Hematologia_practica

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Dacie y Lewis
HEMATOLOGÍA
PRÁCTICA
10.a edición
S. Mitchell Lewis, BSc, MD, FRCPath, DCP, FIBMS
Emeritus Reader in Haematology,
University of London;
Senior Research Fellow in Haematology, Imperial College School of Medicine,
Hammersmith Hospital, Londres, Reino Unido
Barbara J. Bain, FRACP, FRCPath
Professor of Diagnostic Haematology,
St. Mary’s Hospital Campus of Imperial College
Faculty of Medicine, Londres, Reino Unido
Imelda Bates, MD, FRCP, FRCPath
Senior Lecturer in Tropical Haematology,
Liverpool School of Tropical Medicine,
University of Liverpool, Liverpool, Reino Unido
Autores vii
Prefacio ix
Abreviaturas xi
Nota xiii
1. Recogida y manipulación de la sangre 1
S. M. Lewis y N. Tatsumi
2. Intervalos de referencia y valores normales 11
S. M. Lewis
3. Técnicas hematológicas básicas 23
B. J. Bain, S. M. Lewis e I. Bates
4. Métodos de preparación y tinción de las
extensiones sanguíneas y de la médula ósea 51
B. J. Bain y S. M. Lewis
5. Morfología de las células sanguíneas normales 
y patológicas 69
B. J. Bain
6. Biopsia de la médula ósea 99
I. Bates
7. Anemia ferropénica y sobrecarga de hierro 113
M. Worwood
8. Investigación del estado de la cobalamina, el folato
y los metabolitos en la anemia megaloblástica 139
M. Hamilton y S. Blackmore
Índice de capítulos
9. Métodos de laboratorio utilizados para la
investigación de las anemias hemolíticas 161
S. M. Lewis y D. Roper
10. Investigación de las anemias hemolíticas
hereditarias: anomalías enzimáticas 
y de la membrana 177
D. Roper y M. Layton
11. Anemias hemolíticas adquiridas 205
B. J. Bain y N. Win
12. Investigación de las hemoglobinas anómalas 
y de las talasemias 233
B. Wild y B. J. Bain
13.Citoquímica eritrocitaria y leucocitaria 267
D. Swirsky y B. J. Bain
14. Inmunofenotipado 287
E. Matutes, R. Morilla y D. Catovsky
15.Radioisótopos en el diagnóstico hematológico 305
I. Dokal y S. M. Lewis
16.Exploración de la hemostasia 325
M. Laffan y R. Manning
17. Investigación de la tendencia trombótica 379
M. Laffan y R. Manning
18.Control de laboratorio de la terapia anticoagulante,
trombolítica y antiplaquetaria 399
M. Laffan y R. Manning
19.Antígenos y anticuerpos de las células sanguíneas:
eritrocitos, plaquetas y granulocitos 413
S. Knowles y F. Regan
20.Aspectos de laboratorio de las transfusiones
sanguíneas 449
M. Rowley y C. Milkins
21. Análisis molecular y citogenético 477
T. Vulliamy y J. Kaeda
Con la contribución de B. J. Bain
22.Miscelánea 511
S. M. Lewis
23.Aproximación al diagnóstico y clasificación
de los trastornos hemotológicos 521
I. Bates y B. J. Bain
24.Organización y gestión del laboratorio 535
S. M. Lewis y A. Bradshaw
25.Seguridad en el laboratorio 553
S. M. Lewis
26.Control de calidad 561
S. M. Lewis y B. De la Salle
27.Hematología en laboratorios de recursos 
escasos 573
I. Bates y B. Mendelow
28.Apéndices 587
S. M. Lewis
Índice alfabético 603
vi HEMATOLOGÍA PRÁCTICA
Esta 10.ª edición celebra el 55 aniversario de Hematología
Práctica. Tanto la primera edición de J.V. Dacie de 1950
como las sucesivas ediciones con Mitchell Lewis como 
coautor se basaron en el curso de hematología para el Lon-
don University Diploma of Clinical Pathology (DCP) y pos-
teriormente en la licenciatura en Hematología en la enton-
ces llamada Royal Postgraduate Medical School.
