Microbiologia (bactérias)

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Características
Unicelulares•
Material genético: sem membrana (procariontes) •
O cromossomo é circular e não possui histonas
As histonas dão estabilidade ao cromossomo-
Há a presença de apenas um único cromossomo-
Existem bactérias que apresentam mais de um cromossomo, porém essas 
não são do interesse médico
-
•
Não apresentam organelas•
Possuem algumas inclusões mergulhadas no citoplasma ou externamente•
A parede celular das bactéria é rica em peptideoglicano (a quantidade é variável)•
Reprodução
Por divisão binária (assexuada)-
Não existe reprodução sexuada em bactérias-
•
→
Possuem um tempo de vida muito curto•
Whittaker, ao fazer a divisão dos seres vivos, considerava a morfologia, a alimentação, 
etc. só que isso é ultrapassado. Woese faz o estudo do RNAr, o que fez com que:
Houvesse a separação em eucariontes e procariontes•
Arquibactérias: são procariotos primitivos que vivem nos extremos 
Vivem em altas ou baixas temperaturas-
Vivem em altos ou baixos pHs-
•
→
Morfologia 
Tipos morfológicos fundamentais
Esféricas (cocos)
Nem sempre são esferas perfeitas, podem ser deformadas▪
-
Bastonetes retos (bacilos)
São bem pequenas, nem na microscopia é fácil de ver▪
-
Espirais (espiroqueta, vibrião e espirilo)
Os vibriões são bacilos curvos (forma de vírgula)▪
Espiroquetas: forma flexível com vários espirais▪
Espirilos são rígidos▪
-
•
→
Bactérias de pequeno diâmetro: Clamydia, Rickettsia e micoplasma•
Além das formas básicas, existem
Bactérias estreladas (sem importância médica)-
Quadradas (arquibactérias) (também sem importância médica)-
Cocobacilo
É um coco alongado▪
-
•
As bactérias patogênicas precisam de um substrato 
Elas conseguem degradar o substrato por meio de enzimas, e então, podem se 
nutrir
O metabolismo inicia-se extracelularmente pela hidrólise-
Porções menores são assimiladas e então, moléculas essenciais para as 
bactérias são sintetizadas intracelularmente 
-
•
Depois que as bactérias assimilam as substâncias, elas são transformadas em 
piruvato (Ciclo de Krebs)
•
→
Há microrganismos que são parasitas obrigatórios e parasitas facultativos
Vírus e algumas bactérias (como a da lepra, da clamídia e da sífilis)•
Não crescem em meios de cultura preparados em laboratórios; apenas crescem em 
cobaias ou hospedeiros
•
→
Há organismos que fazem o catabolismo/decomposição 
Aqui estão inclusos os patogênicos•
Eles decompõem o tecido para se nutrir•
→
Os microrganismos anabólicos/que fazem biossíntese 
São os que conseguem biossintetizar por meio de substâncias mais simples (como 
o CO2, a luz...)
•
→
É possível que um microrganismo seja anabólico e catabólico ao mesmo tempo→
A célula bacteriana é composta majoritariamente por água, o resto é matéria seca (40%, 
mais ou menos)
Matéria seca: C, N, H e outros elementos (como sais minerais)
Essa ordem é de maior (C) para menor (outros elementos) quantidade-
•
→
Meios de cultura
Definição: são substâncias nutritivas que você fornece para o microrganismo 
conforme a sua necessidade
•
É preciso manter a cultura viável e estudar seu comportamento em laboratório (em 
relação à patogenicidade, virulência, genética, antibióticos...)
•
→
Exigências nutricionais
Fonte de energia: quebra das moléculas que estão no meio de cultura-
Fonte de carbono: extrato de carne, fontes de amido-
Fonte de nitrogênio: peptonas (do leite, da carne...)-
Sais minerais: obtidos do extrato de carne-
Fatores de crescimento: não é comum a todas as bactérias (são elementos 
que são essenciais para que o microrganismo cresça, como por exemplo, 
algumas vitaminas...)
-
•
Fatores abióticos
É preciso que estejam adequados para o meio de cultura ser assimilado pelo 
microrganismo em questão
-
Temperatura, pH, pressão osmótica, umidade, oxigênio...-
•
Cultivo in vivo
Feito para os microrganismos que não crescem em meios artificiais -
Dessa forma, são criadas em estruturas naturais, como ovos, cobaios...-
Eles não conseguem ser cultivados fora de células vivas-
Exemplo: vírus, chlamydia, treponema...-
•
Cultivo in vitro
São condições artificiais simulando condições naturais-
•
Classificação dos meios de cultura
Quanto à natureza
Meio natural
Não possui uma composição química definida (não se sabe quanto 
tem de enxofre, carbono, nitrogênio...)
▫
