Coleta, transporte e processamento de amostras clínicas no laboratório de microbiologia ênfase nas infecções

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Bacteriologi�
Colet�, transport� � processament� d� am�tra� clínica� n� laboratóri� d�
microbiologi� ênfas� na� infecçõe�.
Qua� � temp� máxim� permitid�
entr� � colet� � � processament�
inicia� d� materiai� coletad� par�
�ame� microbiológic�?
● Acaba permitindo que tenham
espaço entre a coleta e esse
processamento desse determinado
material clínico.
● Fator extremamente importante
para que tenha um resultado
confiável.
● Cuidado com a temperatura do
armazenamento da amostra,
principalmente quando se trabalha
em locais de extrema temperatura
alta.
● Assepsia, higiene.
● Trabalhar com amostras da
secreção do trato respiratório
inferior e essas amostras são
consideradas de urgência e devem
ser processadas o mais rápido
possível.
Amostras Coletado
Em
Transporte
Fragmento
de biópsia
gástrica
para cultura
de
Helicobacte
r pylori
Meio de
transporte
específico
Após 1h:
refrigerado.
Tempo
máximo
permitido:
24h.
Conservado
a -70°C ou
gelo seco
Escarro,
lavado
broncoalve
olar,
escovado
brônquico,
aspirado
traqueal
Frasco
estéril
Ideal <2h,
TA.
Tempo
máximo
permitido:
12h
Refrigerado
.
Secreções
em Geral:
oral, nasal,
nasofaringe
,
orofaringe,
orelha,
conjuntival,
vaginal,
retal, lesão
genital,
feridas
superficiais
Swab com
meio de
transporte
Ideal <2h,
TA.
Tempo
máximo
permitido
12h, TA.
Secreção
uretral,
cervical,
endocervica
l para
cultura de
N.
gonorrhoea
e
Swab com
meio de
transporte
Tempo
máximo
permitido
6h, TA.
Urina de
jato médio
Frasco
estéril
Tempo
máximo
permitido:
24h,
refrigerado.
Urina de
primeiro
jato,
esperma
Frasco ou
tubo estéril
<2h, TA
Qua� � importânci� d�
refrigeraçã� d� materiai� clínic�
ap� � colet�?
● A temperatura ambiente (TA) para
o transporte e armazenamento de
amostra é até 25°C só que, a
realidade do Brasil é diferente,
precisa do cuidado e colocar na
geladeira para resfriar porque
estudos mostram viabilidade, ou
seja, a vida dessas bactérias que
foram transportados por Swab
acabam sendo melhor de maior
significância quando são
refrigeradas. Como se conseguisse
mantê-las de uma temperatura
agradável e elas conseguissem se
manter vivas.
● A refrigeração terá finalidade de
manter a viabilidade desse agente
no qual está pesquisando, ou seja,
de manter tanto a bactéria ou o
fungo a se manter vivo e não
permitindo a multiplicação ali no
meio de transporte, só vai fazer
com que essa bactéria se multiplica
quando colocar no meio de cultura.
Lembrando: O meio de cultura vai
servir como base nutricional para
essa bactéria, fornecendo nutriente,
carboidrato e um PH acessível.
● Quando está trabalhando no fato da
coleta e precisa de uma coleta
apropriada bem como o sistema de
transporte, ou seja, levar o material
do local de coleta até o local de
processamento vai ser o laboratório
para ter essa etapa completamente
válida onde não tenha uma amostra
contaminada.
● Alguns trabalhos mostram que
através de Swabs algumas quando
estão trabalhando com bactérias
que são anaeróbicas, ou seja, que
conseguem se reproduzir na
ausência de oxigênio e quando são
transportadas por Swab às vezes
não conseguem sobreviver.
�p� d� Swab
Tipos de
ponta
Vantagens Desvantag
em
Algodão Baixo
custo
Variação
de pH a
cada lote.
