A esterilização por calor seco é um processo lento que necessita de altas temperaturas.

 A temperatura utilizada deve ser de 170 ± 5 ºC, para que assim, o calor possa atuar da forma devida.

Depois, os testes biológicos devem ser realizados no período de pelo menos uma vez por semana.

O calor seco provoca a oxidação dos constituintes celulares orgânicos, penetrados nas substâncias de uma forma mais lenta que o calor úmido e por isso exige temperaturas mais elevadas e tempos mais longos, por isso este método de esterilização só deve ser utilizado quando o contato com vapor é inadequado.