Ex: frutas, ovos, sangue, urina...▫
▪
Meio sintético
Possui uma composição química definida▫
Bactérias ambientais▫
▪
Meios semissintéticos (mistos)
Mistura dos meios naturais com os sintéticos (como por exemplo, 
pegar um meio sintético e adicionar sangue)
▫
Local para as bactérias patogênicas▫
▪
-
Quanto à consistência do meio
Quem garante a consistência do meio de cultura é o Agar (extrato de 
algas marinhas), o meio de cultura fica parecendo uma gelatina
▪
Líquidos
Ausência de ágar▫
Não é possível de distinguir se tiver bactérias diferentes▫
▪
Semissólidos
0,5 a 1% de ágar▫
Usado para testes de mobilidade (usados para saber se a bactéria ▫
▪
-
•
Bactérias
Maria Eduarda Silva Dias
Microbiologia (bactérias)
quinta-feira, 1 de abril de 2021 15:19
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Agrupamentos/arranjos
Durante a reprodução, algumas bactérias ficam agrupadas, formando arranjos 
bem característicos
-
Grupamento de cocos
Em cadeias (curtas ou longas): estreptococos▪
União de 2 a 2 cocos: diplococos▪
União de 4 cocos no plano horizontal: tétrades▪
União de 4 cocos no plano vertical: sarcina▪
União em 3 planos: estafilococos▪
-
•
As bactérias, muito provavelmente, não terão todos os agrupamentos, pois 
cada bactéria tem um grupamento específico
As sarcinas não fazem diplococos, por exemplo, só sarcinas▪
Se você estiver observando uma colônia de bactérias e ver ela na forma 
isolada, ou em diplococos ou em estafilococos, o que determina é o 
estafilococos, porque dentro de uma colônia, todas as células são 
iguais, então, pode até ter uma célula sozinha ou um diplococo, mas 
muito provavelmente porque elas ainda não se dividiram
▪
Mas se você ver duas colônias distintas, aí sim pode ter diplococos e 
estafilococos
▪
-
Grupamento de bacilos
Diplobacilos (dois a dois) ▪
-
Estreptobacilos (cadeias com mais de 3 bacilos)▪
Muitos bacilos não possuem arranjo característico, eles ficam soltos▪
Corynebacterium (é uma exceção) 
É um tipo de bacilo que forma de um arranjo parecendo letras 
chinesas e paliçadas
▫
Faz parte da microbiota humana, está presente nas fossas nasais, 
no TGI, na pele e nos órgãos genitais
▫
▪
Citologia bacteriana→
Unicelular•
Estruturas essenciais (são importantes para que a bactéria se multiplique); todas as 
bactérias possuem essas estruturas
Parede celular
Exceção: algumas bactérias não possuem parede celular, mas 
dentre as que possuem, se perder essa parede celular, ela não 
consegue se multiplicar mais
▪
Função: 
Dá forma à bactéria (coco, bacilo...); ▫
Confere rigidez à parede;▫
Fornece resistência à pressão osmótica▫
▪
-
•
Ausência de ágar▫
Não é possível de distinguir se tiver bactérias diferentes▫
Semissólidos
0,5 a 1% de ágar▫
Usado para testes de mobilidade (usados para saber se a bactéria 
tem flagelo ou não) (nesses testes, se o meio ficar turvo, a bactéria 
tem flagelo; se a cultura ficar apenas em um local, a bactéria não 
tem flagelo)
▫
▪
Sólidos
1,5 a 2% de ágar▫
Serve para caracterizar a colônia (forma, cor, aspecto)▫
Importante para isolar microrganismos (como por exemplo, ao tirar 
um microrganismo e colocar no meio de cultura, escolhe-se o meio 
sólido)
▫
▪
Quanto à função
Meios simples
Serve para microrganismos que não possuem exigência nutricional ▫
Caldo nutritivo, ágar nutritivo/ágar simples▫
▪
Meios enriquecidos
Além das substâncias presentes no meio simples, possuem algo a 
mais
▫
Ágar sangue (é um meio que nem o ágar nutritivo, porém, 
adicionou-se hemácias), ágar chocolate (bactéria da gonorreia se 
desenvolve aqui) (não é chocolate, é sangue fervido :|)
▫
Ótimo para bactérias fastidiosas, as quais não crescem no meio 
simples, apenas no enriquecido (Streptococcus, Neisseria,Haemophilus)
▫
Meio Müeller Hinton: é um meio de cultura nobre, sendo usado 
para fazer a sensibilidade das bactérias aos antibióticos
▫
▪
Meios seletivos
Faz com que só a espécie desejada cresça no meio de cultura▫
Por exemplo, se eu pegar bactérias do TGI, podem crescer 
72874892 bactérias no meio de cultura, porém eu só quero uma 
específica, que no caso são as bactérias que causam ITUs, então 
eu uso esse meio seletivo (Escherichia é a principal bactéria que 
causa ITUs)
▫
▪
Agar MacConkey
Possui os ingredientes necessários (fonte de energia, 
carbono, nitrogênio e sais minerais) + cristal violeta e sais 
biliares