Uso
limitado
devido à
presença
de ácidos
graxos que
inibem o
cresciment
o de
algumas
bactérias
Alginato Derivado
do ácido
algínico.
Dissolve-se
em solução
de fosfato.
Pode ser
usado para
Bordetella
pertussis
Tóxico
para
algumas
cepas de
herpes,
clamídia,
HSV, U.
urealyticu
m, N.
gonorrhoe
ae. Pode
interferir
no teste de
detecção
direta de
antígeno
para
Streptococc
us do
grupo A
Dacron Poliéster.
Indicado
para provas
diretas de
pesquisa de
antígeno,
pesquisa
viral e
Streptococc
us do
grupo A.
Contém
ácidos e
detergentes
inibitórios.
Rayon fibra
orgânica
(celulose).
Menor
efeito
inibitório
sobre os
microrgani
smos. Alta
capacidade
de
absorção.
Recomend
ado para
coleta de
amostras
microbioló
gicas
-
Qua� � sequênci� corret� d�
semeadur� d� u� materia�
clínic� n� diferente� mei� d�
cultur�?
● O processamento do material
clínico no laboratório de
Microbiologia envolve dois
principais exames: confecção de
esfregaço corado pelo Gram e
Semeadura em meios de cultura.
● Quando faz a coloração de Gram já
consegue fazer a identificação de
dois grupos principais das bactérias
que são Gram-Negativas e
Gram-Positivas.
● Os meios de cultura são
classificados em meios seletivos e
não seletivos (ricos).
● E para observar as características
morfológicas através da
macroscopia os agentes inibidores
que vão acabar permitindo o
crescimento da maioria dos
microrganismos.
● Os meios seletivos vão possuir
dentro do seu próprio meio, da sua
composição por exemplo:
Antibiótico, Corante, Sais biliares
vão ser agentes inibitórios que vão
acabar favorecendo o crescimento
de determinadas bactérias.
● Primeiramente faz a semeadura em
um meio rico e ele vai ter o
crescimento de qualquer tipo de
bactéria. Seguido faz o meio
seletivo que vai favorecer o
crescimento de alguns
microrganismos.
Mei� d� Cultura�
● Agar Sangue
● Feito de sangue e na maioria das
vezes faz com sangue de carneiro e
caracteriza como meio enriquecido.
● Onde vai acabar observando o grau
de hemólise dependendo da bactéria
que cresce na forma de halo de
hemólise e fica bem transparente.
● Acaba diferenciando alguns tipos de
bactérias.
● Ele é completo, ou seja, na
composição do Agar Sangue vai
saber todos os componentes desse
meio de cultura mas não vai saber a
quantidade de cada um.
● Mas na imagem já é considerado
completo e diferencial porque
através da Hemólise que algumas
bactérias têm a capacidade de fazer
no Agar Sangue ela consegue fazer
uma segunda identificação que é
fora da de Gram.
● Agar MacConkey
● Já utiliza-se para diferenciar
quando se sabe que é uma
Gram-negativa porque não tem
crescimento de bactérias
Gram-positivas.
● É um meio diferencial, já tem
substância que inibem o
crescimento de cristal violeta e sais
biliares que inibem o crescimento
das gram-positivas.
Quai� a� causa� mai� comun� d�
rejeiçã� d� am�tra� clínica� n�
laboratóri� d� microbiologi�?
Amostra Comentário
Amostras
acondicionadas em
fixadores
(formalina).
Não processar para
cultura.
Amostra cervical
para a pesquisa de
Streptococcus do
grupo B.
Não processar.
Amostra ideal:
Swabs retal e de
intróito vaginal.
Amostra de
nasofaringe,
escarro ou pele
para estudo de
vigilância para
VRE
(vanconmicin
resistant
enterococcus)
Não processar.
Amostra ideal:
swab retal, fezes
ou amostra do
local onde a
bactéria foi isolada
previamente
(urina, secreção de
ferida, entre
outras)
Mais de uma
amostra coletada
no mesmo dia para
cultura de escarro,
urina, amostra
genital, feridas e
fezes.