La ciencia médica ha crecido de forma exponencial en el
último medio siglo; sin embargo, ninguna disciplina se ha
expandido más que la hematología, tanto en sus aspectos clí-
nicos como de laboratorio. Inicialmente, la hematología de
laboratorio se restringía casi al «recuento sanguíneo» con
una cámara de recuento y un microscopio. El recuento san-
guíneo sigue siendo una prueba esencial porque proporciona
un componente importante para el diagnóstico y el trata-
miento del paciente; sin embargo, los instrumentos automá-
ticos actuales analizan las propiedades fisicoquímicas de las
células sanguíneas individuales y ofrecen datos metrológicos
precisos sobre los eritrocitos, los leucocitos y las plaquetas 
a una velocidad inimaginable en aquellos primeros tiempos.
La sofisticada tecnología permite que los análisis más com-
plejos sean realizados de forma rutinaria en muchos labora-
torios; entre ellos se incluyen los estudios de ADN, el inmu-
nofenotipado para la clasificación de las leucemias, el
diagnóstico de las anemias megaloblásticas y las mediciones
con radioisótopos. No obstante, tenemos que admitir que no
todos los laboratorios disponen de las pruebas más sofistica-
das y dedicamos un capítulo a las pruebas esenciales en los
laboratorios con pocos recursos y en los centros de salud.
También tenemos en cuenta el uso creciente de los dispositi-
vos listos para su uso, comercialmente disponibles, para mu-
chas pruebas de laboratorio, y la tendencia a la realización
de algunas de estas pruebas en el punto de asistencia; apor-
tamos sugerencias sobre el papel de soporte del laboratorio
para garantizar la fiabilidad de esta última práctica.
Otro avance de enorme impacto es Internet, mediante
el cual se puede localizar cualquier tema, a menudo con
una abrumadora cantidad de información, a partir de una
sola palabra clave. Indicamos unos cuantos sitios de In-
ternet que son importantes para la hematología, inclu-
yendo los de los fabricantes de dispositivos y reactivos
especializados. 
Los científicos biomédicos son, cada vez más, los res-
ponsables del trabajo de laboratorio, de la misma forma
que los hematólogos, médicamente cualificados, están más
implicados en la asistencia clínica a los pacientes. Sin em-
bargo, ambos grupos deben ser conscientes de la impor-
tancia de la organización y la dirección eficaz de un labo-
ratorio, de la necesidad de mantener unos estándares téc-
nicos elevados con controles de calidad bien establecidos y
del conocimiento de la importancia clínica de las investi-
gaciones hematológicas. Los principios de buena práctica
de laboratorio los estableció Dacie en su 1.ª edición, cuan-
do escribió: «Todos aquellos implicados en el trabajo de la-
boratorio deben comprender cuál es la importancia de las
pruebas que realizan, el valor relativo de las investigacio-
nes hematológicas y el orden en que deben emprenderse».
Hemos intentado mantener su enfoque por lo que hace al
contexto y al estilo, si bien actualizado para satisfacer la
práctica actual. 
Deseamos expresar nuestro agradecimiento a todos nues-
tros colaboradores, y también a otros colegas que nos fa-
cilitaron consejo experto en temas específicos; entre ellos
debemos mencionar especialmente a Michel Deenmamode
(Radioisótopos), Mark Griffin (Salud y seguridad), Julia
Howard (Citogenética), John Meek (Química clínica), An-
drew Osei-Bimpong (Hematología general). 
Como especial homenaje con ocasión del 55 aniversario,
esta edición está dedicada a Sir John Dacie, a sus estudian-
tes de diversos países, cuyas posteriores y distinguidas ca-
rreras se inspiraron en él, y al centro que él mismo fundó
en la antigua Royal Postgraduate Medical School de la
Universidad de Londres, actualmente Faculty of Medicine
of Imperial College at Hammersmith Hospital.