Impede o crescimento de bactérias gram-positivas
Meio próprio para bactérias do TGI
▫
Agar manitol salgado (Chapman)
Adiciona-se 7,5% de NaCl no meio, deixando ele bem 
salgado (geralmente, nos meios de cultura normal, se 
adiciona só 0,5% de NaCl)

Algumas bactérias conseguem crescer apesar do meio muito 
salgado, como as Staphylococcos

▫
Meios diferenciais/meios indicadores
Na sua composição química, é possível que se diferencie uma 
bactéria da outra (como por exemplo, por mudança de cor)
▫
▪
Agar MacConkey
Possui lactose
Se a bactéria fermenta a lactose, a colônia fica vermelhinha
▫
-
Agar manitol salgado 
Possui o manitol (carboidrato), e as bactérias que fermentam 
o manitol, sua colônia fica amarela

▫
Agar sangue (hemólise)
As bactérias que têm capacidade hemolítica mostram 
hemólise com padrões diferentes

Beta hemolítica: totalmente hemolítica
Alfa hemolítica: parcialmente hemolítica
Gama hemolítica: não tem hemólise
▫
Meios de transporte
São bactérias transportadas no meio de cultura▫
Algumas bactérias (Haemophilus e Neisseria) são muito sensíveis 
fora do hospedeiro, então não podem ficar fora dele por muito 
▫
▪
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Função: 
Dá forma à bactéria (coco, bacilo...); ▫
Confere rigidez à parede;▫
Fornece resistência à pressão osmótica▫
▪
Constituição (a depender da constituição, as bactérias são 
classificadas)
Gram-positivas (possuem parede)
Formada por peptideoglicano (mureína): camada espessa 
com várias camadas intercaladas formadas por subunidades:
Ácido N-acetil glicosamina◊
Ácido N-acetil murâmico (ácido NAM)◊

Apresentam ligações cruzadas formadas por tetrapeptídeos 
(L-alanina, glutamina, L-lisina, D-alanina)
Ligam um ácido NAM a outro ◊

