Métodos de estudo das células, citoquímica e imunocitoquímcia - Biologia Celular e Molecular [medicina]

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Biologia Celular e Molecular 
Métodos de estudos das células e tecidos: 
• É essencial que se faça uma coleta e armazenamento 
adquado para permitir a integridade de tecidos de 
forma a promover uma melhor análisa; 
• Células e tecidos preservados, apresentado a mesma 
estrutura e composição química que possuíam quando 
vivas (geralmente a preservação é feita em 
formaldeído o conhecido formol, que não permite que 
as células entram em apoptose e fixa a estrutura 
celular); 
• Coleta do material biológico – 
o Espalhamento (ex.: papa nicolau); 
o Estiraço (ex.: exame sanguíneo); 
o Montagem total 
o Corte Histológico. 
• Obtenção de um preparado permanente. Obtenção de 
uma lâmina que se pode guardar por tempo 
indeterminado que segue o seguinte processo: 
 
Processo de emblocamento na parafina 
 
Realização dos cortes do bloco de parafina no micrótono: 
 
 
Citoquímica 
É necessária quando se há uma necessidade do estudo de 
partes específicas da célula, e como estratégia se usa 
corantes com afinidades por partes específicas da célula, 
como por exemplo corantes para: ácidos nucleicos, 
polissacarídeos, lipídios, proteínas, enzimas, alguns íons 
(Ca2+ no tecido ósseo). 
O produto da reação deve ser corado. 
As reações a seguir não enfocam no estudo e análise da 
morfologia da célula 
Reação de Feulgen 
Coloração do DNA que fica vermelho: 
 
Reação do PAS (Periodic Acid Schiff) 
O ácido periódio de Schiff tem afinidade por 
polissacarídeos (Glicogênio, amido, celulose, 
glicoproteínas, ácido hialurônico, proteoglicanas) 
 
 
Imunocitoquímica 
Localização de proteínas específicas 
Dalton Arandas – medicina Uninassau 
 
 
 
Radioautografia 
• Utilização de um radioisótopo para rastrear 
determinadas moléculas. No exemplo a seguir mostra 
o rastreio de um fármaco marcado por radioisótopo: 
 
• Locais de síntese e destino de moléculas 
• Sensibilidade das emulsões fotográficas às radiações 
ionizantes 
 
 
Fracionamento celular 
Conjunto de procedimentos que levam a separação das 
organelas celulares. 
 
Cultura de células 
Mecanismo utilizado para se estudar viroses, por meio da 
multiplicação viral em cultura de células 
 
 
 
 
Observações em aula: 
MATERIAL: Raiz de cebola 
COLORAÇÃO: Feulgen 
AMPLIAÇÃO: 400x 
OBJETIVO: Observação de DNA 
 
MATERIAL: Duodeno 
COLORAÇÃO: PAS 
AMPLIAÇÃO: 400x 
OBJETIVO: Observação de inclusões de polissacarídeos