S. Mitchell Lewis
Barbara J. Bain
Imelda Bates
Prefacio
DAB diaminobenzidina 
DE desviación estándar
DMSO dimetilsulfóxido
2,3 DPG 2,3-difosfoglicerato
DTT ditiotreitol 
EDTA ácido etilendiaminotetraacético 
EGIL Grupo europeo para la clasificación
inmunológica de las leucemias (del inglés,
European Group for the Immunological
Classification of Leukaemias)
ELISA análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas
EN eritrocito nucleado
ENE esterasa no específica
ER enzima de restricción
FAB francés-americano-británico (clasificación)
FAG fosfatasa alcalina granulocítica
FE ficoeritrina 
FSc dispersión de la luz hacia delante (del inglés,
forward light scatter)
FVL factor V de Leiden 
g gramos o fuerza centrífuga relativa, según
contexto
G6PD glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
GPI glucosilfosfatidilinositol 
Hb hemoglobina o concentración de hemoglobinaHbCO carboxihemoglobina
HCM hemoglobina corpuscular media
HEMPAS multinuclearidad eritroblástica hereditaria con
prueba del suero acidificado positiva (del
inglés, hereditary erythroblastic multinuclearity
with positive acidified-serum test) 
Hi metahemoglobina
HiCN cianometahemoglobina
HPF hemoglobinuria paroxística por frío
HPLC cromatografía en fase líquida de alta resolución
(del inglés, high performance liquid
chromatography)
HPN hemoglobinuria paroxística nocturna 
Hto hematocrito
ICSH Comité internacional para la normalización en
hematología (del inglés, International Council
for Standardization in Haematology) 
IDR inmunodifusión radial
Abreviaturas
ACD ácido citrato dextrosa
AcMc, anticuerpo monoclonal
AcMo
ACRES sitio de amplificación creado por enzimas de
restricción (del inglés, amplification created
restriction enzyme site)
ADA adenosindesaminasa
ADE amplitud de la distribución eritrocitaria
ADH amplitud de distribución de la hemoglobina
ADN ácido desoxirribonucleico 
ADP adenosindifosfato 
AET 2-aminoetil-iso-tiouronio
AHA anemia hemolítica autoinmunitaria
ANAE alfa naftil acetato esterasa
ANB alfa naftil butirato
AP activador del plasminógeno
APAAP fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina (del
inglés, alkaline phosphatase anti-alkaline
phosphatase) 
ARN ácido ribonucleico
ASB albúmina de suero bovino 
ASOH hibridación de oligonucleótidos específicos 
de alelos (del inglés, allele-specific
oligonucleotide hybridization) 
AT antitrombina
ATP adenosintrifosfato
BCSH Comité británico de normalización en
hematología (del inglés, British Committee 
for Standards in Haematology)
C complemento
C3, C3d, componentes del complemento
C3sg
CAE naftol AS-D cloroacetato esterasa
CD cúmulo de diferenciación
CFA capacidad de fijación del anticuerpo
CHAD enfermedad por hemoaglutinina fría (del inglés,
cold haemagglutinin disease)
CHCM concentración de hemoglobina corpuscular
media
Cp citoplasmático
CPD citrato-fosfato-dextrosa
CTP citosintrifosfato 
CV coeficiente de variación
IEF enfoque isoeléctrico (del inglés, isoelectric
focusing)
Ig inmunoglobulina
IgA inmunoglobulina A
IgD immunoglobulina D
IgE immunoglobulina E
IgG immunoglobulina G
IgM immunoglobulina M
IP immunoperoxidasa 
ITCF isotiocianato de fluoresceína 
kb kilobase 
LCP leucemia de células peludas
LELV linfoma esplénico con linfocitos vellosos
LISS medio salino de baja fuerza iónica (del inglés,
low ionic strength saline) 
LLA leucemia linfoblástica aguda
LLC leucemia linfática crónica
LLC/PL leucemia linfática crónica con aumento 
de prolinfocitos
LLTA leucemia/linfoma de linfocitos T del adulto