Ácidos teicoicos: são unidades dispersas dentro do 
peptideoglicano
Álcool (glicerol ou ribitol) e fosfato◊

Ácidos lipoteicoicos: está ligado a lipídios da membrana 
celular

Esses ácidos normalmente são receptores e estruturas 
antigênicas (assim como o peptideoglicano). Ou seja, são 
fatores de patogenicidade

Pode ter proteínas na parede (transporte ativo)
O transporte passivo ocorrem sem a necessidade das 
proteínas
◊

▫
▪
Gram-negativas (possuem parede)
Peptideoglicano (aminoaçúcares): camada delgada de ácido 
N-acetil glicosamina e ácido N-acetil murâmico

LPS (membrana externa lipopolissacarídica): é uma barreira 
de impermeabilidade
Possui o lipídio A, o polissacarídeo O (antígeno O)◊
O lipídio A é uma endotoxina (liberada quando se 
rompe a parede celular), o que pode gerar uma reação 
no hospedeiro (febre, por exemplo)
◊

▫
Existem porinas (passagem de substâncias)
Não tem os ácidos lipoteicoicos e teicoicos e nem as ligações 
cruzadas

Entre a membrana externa e a de peptideoglicano, existe o 
espaço periplasmático
É onde ocorre a ativação de enzimas (como enzimas 
que lesionam tecidos)
◊

É muito importante que os médicos saibam se a bactéria é 
gram-positiva ou negativa, para o tratamento ser mais efetivo
▫
Bactérias que não possuem parede celular
Micoplasma 
São bactérias sem parede celular◊
Ou seja, como não tem parede, não tem forma definida, 
são bem irregulares
◊

▫
Muitas crescem de forma intracelular (não é obrigatório)◊
Apresentam moléculas pentacíclicas, semelhantes a 
esteróis, denominadas hepanoides, talvez conferindo 
maior rigidez à membrana
◊
Bactérias que possuem parede mas não se enquadram na 
classificação gram-positiva/gram-negativa
O caso das espiraladas
Micobactérias (bacilo)
Parede celular com peptideoglicano (camada espessa) 
de ácido micólico (torna a bactéria resistente a 
condições adversas, como temperaturas, substâncias 
químicas)
◊
Os ácidos micólicos são lipídios ◊

▫
Meios de transporte
São bactérias transportadas no meio de cultura▫
Algumas bactérias (Haemophilus e Neisseria) são muito sensíveis 
fora do hospedeiro, então não podem ficar fora dele por muito 
tempo, então, utiliza-se um swab que fica em contato com o meio 
de cultura
▫
▪
Meios de manutenção
É um meio de cultura que não favorece o crescimento rápido da 
bactéria, pois se ela crescer muito rápido, em alguns meses esse 
meio de cultura começa a desidratar e aí a bactéria será perdida. 
Além de não favorecer o crescimento rápido, permite que seja 
transportado para outro meio de cultura
▫
Importante para manter os estoques de certa bactéria em um 
laboratório
▫
Ex: caldo TSB, caldo nutriente e água destilada▫
▪
Meios de identificação
É quando você precisa identificar um microrganismo, então, faz se 
testes bioquímicos 
▫
▪
Preparo dos meios de cultura
Os meios de cultura já vem formulados pela indústria•
Vem em pozinhos (geralmente se usa uns 30g) •
→
Faz a pesagem, depois dissolve em água destilada (e funde, pois o ágar não se 
solubiliza à temperatura ambiente, precisa ser a 100°C)
•
Coloca no tubo de ensaio, mas esteriliza antes (125°C / 15 min) em autoclave•
Espera esfriar (50-60°C) e distribui em tubos de ensaio... Placas de Petri•
Distribuição dos meios de cultura→
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Micobactérias (bacilo)
Parede celular com peptideoglicano (camada espessa) 
de ácido micólico (torna a bactéria resistente a 
condições adversas, como temperaturas, substâncias 
químicas)
◊
Os ácidos micólicos são lipídios ◊
BAAR (bacilo álcool ácido resistente): resistente à 
descoloração pelo álcool ácido 
◊