Recomenda-se
uma amostra/dia.
Ponta de cateter
venoso em meio
de cultura líquido
ou meio de
transporte
Não processar.
Coleta de Secreções
Abscessos
● Lesão aberta
● Remover exsudato superficial,
limpando com solução fisiológica
estéril, as margens e a superfície da
lesão.
● Coletar a amostra na parte mais
profunda da lesão, utilizando de
preferência, seringa e agulha ou
swab com meio de transporte.
● Abscesso fechado e nódulo
● Não usar Swab.
● Fazer anti-sepsia; limpar com
solução fisiológica estéril.
● Aspirar o exsudato com agulha e
seringa (meio de transporte para
anaeróbios).
Quando o profissional solicitar
bacteriscopia e cultura é
recomendado coletar dois swabs:
um para o esfregaço corado pelo
gram e o outro, para a cultura,
que deve ser colocado em meio de
transporte.
Coleta de Secreções
● Úlcera de Decúbito (Escaras)
● Limpar a superfície com salina
estéril. Se possível, biopsiar (meio
de transporte para anaeróbios); se
não, aspirar com seringa e agulha;
em último caso, colher com swab e
colocar em meio de transporte.
● Secreção Ocular
Conjuntiva
● Colher em ambos os olhos com
Swabs umedecidos em salina ou
caldo; semear imediatamente em
agar sangue e agar chocolateou
transportar em Stuart, passar os
Swabs já semeados em lâminas.
● Transporte: placas <15min, TA
Swabs <2h, TA
Secreções Genitais Femininas
● Bartholin: desinfetar a pele com
iodo; Aspirar o fluído e inocular
em meio de transporte.
● Cérvix: Após a limpeza do
muco/secreção com um swab,
colher com outro swab material
do canal cervical , e incluir em
meio de transporte.
● Secreção vaginal: limpar o
excesso de secreção, colher com
swab, e colocar em meio de
transporte. Um segundo swab
deve ser colhido e passado em
lâmina, para a pesquisa de
Gardnerella vaginalis.
Secreções Genitais
Masculinas
● Próstata: tubo seco, estéril, após
massagem prostática.
● Uretra: Swab urogenital no
lúmen uretral (2-4 cm de
profundidade), rotativamente,
colocando em meio de transporte
Stuart.
Lesão Ulcerada Masculina e
Feminina
● Colher com swab, após a
limpeza e colocar em meio de
transporte.
Processamento de Secreções
Processamento
● Swab sem meio de transporte
● Suspender a amostra em volume
pequeno de caldo TSB ou
solução fisiológica estéril e
homogeneizar.
● Utilizar a solução para inocular
nos meios e fazer lâmina para
Gram.
● Semear por esgotamento.
Swab com meio de
Transporte
● Rolar o swab numa parte do
meio e semar por esgotamento.
Seringa
● Inocular diretamente nos meios
de cultura sólidos (esgotamento)
e em caldo THIO ou frasco de
hemocultura.
Secreções Trato Respiratório
Superior
● Fazer em Jejum;
● Paciente não ter feito Assepsia
bucal;
● É um exame invasivo;
● Pedir ao paciente para fazer o
“Ah” abrir a boca para ver se ele
vai erguer Úvula e ajudar a
reduzir o reflexo do Ânsia de
vômito;
● Com o auxílio do afastador de
língua, vai pegar o Swab
rapidamente e entre os pilares
dos tonsilos que é a faringe
posterior vai flexionar
rapidamente e evitando tocar nos
demais lugares da boca do
paciente e principalmente da
língua que é rica em saliva que
contém micróbios variadas;
● Depois de verificar se tem
material nas áreas,
principalmente se o paciente
tiver com alguma Hiperemia ou
seja, vermelho ou se tiver
alguma placa com secreção;
● Após a coleta colocar swab
diretamente em um tubo de pH I
que vai ser encaminhado direto
para o laboratório para fazer o
semeio.