LMA leucemia mieloide aguda
LMC leucemia mieloide crónica 
LPLB leucemia prolinfocítica de células B
2-ME 2-mercaptoetanol
MESF moléculas de fluorocromo soluble equivalente
MGG May-Grünwald-Giemsa
MO médula ósea
MPO mieloperoxidasa 
NEQAS evaluación externa de la calidad nacional (del
inglés, national external quality assessment) 
NISS medio salino de fuerza iónica normal (del inglés,
normal ionic strength saline)
OMS Organización Mundial de la Salud
p/v peso/volumen
PAI prueba de antiglobulina indirecta
PAS ácido peryódico de Schiff
pb par de bases
PBS medio salino tamponado con fosfato (del inglés,
phosphate-buffered saline)
PBS- medio salino tamponado con fosfato que 
azida- contiene azida sódica y albúmina de suero 
BSA bovino 
PCR reacción en cadena de la polimerasa
PCR-TR reacción en cadena de la polimerasa 
de la transcriptasa reversa 
PDA prueba directa de antiglobulina
PDF productos de degradación de la
fibrina/fibrinógeno
PHHF persistencia hereditaria de la hemoglobina fetal
pI punto isoeléctrico
PK piruvatocinasa
PML proteína codificada por el gen PML
POE procedimiento operativo estándar
PVP polivinil pirrolidina
QSC quantum simply cellular 
RE recuento eritrocitario
RFLP polimorfismo de la longitud de fragmentos 
de restricción
RL recuento leucocitario
RTCN recuento total de células nucleadas 
RVH región hipervariable
SDS dodecil sulfato de sodio
SHb sulfahemoglobina
SMD síndrome o síndromes mielodisplásicos
SmIg immunoglobulina de superficie (del inglés,
surface immunoglobulin) 
SMRA sistema de mutación refractario a la
amplificación
SP sangre periférica
SSc dispersión de la luz lateral (del inglés, sideways
light scatter) 
SSCP polimorfismo de conformación monocatenario
(del inglés, single-strand conformation
polymorphism)
TAE tris-acetato EDTA (tampón)
TBE tris-borato EDTA (tampón)
TBS salino tamponado con tris 
TCR receptor del linfocito T
TE tris–EDTA (tampón)
TEB tris-EDTA-borato (tampón)
TP tiempo de protrombina
t-PA activador del plasminógeno tisular 
TR transcriptasa reversa 
TT tiempo de trombina
TTPA Tiempo de tromboplastina parcial activado 
UI unidades internacionales 
UIBC capacidad no saturada de fijación del hierro 
(del inglés, unsaturated iron-binding capacity)
UV ultravioleta
v/v volumen/volumen
VCM volumen corpuscular medio
VIH virus de la inmunodeficiencia humana 
vol volumen
VPM volumen plaquetario medio
xii HEMATOLOGÍA PRÁCTICA
NOTA
Siguiendo las recomendaciones de la Organización Inter-
nacional de Estandarización (ISO), la Organización Mun-
dial de la Salud (OMS) y otras autoridades internacionales,
hemos utilizado el sistema internacional (SI) para expresar
las cantidades y las unidades (v. págs. 592-593). La con-
centración de las soluciones se expresa en mol/l (para las
concentraciones de las sustancias) o en g/l (para las con-
centraciones de la masa). Aunque somos conscientes de
que en algunos países aún se utilizan los g/dl para expre-
sar la concentración de hemoglobina, hemos empleado g/l
según la convención internacional. Para convertir esta
cantidad en g/dl, basta con dividirla por 10.
Hemos indicado la fuente de un reactivo, equipo o dis-
positivo en caso de que haya un único fabricante o cuan-
do se recomienda una fabricación específica. Si no se indi-
ca la fuente, el material o el equipo adecuado estarán
disponibles, por lo general, en diferentes suministradores.
Los catálogos de estos fabricantes y la información deta-
llada sobre el uso de sus equipos exclusivos pueden encon-
trarse en sus páginas web.
xiii