Etapas da coloração de Gram
Começa com um esfregaço bacteriano, adiciona-se o corante 
(cristal violeta/violeta genciana), deixando uma cor púrpura
▫
Adiciona-se o fixador (solução de iodo), tornando a coloração mais 
intensa na parede celular
▫
Adiciona-se álcool misturado com cetona para descolorir as 
bactérias que possuem lipídios (as gram-negativas)
As gram-negativas ficam incolores
As gram-positivas, o álcool desidrata a parede celular, 
fechando a porosidade, mantendo o corante dentro da 
parede

▫
Adiciona-se corante de contraste (vermelho)
Fucsina ou pela safranina, o que colore apenas o que está 
incolor. Um corante não sobrepõe o outro

▫
Lava e seca e então observa na microscopia▫
Gram-negativas: ficam rosinhas
A maioria dos bacilos são gram-negativos
▫
Gram-positivas: ficam azuladas puxada pro roxo
A maioria são cocos
▫
▪
Colônias velhas vão perdendo a capacidade de corar porque 
vão perdendo a parede celular. Mas a figura abaixo também 
pode ser um caso em que há uma mistura de 2 bactérias
Clostridium: quando produz esporos, perde sua capacidade 
de coloração (é o caso da foto). É gram-positivo

▫
Membrana celular
Estrutura
Bicamada fosfolipídica proteica (existem proteínas integrais ou 
periféricas)
▫
Mesossomas (invaginações): auxilia na divisão celular▫
▪
-
Função 
Permeabilidade seletiva▫
Transporte de solutos ▫
Geração de energia (ocorre na membrana, porque bactérias não 
possuem mitocôndrias): o metabolismo depende dessa geração 
energética feita pela membrana. A membrana seria o órgão de 
respiração celular das bactérias
▫
▪
Citoplasma-
Ribossomos (proteína + RNAr)
Fazem síntese proteica▪
Existem em grande quantidade no citoplasma (milhares)▪
Possuem uma vida curta▪
Aspecto granuloso▪
Os ribossomos de seres eucariontes são diferentes dos de procariontes▪
-
Material nuclear
Cromossomo único circular
Dupla fita de DNA▫
▪
Plasmídeos (não são essenciais) 
Os plasmídeos possuem informações extras para as bactérias(capacidade de metabolizar uma toxina em específico ou de 
produzir uma certa molécula...)
▫
Possuem uma certa informação que outras bactérias não possuem▫
▪
-
Estruturas não essenciais (sua retirada não impede a bactéria de se multiplicar); 
somente algumas bactérias têm 
Cápsula e glicocálice
Cápsula/camada limosa▪
-
•
Bisel possui uma superfície maior do que o normal-
No tubo de ensaio eu distribuo antes de esterelizar-
Técnicas de semeadura e de repicagem 
Deve-se fazer essas técnicas perto do bico de Bunsen para evitar contaminação•
Semear: espalha os microrganismos
Swab coletado, passando suavemente no meio de cultura
Pode ser usado para coletar bactérias em lesões▪
-
Com agulha ou alça de platina-
Pour plate (coloco o meio de cultura em cima da amostra)
Possibilita o isolamento de microrganismos anaeróbicos▪
-
Com alça Drigalsk (formato de L)-
•
Repicagem: levar de um meio de cultura a outro
Sólido para outros: pode se usar as técnicas mencionadas acima, mas 
principalmente a alça de platina
-
Líquido para líquido pode-se usar pipetas-
Líquida para semissólido: agulhas-
Líquido para inclinado ou placas de Petri: alça de platina-
•
→
Técnica de esgotamento
Separa uma bactéria da outra•
É usada para purificar colônias•
Espalho a bactéria no quadrante A e depois faço esse desenho, antes de cada 
mudança de sentido, toca no bico de Bunsen
•
→
Grupos de bactérias em relação à diversidade metabólica
Autotrófica: consegue sintetizar seu próprio alimento a partir de substâncias 
simples
Poucas bactérias são autotróficas -
•
Heterotrófica: não produzem seu próprio alimento
São os decompositores-
•
Fotolitotrófico
Obtém energia por meio da luz -
