Raramente causa infecção em indivíduo imunocompetente Patógeno oportunista Infecção é difícil de ser erradicada e controlada Fracassos terapêuticos Ampla expressão de fatores de virulência Características fisiológicas Família Pseudomonadaceae Grupo fluorescente Bacilo Gram-negativo reto Não esporulado Móvel por um simples flagelo polar Características fisiológicas Bactéria aeróbia Obtenção de energia à partir de carboidratos Não fermentadora de glicose Versatilidade (cresce em quase todos os meios de cultura) Agar pseudomonas Oxidase e catalase positivos Citrato positivo Indol negativo Amplamente presentes no solo e na água São capazes de sobreviver em ambientes inóspitos como sabão, desinfetantes e plásticos (produzem biofilme) São resistentes a muitos antibióticos e desinfetantes Teste da Oxidase Teste de oxidase positivo: Aplicar a colônia em um papel de filtro e adicionar o reativo: dimetil – p – fenilenediamina. Coloração roxa indica teste positivo. Princípio: baseia-se na capacidade de produção de enzimas oxidativas que na presença de oxigênio e de aminas aromáticas reagem produzindo um composto colorido. Oxidase positivoOxidase negativo Fatores de virulência Resumo dos fatores de virulência de Pseudomonas aeruginosa Fatores Descrição Adesinas Fimbrias Invasina Elastase, hemolisinas, citotoxina Motilidade/quimiotaxia Flagelo Toxinas Exoenzimas e LPS (lipopolissacarídeo) Propriedade antifagocítica Slime (biofilme), LPS Defesa contra o poder bactericida do soro Slime (biofilme), LPS, enzimas proteases Atributos genéticos Mudanças genéticas por transdução e conjugação, resistência natural a drogas, plasmídios de resistência Outros atributos Adaptabilidade a requerimentos nutricionais mínimos, presença em grande variedade de habitats Fatores de virulência Componentes estruturais envolvidos na patogenicidade -Fímbrias ou pili -Flagelo -Lipopolissacarídeo -Slime Fatores Extracelulares -Exoenzimas -Exotoxina A -Proteases -Fosfolipase (destrói o surfactante pulmonar) -Slime Resistência às drogas antibacterianas Cefalosporinase AmpC ESBL (β-lactamases de amplo espectro) Metalo-β-lactamases (resistência aos carbapenêmicos) Bombas de efluxo Fases da patogênese de infecção por Pseudomonas aeruginosa Colonização • Alteração das defesas de primeira linha • Adesão mediada pelos fatores de virulência celulares Infecção crônica • Em pacientes com fibrose cística • Seleção de cepas mutantes, resistentes às defesas do organismo • Baixa produção de fatores de virulência extracelulares • Dano tissular devido ao processo de inflamação crônica Infecção aguda • Quorum sensing estimula produção de grande quantidade de fatores extracelulares • Dano tissular provocado por proteases e toxinas leva à invasão dos vasos sanguíneos, disseminação, síndrome da resposta inflamatória sistêmica, insuficiência múltipla dos órgãos e morte Principais infecções causadas pela Pseudomonas aeruginosa e fatores predisponentes Infecções Fatores predisponentes Trato respiratório superior: otite externa, sinusite, conjuntivite, ceratite Uso prolongado de lentes de contato, esportes aquáticos Trato respiratório inferior: pneumonia, infecção pulmonar crônica na fibrose cística Fibrose cística, inalação de ar quente durante incêndios, ventilação mecânica Sistema nervoso central e bacteremia: septicemia, meningites, abcesso cerebral, endocardite Ferida cirúrgica, traumas, infecção secundária à bacteremia Trato urinário Cateterismo, cirurgias, transplante renal Trato gastrointestinal: enterocolite necrotizante Pacientes leucêmicos Infecções superficiais e tecidos moles: ectima gangrenoso, foliculite necrotizante, necrose Queimadura de terceiro grau, banhos quentes, depilação, esportes aquáticos Infecções ósseas e das articulações: osteomielite Disseminação hematógena Fibrose cística, é uma doença genética que se manifesta em ambos os sexos. O gene defeituoso é transmitido pelo pai e pela mãe (embora nenhum dos dois manifeste a doença) e é responsável pela alteração no transporte de íons através das membranas das células. Isso compromete o funcionamento das glândulas exócrinas que produzem substâncias (muco, suor ou enzimas pancreáticas) mais espessas e de difícil eliminação. A fibrose cística afeta os aparelhos digestivo e respiratório e as glândulas sudoríparas. Diagnóstico microbiológico meio de cultura inespecífico Meio de cultura inespecífico: Ágar CLED Isolamento não específico e quantificação de micro- organismos (bactérias e leveduras) presentes em amostras de urina Diagnóstico Microbiológico Meio de cultura específico Pseudomonas aeruginosa em Agar MacConkey Isolamento específico de bacilos Gram negativos (enterobactérias e não fermentadores). Inibe o crescimento de micro- organismos Gram-positivos Destaque para as colônias lactose negativas Colônias mucóides Diagnóstico Microbiológico Meio de cultura específico Agar Cetrimide A cetrimida é um composto quaternário de amônio que inibe um grande número de bactérias incluindo espécies de Pseudomonas exceto a espécie aeruginosa Odor característico de uva podre Diagnóstico Microbiológico Meio de cultura específico Agar Pseudomonas Teste de sensibilidade aos antimicrobianos de Pseudomonas aeruginosa Destaque para a produção de pioverdina Diagnóstico microbiológico Pseudomonas aeruginosa na coloração de Gram