Obtém carbono por meio do CO2-
•
Fotorganotróficos
Obtém energia por meio da luz-
Obtém carbono por meio de substâncias orgânicas-
•
Quimiolitotróficos
Obtém energia por meio de compostos inorgânicos-
Obtém carbono por meio do CO2-
•
Quimiorganotróficos
Obtém energia por meio de compostos inorgânicos-
Obtém carbono por meio de compostos orgânicos-
Bactérias patogênicas estão aqui-
•
→
Fatores ambientais necessários ao crescimento
Temperatura
As patogênicas geralmente são mesófilos-
•
→
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Possuem uma certa informação que outras bactérias não possuem▫
Estruturas não essenciais (sua retirada não impede a bactéria de se multiplicar); 
somente algumas bactérias têm 
Cápsula e glicocálice
Cápsula/camada limosa
São substâncias que são produzidas pela bactéria e que se 
acumulam ao redor da parede celular, na parte externa
Estrutura organizada: cápsula
Estrutura irregular: camada limosa
▫
Composta por polissacarídios (em uma espécie de Bacillus, são 
glicolipídios)
▫
Antifagocitária (impede a fagocitose da bactéria por uma célula de 
defesa. Caso a bactéria seja fagocitada, impede a junção do 
fagossomo com o lisossomo)
▫
Não é possível observar a cápsula quando se faz a coloração de 
gram, mas se eu corar o campo visual, dá pra ver (a partezinha 
branca)
▫
▪
-
•
Possui o antígeno K (estrutura antigênica) ▫
Algumas bactérias acabam sendo mais patogênicas por causa da 
cápsula (mas existem bactérias que são muito patogênicas mesmo 
sem cápsula) 
▫
Glicocálice 
Revestimento de açúcar feito pelo metabolismo bacteriano▫
Reserva de substâncias que a bactéria pode usar para se nutrir▫
Fonte de umidade▫
Antifagocitária ▫
▪
Flagelo 
Feito por uma proteína chamada flagelina▪
Função
Motilidade (locomoção)▫
▪
Possui o antígeno H (na parede é o antígeno O, na cápsula, o antígeno 
K)
▪
Se move em resposta a quimiotaxia e fototaxia
Ir para um local com condição desejada: se movimenta 
linearmente
▫
Sair de um local com condição imprópria: se movimenta em -
cambalhotas ou em zigue-zague (camuflar a sua fuga)
▫
▪
Não são visíveis à microscopia óptica▪
Tipos de flagelo
Monotríquio: apenas um flagelo▫
Lofotríquio: mais flagelos em um polo▫
Anfitríquio: flagelos nos polos▫
Peritriquio: vários flagelos espalhados▫
▪
-
Filamento axial
Feixes de fibrilas em espiral em torno da célula▪
É como um flagelo interno (está em torno do corpo da bactéria) ▪
Exclusivas de leptospiras e treponemas▪
-
pH
A maioria é neutrófilo-
As patogênicas aguentam no máximo até o pH 4-
•
Pressão osmótica
Concentração de sais no meio em relação ao citoplasma-
Isotônico
Condição ideal de multiplicação da bactéria▪
-
Hipertônico
Há muito sal externo, fazendo com que a bactéria, caso ela viva em 
meio isotônico, comece a desidratar
▪
-
Hipotônico
Plasmólise ▪
-
•
Oxigênio 
Aeróbias
Se multiplicam melhor quando tem oxigênio▪
É o caso da Chlamydia pneumoniae▪
-
Anaeróbias
Se multiplicam melhor sem oxigênio▪
É o caso da Clostridium (tétano)▪
Não produzem enzimas peroxidase e superóxido desmutase, catalase 
(as quais eliminam radicais tóxicos: peróxido e superóxido) 
▪
Os oxigênio acaba matando a bactéria, pois ela não tem enzimas para 
quebrar o O2
▪
-
Anaeróbias facultativas
Crescem melhor em condições aeróbicas, mas também crescem em 
anaeróbicos 
▪
-
Microaerobias 
Crescem bem na presença de oxigênio, mas apenas em taxas reduzidas 
de O2
▪
Caso das Streptococcos▪
-
Anaeróbias aerotolerantes
Crescem tanto na presença quanto na ausência de O2, mas não utiliza o 
O2 para o metabolismo (diferentemente da anaeróbia facultativa, que 
usa)
▪
-
•
Divisão bacteriana→
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Movimentação que nem um saca-rolha (fácil penetração nos tecidos)▪
Fímbrias/pili
Natureza proteíca (pilina) ou glicoproteínas▪
Não possuem função de mobilidade▪
Classificam-se em
Fímbrias comuns (promovem aderência)▫
▪
-
Flagelo peritríquio + fímbrias
Pili sexual: conjugação (transferência de material genético de 
uma bactéria para outra, sendo que geralmente o material 
transferido são os plasmídeos). Essa conjugação é unidirecional
(há uma bactéria doadora e uma receptora), e também não pode 
ser classificada como uma reprodução, é apenas a transferência 
de material genético 
▫
Endósporo/esporo
Estrutura reprodutiva nos fungos▪
É uma estrutura de resistência gerada dentro da bactéria 
Resistência à dessecação... Ao calor... Agentes químicos...▫
Ex: Clostridium e Bacillus ▫
▪
Forma-se apenas um esporo▪
No esporo, há a presença do ácido dipicolínico (torna a estrutura do 
esporo mais impermeável)
▪
Apenas as gram-positivas são capazes de fazer esporos▪
Esses esporos são formados quando o ambiente fica inapropriado para 
a bactéria
A bactéria duplica seu material genético, formando um 
revestimento/envoltório de membrana ao redor do material 
genético
▫
No cerne: há o material nuclear▫
Em volta do cerne, há o córtex, ondem existem camadas de 
peptideoglicanos
▫
Depois, forma-se uma capa em volta do cerne▫
Depois da formação do esporo, a bactéria morre e aí o esporo fica 
vivo por anos esperando as condições voltarem a ser favoráveis
▫
Quando as condições ficam favoráveis, "cria-se" de novo a 
bactéria
▫
▪
-
Na coloração de Gram, se tiver esporos, forma-se uma bola branca no 
interior da bactéria. Então, precisa de um corante que penetre nos 
esporos (ficam com cor azulada ou esverdeada)
▪
Divisão bacteriana
TG (tempo de geração): é o tempo levado por uma bactéria para se dividir em 
duas
Varia de acordo com a espécie-
•
Quando as bactérias vão se multiplicando, elas vão gerando uma colônia, tornando-
se visível a olho nu
•
As bactérias vão se multiplicando sem parar enquanto tiver nutrientes no meio de 
cultura
•
Fase LAG ou fase adaptativa 
Pode durar horas ou até dias-
É o tempo em que a bactéria está se adaptando ao meio de cultura-
Não existe multiplicação nessa fase-
•
Fase LOG ou de crescimento exponencial
Começa a se multiplicar (é uma fase em que há nutrientes no meio de cultura)-
É a fase ideal para se estudar as bactérias (fazer coloração de Gram, estudar 
a morfologia), porque as bactérias estão em pleno desenvolvimento
-
•
Fase estacionária
Período em que a população de bactérias começa a competir uma com a 
outra por nutrientes, pois eles ficam mais escassos-
Algumas bactérias morrem, porém outras continuam a se multiplicar-
Não aumenta a população-
As bactérias que fazem esporos podem desenvolver esporos-
•
Fase de declínio ou de morte celular
A competição fica mais exacerbada, então as bactérias acabam morrendo, até 
chegar no ponto em que a colônia morre, não sobrando nenhuma bactéria
-
Começa a se gerar substâncias tóxicas no meio -
•
→
Casos anormais
Não houve adaptação-
•
A bactéria foi mudada de um meio de cultura para outro enquanto estava na 
fase LOG
Se tivesse feito essa mudança na fase estacionária ou de declínio, teria 
que ter a fase de adaptação de novo
▪
-
Antes de chegar na fase estacionária, você adiciona mais nutrientes-
O tempo de geração entre duas bactérias é diferente 
O que define o tempo de geração é a inclinação da fase LOG▪
-
Medidas do crescimento microbiano
São feitas para traçar a curva de crescimento•
Massa seca celular
Pesar numa balança mesmo-
É difícil pois depende da sensibilidade da balança-
•
Contagem celular em câmara de Neubauer
Não consegue distinguir bactérias que estão mortas de bactérias que estão 
vivas
-
•
→
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Inclusões
São depósitos de reserva (grânulos de reserva)▪
Armazenam reservas nutricionais ou gases para quando for necessário▪
Podem ser compostos orgânicos ou inorgânicos
Orgânicos: glicogênio, amido e poliidroxibutirato▫
Inorgânicos: polifosfatos (volutina ou metacromáticos) e enxofre ▫
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O processo inicia-se com o esfregaço, o qual começa com a deposição de uma gota de 
água destilada ou esterilizada na lâmina
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Depois, flamba-se a alça/swab no bico de Bunsen e então coleta-se o meio de cultura e 
faz o esfregaço na lâmina
Deve-se flambar a alça/swab após depositar o meio de cultura na lâmina para 
evitar contaminações
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Então espera-se a água secar (pois se não esperar secar, a fixação no bico de Bunsen 
acaba danificando a parede celular, o que prejudica a coloração)
Sabe que está seco porque a lâmina fica opaca•
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Depois que a agua seca, flamba-se a lâmina 3x no bico de Bunsen para fixar as 
bactérias
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Para a coloração, coloca-se a lâmina num suporte e então usa-se o cristal de violeta, 
depois o lugol (fixador mordente)
Deixa-se cada um por 1 min•
O complexo lugol + cristal de violeta é forma-se o complexo pararrosanilina ou 
complexo CVL
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O lugol faz com que se forme cristais de iodo abaixo da camada de peptideoglicano•
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Após o lugol, coloca-se o álcool acetona (álcool + acetona) por 10 a 15 segundos
O LPS é solubilizado pelo álcool •
As gram-negativas perdem a cor porque possuem uma camada fina de 
peptideoglicano, enquanto as gram-positivas possuem uma camada grossa, 
dificultando a descoloração
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Porém, não se pode colocar o álcool acetona por muito tempo pois se não até 
mesmo as gram-positivas se descoram
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A fucsina é colocada após o álcool acetona, sendo assim, é um contracorante 
Deixa-se por 30 segundos•
A fucsina cora sim a gram-positiva, só que ela já está preenchida pelo cristal violeta 
(pois os corantes básicos, como o cristal violeta, possuem afinidade pela parede 
celular, que é porosa)
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Seca com um papel (só encostar, não precisa esfregar) para tirar o excesso de água→
Coloca o óleo de imersão 
Serve para convergir a luminosidade para uma parte específica da lâmina•
Sem o óleo, a imagem ia ficar turva•
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A lâmina é observada na objetiva de 100x→
Etapas do esfregaço
Homogeneização •
Secagem•
Fixação •
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Objetivo da coloração
Definir o formato, o agrupamento e diferenciar os tipos de bactéria (se é 
gram-positiva ou negativa)
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É difícil pois depende da sensibilidade da balança-
Contagem celular em câmara de Neubauer
Não consegue distinguir bactérias que estão mortas de bactérias que estão 
vivas
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Contagem de células viáveis em meio de cultura•
Diluições seriadas
Dilui até obter quantidades que sejam possíveis de serem contadas-
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